药物分析：羧酸及其酯类药物的分析课件

1、羧酸及其酯类药物的分析羧酸及其酯类药物的分析药物分析学质量控制药 典鉴 别纯度检查含量测定药物分析学质量控制药 典鉴 别纯度检查含量测定各类（个）药物分析方法结 构 Chemical Structure of Drug（Function Group） 理化性质Physical and Chemical Properties具体分析方法Analytical MethodRelationship? The Key各类（个）药物分析方法结 构 Chemical Struct本章要求掌握芳酸及其酯类药物的结构特点和主要性质掌握鉴别和含量测定的基本原理和方法（以水杨酸类为代表）熟悉阿司匹林等的特殊杂质检

2、查了解脂肪酸及其酯类药物的分析本章要求掌握芳酸及其酯类药物的结构特点和主要性质2022/9/265芳酸酸性强度依次: 无机酸、芳酸、 碳酸、 苯酚 注意（芳酸类结构）：共同特点：苯环、羧基药理作用：抗炎、止痛、退热、抗凝血羧基游离、形成盐或酯PKa 3-6pKa1 6.38 9.952022/9/245芳酸酸性强度依次: 无机酸、芳酸、 碳酸典型的非甾体抗炎药物水杨酸类苯甲酸类芳基乙酸类芳基丙酸类 其他芳酸类阿司匹林、对氨基水杨酸钠甲芬那酸、丙磺舒、苯甲酸钠双氯芬酸钠布洛芬 普利类、他汀类、 氯钡丁酯典型的非甾体抗炎药物水杨酸类阿司匹林、对氨基水杨酸钠一、典型药物结构sodium aminos

3、alicylate对氨基水杨酸钠水杨酸类一、典型药物结构sodium aminosalicylate苯甲酸类苯甲酸类芳基烷酸类布洛芬 ibuprofen芳基烷酸类布洛芬 ibuprofen2022/9/2610氯贝丁酯 clofibrate其他芳酸类2022/9/2410氯贝丁酯 clofibrate其他芳2022/9/2611 结构特点苯环 (phenyl ring) 羧基 (carboxyl)邻位-酚羟基 (phenol hydroxyl)个别药物特征取代基2022/9/2411 结构特点苯环 (phenyl rin游离羧基阿司匹林酯键苯环光谱pKa = 3.49H游离羧基阿司匹林酯键苯环

4、pKa = 3.49H2022/9/2613 理化性质溶解性相似相溶的原则对氨基水杨酸钠 溶于水阿司匹林 溶于乙醇2022/9/2413 理化性质溶解性芳酸的酸性强度与分子中芳环、取代基(吸电子、给电子)、及其连接位置有关酸性芳酸具游离羧基，呈酸性pKa为36，属中等强度的酸或弱酸可用于含量测定芳酸的酸性强度与分子中芳环、取代基(吸电子、给电子)、及其连如酸性大小比较：水杨酸 阿司匹林 苯甲酸 OCOCH3邻位-OH，吸电子基团 酸性增加分子内氢键，增加其极性 酸性增加pKa 2.953.49 4.26如酸性大小比较：OCOCH3邻位-OH，吸电子基团 水解性芳酸酯可水解，碱性条件下水解完全可

5、用于鉴别、特殊杂质产生依据、含量测定酸性介质: 水解-酯化平衡，不可能全部水解碱性介质: 过量碱(氢氧化钠和碳酸钠)中和产生的酸， 可水解完全水解性可用于鉴别、特殊杂质产生依据、含量测定酸性介质: 含酚羟基、潜在酚羟基的水杨酸类 与三氯化铁试液反应，显色重氮化反应、重氮化-偶合反应含芳伯氨基的对氨基水杨酸钠含硫的丙磺舒 分解生成硫化物官能团反应特性UV和IR特征可用于鉴别、含量测定可用于鉴别、含量测定含酚羟基、潜在酚羟基的水杨酸类 与三氯化铁试液反应，显色重氮2022/9/2618碱性条件：加速水解、完全水解二、鉴别试验 水解反应2022/9/2418碱性条件：加速水解、完全水解二、鉴别试20

6、22/9/2619+ CH3COONa2022/9/2419+ CH3COONa2022/9/2620加水煮沸水解加氢氧化钠煮沸水解稀盐酸酸化成弱酸性阿司匹林：对氨基水杨酸钠：双水杨酯：FeCl3紫色类配位化合物 FeCl3反应2022/9/2420加水煮沸水解加氢氧化钠煮沸水解稀盐酸酸 具酚羟基或潜在酚羟基的药物 类似紫色铁配位化合物+-6pH43 FeClOHAr水杨酸及其盐类：强酸会导致分解褪色，碱性会导致铁盐水解产生Fe(OH)3 具酚羟基或潜在酚羟基的药物 类似紫色铁配位化合物水杨酸 ChP（2010）鉴别 （1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色例子阿司匹林 ChP（2

7、010）鉴别 （1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色水杨酸 ChP（2010）例子阿司匹林 2022/9/2623苯甲酸类：丙磺舒钠盐在pH 5.06.0 水溶液中与三氯化铁试液反应，生成米黄色沉淀2022/9/2423苯甲酸类：丙磺舒钠盐在pH 5.062022/9/2624应用：对氨基水杨酸钠、贝诺酯水解产物，在稀盐酸中与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐再进一步偶合作用得到有色产物具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 重氮化-偶合反应2022/9/2424应用：对氨基水杨酸钠、贝诺酯水解产物，2022/9/2625丙磺舒的鉴别：熔融显硫酸盐反应 分解

8、产物的反应2022/9/2425丙磺舒的鉴别：熔融显硫酸盐反应 分解产 紫外光谱法 最大、最小吸收波长 最大波长及其吸收系数或吸光度 两特征吸收波长及其吸光度之比 应注明所用溶剂、药物的浓度等条件 UV鉴别参数： 紫外光谱法 最大、最小吸收波长 应注明所用溶剂、药物的浓2022/9/2627溶剂max / min A水杨酸二乙胺20g/mL乙醇257nm / 227、297nm丙磺舒20g/mL盐酸乙醇249nm0.67甲芬那酸20g/mL盐酸甲醇279nm350nm 0.69-0.74 0.59-0.60对氨基水杨酸钠NaOH265nm/299nm比值： 1.50-1.56例子2022/9/

9、2427溶剂max / min A水杨酸二2022/9/2628广泛应用于该类药物的原料药中红外：4000400 cm-1特征区： 40001300 cm-1 2800 3000 cm-1 CH3 1600 1850 cm-1 C=O 指纹区：1250400 cm-1 红外光谱法2022/9/2428广泛应用于该类药物的原料药中红外：2022/9/2629阿司匹林羟基OH3230 cm1羰基c=o 1660 cm1邻位取代苯环 Ar-H 775cm1苯环 C=C 1610、1570、1480、1460 cm1羧酸酯CO 1310、1230、1188 cm12022/9/2429阿司匹林羟基OH

10、3230 cm1羰2022/9/2630 阿司匹林中特殊杂质的检查 对氨基水杨酸钠中间氨基酚等 有关物质的检查甲芬那酸中 2, 3 -二甲基苯胺的检查三、特殊杂质检查2022/9/2430 阿司匹林中特殊杂质的检查三、特殊杂质2022/9/2631阿司匹林中特殊杂质的检查 检查方法： （阿司匹林溶于碳酸钠，杂质不溶） 溶液的澄清度 检查碳酸钠试液中的不溶物：未反应完全的水杨酸脱羧产生的 苯酚乙酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯一定量阿司匹林在碳酸钠试液中溶解应澄清。苯酚发生副反应产生的 无羧基2022/9/2431阿司匹林中特殊杂质的检查 检查方法： 2022/9/2632Chp(2005) 检查

11、原理及方法： 阿司匹林无酚羟基，不能与直接高铁盐作用 水杨酸可直接与高铁盐反应呈色游离水杨酸 来源：生产中乙酰化不完全、贮藏中水解都会产生检查原因：有毒；易氧化，形成醌型有色物质乙酰化7075对照法：与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，控制游离水杨酸的限量。2022/9/2432游离水杨酸 来源：生产中乙酰化不完全、2022/9/2633游离水杨酸 Chp(2010)检查方法： 流动相： 乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70） 固定相： ODS 定量方法：外标一点法限量规定：原料 0.1%阿司匹林片 0.3%阿司匹林肠溶片 1.5%阿司匹林栓 3.0% HPLC法为什么原料药和制剂都

12、要进行水杨酸的检查？2022/9/2433游离水杨酸 Chp(2010)检查方法2022/9/2634有关物质 检查方法：HPLC除“游离水杨酸”之外的其他合成副产物包括：对照液：供试液稀释200倍固定相： ODS流动相: A为乙腈- 四氢呋喃- 冰乙酸-水（205570） B为乙腈（ 梯度洗脱） 苯酚 乙酸苯酯水杨酸苯酯 乙酰水杨酸苯酯双水杨酯 乙酰水杨酰水杨酸水杨酸酐 乙酰水杨酸酐主成分自身对照法杂质峰面积和不得大于对照液主峰面积2022/9/2434有关物质 检查方法：HPLC除“游离水2022/9/2635对氨基水杨酸钠中间氨基酚等有关物质的检查检查方法：HPLC有关物质：间氨基酚、5

13、- 氨基水杨酸、其他未知杂质来源：未反应完全的间氨基酚原料，贮藏过程中脱羧产生检查原因：易氧化成醌型化合物，使药物变色；有毒间氨基酚：外标法定量其它有关物质：主成分自身对照法，限量检查固定相：ODS流动相：甲醇-10% 四丁基氢氧化钠溶液 -0.05 mol/LNa2HPO4-0.05 mol/LNaH2PO4（ 20019400400） 2022/9/2435对氨基水杨酸钠中间氨基酚等有关物质的检2022/9/2636 酸碱滴定法 UV法 HPLC法直接滴定法水解后剩余滴定法非水溶液滴定法四、含量测定2022/9/2436 酸碱滴定法直接滴定法四、含量测定2022/9/2637直接滴定法水解

14、后剩余滴定法两步滴定法 酸碱滴定法强碱滴定本类药物的羧基 2022/9/2437直接滴定法 酸碱滴定法强碱滴定本类药物酸碱中和，反应摩尔比1:1乙醇作用：溶解ASA 防止ASA在滴定过程水解中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性直接滴定法酯键水解，干扰测定酸碱中和，反应摩尔比1:1乙醇作用：溶解ASA中性乙醇：对指2022/9/2639阿司匹林 ChP（2010）注意事项用中性乙醇作溶剂不断搅拌、稍快滴定，以防止局部碱度过大，促使水解适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定2022/9/2439阿司匹林 ChP（2010）注意事项2022/9/2640USP（32）

15、 水解： 剩余滴定： 2NaOH（过量）H2SO4Na2SO42H2O同时进行空白试验： 不加供试品的空白试剂相同条件下试验水解后剩余滴定法酸碱中和、酯键水解，反应摩尔比1:22022/9/2440USP（32） 水解： 2022/9/2641剩余滴定法为什么进行空白试验？1ml 氢氧化钠（0. 5mol/l）1ml 硫酸（0. 25mol/l）相当消除空白试剂及CO2的影响空白消耗的体积与含量计算有关滴定液吸收CO2转变成Na2CO3由于酚酞为指示剂硫酸回滴时化学计量关系不同2022/9/2441剩余滴定法为什么进行空白试验？1ml 空 白滴 定NaOHH2SO4V0VV2V1剩余滴定法消耗

16、NaOHV1 V0-VNaOHH2SO4空 白滴 定NaOHH2SO4V0VV2V1剩余滴定法消耗N 反应原理：反应分两步进行 第一步 中和（酸杂质） 第二步 水解、剩余滴定问题： 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片可以采用酸碱滴定法吗？辅料会不会干扰测定？（含酒石酸、水杨酸和醋酸等酸性稳定剂）两步滴定法 适用对象：阿司匹林片、肠溶片等制剂 反应原理：反应分两步进行问题：（含酒石酸、水第一步 中和不用于含量计算第一步 中和不用于含量计算2022/9/2645第二步 水解后剩余滴定 水解： 2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O剩余滴定反应摩尔比为11 2022/9/2445第二步 水解后剩

17、余滴定 水解： 2022/9/2646片剂含量测定结果的计算 原料含量2022/9/2446片剂含量测定结果的计算 原料含量2022/9/2647ChP 水杨酸二乙胺乳膏剂、丙磺舒片剂 紫外分光光度法直接UV法2022/9/2447ChP 水杨酸二乙胺乳膏剂、丙磺舒片2022/9/2648丙磺舒片剂含量测定：取本品10 片，精密称定，研细，精密称取适量，置200 ml 量瓶中，加乙醇150 ml 与盐酸溶液（9 100）4 ml，置70水浴上加热30 min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 ml，置100 ml 量瓶中，加盐酸溶液（9 100）2 ml，用乙醇稀释至刻度，

18、摇匀，在249 nm 波长处测定吸光度，按C13H19NO4S 的吸收系数为338 计算含量。例子D=2001005=40002022/9/2448丙磺舒片剂含量测定：取本品10 片，精2022/9/2649USP 阿司匹林胶囊、栓剂（除去辅料及水杨酸的干扰）样品填料多孔滤板柱分配色谱-UV法2022/9/2449USP 阿司匹林胶囊、栓剂样品填料多2022/9/2650阿司匹林、水杨酸 钠盐同时保留洗脱 (酸性不同)：保留： 中性或碱性杂质（除去） 只游离出阿司匹林 阿司匹林氯仿洗脱醋酸酸化冰醋酸-氯仿 测定：280nm处测定吸收度，以氯仿为空白校正对照法定量硅藻土碳酸氢钠例子2022/9/2450阿司匹林、水杨酸 钠2022/9/2651 ChP 对氨基水杨酸钠、阿司匹林等芳酸制剂流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水 甲醇-1%冰醋酸水溶液 甲醇-磷酸盐缓冲液离子抑制色谱法 高效液相色谱法要求： 色谱系统适用性试验 外标法定量 反相HPLC-流动相？2022/9/2451 ChP 对氨基水杨酸钠、阿司匹林等2022/9/2652TEXTTEXTTEXTTEXT 流动相中