灵龟八法对肾阳虚模型豚鼠自由基代谢及血液流变学的影响

1、灵龟八法对肾阳虚模型豚鼠自由基代谢及血液流变学的影响【摘要】目的观察运用灵龟八法按时开穴灸对肾阳虚模型豚鼠的影响和作用机制。方法以安康成年豚鼠为研究对象，随机分为肾阳虚模型灵龟八法预防组、肾阳虚模型命门灸预防组、肾阳虚模型灵龟八法治疗组、肾阳虚模型命门灸治疗组、肾阳虚模型对照组等5组，以自由基代谢及血液流变学为客观指标，比拟灵龟八法按时开穴灸、命门灸对肾阳虚模型豚鼠自由基代谢及血液流变学的影响差异。结果在造模的同时进展灵龟八法按时开穴灸治可以使豚鼠不出现肾阳虚征象，且其自由基代谢及血液流变学改变不明显;命门灸预防组没有出现明显的肾阳虚征象，自由基代谢改变不明显，但血液流变学中200及30s-1

2、升高明显。在已出现肾阳虚征象，同时自由基代谢及血液流变有显著改变的肾阳虚模型豚鼠中，进展灵龟八法按时开穴灸治后肾阳虚征象消失，超氧化物歧化酶(SD)、丙二醛(DA)、200s-1根本恢复到造模前程度，30s-1无明显改变;而命门灸治疗组治疗后肾阳虚病症改善明显，DA、200s-1根本恢复到造模前程度，SD升高，但未恢复到造模前程度，30s-1无明显改变。结论灵龟八法对肾阳虚模型豚鼠具有明显的防治作用，其延缓衰老机理可能与调节自由基代谢及血液流变学亲密相关;灵龟八法按时开穴灸对肾阳虚模型豚鼠的防治作用略优于命门灸。【关键词】灵龟八法;肾阳虚模型豚鼠;自由基代谢;血液流变学“灵龟八法是运用古代的九

3、宫八卦学说，结合人体奇经八脉气血的会合，取十二经脉与奇经八脉相通的8个穴位(即八脉交会穴)，按照日时干支的推演作出按时取穴的一种针灸疗法，是人天观、整体观在针灸学上的详细运用。灵龟八法自古就是养生保健的方法1，临床中发现，采用灵龟八法针刺治疗的老年人患者群体中，其对多种老年性疾病的治疗效果良好，且具有延缓衰老的作用。为进一步探究灵龟八法延缓衰老的机制，本文以肾阳虚模型豚鼠为研究对象，运用灵龟八法按时开穴灸治，观察灵龟八法对肾阳虚模型豚鼠自由基代谢及血液流变学的影响。1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物本实验选用安康成年豚鼠50只，月龄45月，雌雄各半，体重180280g，动物由广西中医学院

4、动物中心提供动物合格证号为桂动许字(1999)第11004号。1.1.2动物饲养条件实验前，所有动物都在实验室条件下适应性饲养2，自由进食和饮水。实验室要求每日光照与黑暗各12h(光照时间为7:0019:00)、室温23。1.1.3药品及试剂造模药品选用醋酸泼泥松龙注射液(由浙江仙琚制药股份消费，仙乐牌，国药准字H33020824，规格为5l：0.125g/每支，消费批号050405)，主要试剂为SD、DA试剂盒(由南京建成生物工程研究所提供，批号分别为20220715及20220607)。1.1.5艾炷将细软艾绒捻紧成为直径约0.2、高0.4的圆锥状艾炷。1.2造模方法参照刘蓬法2进展造模。

5、将75%酒精棉球常规消毒大腿部皮肤，以4.5号注射针头肌注醋酸泼泥松龙注射液6g/100g(0.24l)，每日1次，连续用药12d，模型豚鼠即出现活动缓慢、神态萎靡、倦卧、弓背、畏寒肢冷、体毛枯疏起球、尿多、下利清谷等肾阳虚征象。1.3分组及实验方法按体重大小和性别作随机分组设计，分为肾阳虚模型灵龟八法预防组、肾阳虚模型命门灸预防组、肾阳虚模型灵龟八法治疗组、肾阳虚模型命门灸治疗组、肾阳虚模型对照组等5组，每组10只。实验于每日上午8:0012:00进展，各组处理方法如下。1.3.1肾阳虚模型灵龟八法预防组每日进展醋酸泼泥松龙注射液注射后，将豚鼠取仰卧位，四肢固定于实验台上，灵龟八法的开穴方法

6、按谢氏“灵龟八法开穴简表3进展，每日按当时所开的穴位进展艾炷灸，12d所开的穴位依次为公孙、外关、公孙、后溪、照海、列缺、公孙、列缺、照海、申脉、申脉、公孙，每日取一侧穴位，左右交替进展。腧穴定位方法按李辞蓉等著的?豚鼠针灸穴位图谱的研制?标准4及模拟骨度法进展。艾炷施灸方法：先将施灸部位的体毛剪去，再涂以少量芦荟汁(起黏贴艾炷及预防起泡作用)，放上艾炷,无瘢痕直接灸，每次连续3壮,每壮以豚鼠全身挣扎为度，每日1次。造模完毕后次日采血，本组实验完毕。1.3.2肾阳虚模型命门灸预防组每日进展醋酸泼泥松龙注射液注射后，将豚鼠取俯卧位，四肢固定于实验台上，在命门穴上进展艾炷灸。腧穴定位方法及艾炷施灸

7、方法同肾阳虚模型灵龟八法预防组。造模完毕后次日采血，本组实验完毕。1.3.3肾阳虚模型灵龟八法治疗组造模期间不进展治疗，造模完毕豚鼠出现肾阳虚征象后开场每日按灵龟八法所开的穴位进展艾炷灸，12d所开的穴位依次为照海、列缺、照海、列缺、申脉、照海、外关、照海、足临泣、外关、外关、外关，每日取一侧穴位，左右交替进展。腧穴的定位及施灸方法同肾阳虚模型灵龟八法预防组，共治疗12d。1.3.4肾阳虚模型命门灸治疗组造模期间不进展治疗，造模完毕豚鼠出现肾阳虚征象后开场每日在命门穴上进展艾炷灸。腧穴定位方法及艾炷施灸方法同肾阳虚模型灵龟八法预防组，共治疗12d。1.3.5肾阳虚模型对照组造模期间不进展治疗，

8、造模完毕豚鼠出现肾阳虚征象后也不作任何处理，继续按常规喂养12d。1.4观察指标自由基代谢指标：超氧化物歧化酶(SD)、丙二醛(DA)。血液流变学指标：200、30、5、1s-1。1.5标本采集肾阳虚模型灵龟八法预防组及肾阳虚模型命门灸预防组动物在实验前1d及造模完毕次日采血，肾阳虚模型灵龟八法治疗组、肾阳虚模型命门灸治疗组及肾阳虚模型对照组那么在实验前1d、造模完毕次日及实验完毕次日采血。1.6统计学处理采用PES软件，数据以xs表示，进展方差分析。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1各组豚鼠自由基代谢的变化2.1.1预防组豚鼠造模前后SD及DA的变化造模完毕后灵龟八法预防组及命门灸预防组未出

9、现肾阳虚征象，SD、DA的改变不明显。见表1。2.1.2治疗组和模型对照组在实验中SD及DA的变化灵龟八法治疗组、命门灸治疗组及对照组经造模后SD降低、DA升高，与造模前相比有显著性差异。灵龟八法治疗组经灵龟八法按时开穴灸治后肾阳虚病症根本消失，SD升高、DA降低，与造模前相比无显著性差异;命门灸治疗组经命门灸后肾阳虚病症明显改善，SD升高，但与造模前相比仍有差异，DA降低，与造模前相比无显著性差异;而肾阳虚模型对照组的肾阳虚病症、SD、DA均无明显变化，与造模前相比差异性显著。见表2。2.2各组豚鼠在实验中血液流变学的变化2.2.1预防组豚鼠造模前后血液流变学的变化造模完毕后灵龟八法预防组未

10、出现明显肾阳虚征象，且200s-1、30s-1、5s-1、1s-1无明显改变;命门灸预防组未出现明显肾阳虚征象，但200s-1及30s-1升高明显，差异有统计学意义，5、1s-1无明显改变。见表3。2.2.2治疗组和模型对照组在实验中血液流变学的变化在实验中，造模完毕后灵龟八法治疗组、命门灸治疗组及对照组出现明显的肾阳虚病症，且200、30s-1升高，差异有显著性意义，5、1s-1无明显改变。经治疗后，灵龟八法治疗组及命门炙治疗组的肾阳虚病症根本消失，200s-1降低，与造模前相比差异无显著性意义，30s-1那么无明显改变;而造模完毕12d后，不经任何治疗的组的肾阳虚病症、200、30、5s-

11、1等与造模完毕时相比均无明显改变。见表4。表1预防组豚鼠造模前后SD及DA比拟表2治疗组和模型对照组豚鼠SD及DA比拟与造模前比拟：1)P0.01，2)P0.05;与治疗前比拟：3)P0.01,4)P0.05表3预防组豚鼠造模前后血液流变学比拟表4治疗组和模型对照组豚鼠在实验中血液流变学比拟与造模前比拟：1)P0.01，2)P0.053讨论3.1灵龟八法按时开穴灸对肾阳虚模型豚鼠有明显的防治作用在造模的同时进展灵龟八法按时开穴灸治可以使豚鼠不出现肾阳虚征象，且其自由基代谢及血液流变学改变不明显，而命门灸预防组没有出现明显的肾阳虚征象，自由基代谢改变不明显，但血液流变学中200s-1及30s-1

12、升高明显。在已出现肾阳虚征象，同时自由基代谢及血液流变学有显著改变的肾阳虚模型豚鼠中，进展灵龟八法按时开穴灸治后肾阳虚征象消失，SD、DA、200s-1根本恢复到造模前程度，30s-1无明显改变;而命门灸治疗组治疗后肾阳虚病症改善明显，DA、200s-1根本恢复到造模前程度，SD升高，但未恢复到造模前程度，30s-1无明显改变。说明灵龟八法按时开穴灸治对肾阳虚模型豚鼠具有明显的防治作用，可以有效调整其自由基代谢及血液流变学，其作用略优于命门灸预防组。因此，鉴于肾阳虚模型与衰老模型内分泌程度的相似性，故本实验采用肾阳虚模型进展延缓衰老的研究。血液流变学是研究血液及其有形成分的流动性、变形性和聚集性的变化规律，是检测微循环的重要指标，其变化可以反响体内微循环的状态。在正常情况下，血液在血压的作用下在血管内流动，并随着血管性状(血管壁情况和血管形状等)及血液成分(黏度)的变化而变化，维持正常的血液循环。当血液黏度变大时，血液流动性就变差，血液一旦运行不畅，不仅不能供应脏腑组织器官营养，而且会导致机体发生新的病理变化，从而加速机体的老化。人体衰老及多种老年