正交实验法优选复方降脂灵的提取工艺

1、正交实验法优选复方降脂灵的提取工艺【摘要】目的优选中药复方降脂灵的提取工艺。方法采用正交实验法，以出膏率和提取液中齐墩果酸的含量为指标进展优眩结果复方降脂灵的最正确提取工艺为加水12倍量，提取3次，2h/次。结论对于出膏率，提取次数有显著性影响；对于齐墩果酸，提取次数、加水量和提取时间3个因素均无显著性影响。【关键词】复方降脂灵正交实验提取工艺齐墩果酸出膏率复方降脂灵(原名丹七降脂汤)为广东药学院郭姣教授临床经历方，主要由女贞子、白术、杜仲等8味中药组成，临床上在降血脂、降血糖和改善血流变等方面均有良好的作用。其汤剂和粉末胶囊经临床、初步药效学研究，均证实疗效确切而无明显毒副作用1。女贞子是本

2、复方中的君药，而齐墩果酸是女贞子的主要药效成分之一。齐墩果酸除了能用于治疗急性黄疸型肝炎、慢性迁延型与活动型肝炎和抗癌辅佐药物外，还具有降糖、降血脂、抗炎、抗病毒、抗衰老及增强免疫的作用2。通过水提娶90乙醇提娶70乙醇提娶半仿生提取和综合提取等不同提取工艺的药理学实验，结果说明以水提取法的药效为最好3。水提取法工艺简单、本钱低，而且药效好。为了研究水提取工艺的最正确条件，用正交实验法，以出膏率和齐墩果酸含量为考察指标，对水提取工艺条件进展优选，为消费提供根据。1材料与仪器1.1材料女贞子、杜仲、大蓟、白术、田七等中药均购自广东省药材公司，经广东药学院生药学专家刘基柱教师鉴定为真品。1.2仪器

3、与试剂T6紫外可见分光光度计北京普析通用仪器；HH-6电子恒温水浴锅苏州威尔实验用品；GZX-9420BE电热恒温鼓风枯燥箱上海博迅实业医疗设备厂。齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供；香草醛指示剂，天津市福晨化学试剂厂；薄层层析硅胶H层析用，青岛海洋化工厂和羧甲基纤维素纳盐-Na8001200为化学纯；其它试剂均为分析纯。齐墩果酸对照品使用液：精细称定齐墩果酸对照品10g，用三氯甲烷配制成浓度为0.2g/l的溶液。硅胶板的制备：称取硅胶H5g，放入研钵中，参加1-Na溶液适量，调成糊状，均匀涂布于干净的玻璃板(204)上，使其外表均匀光滑。于室温下晾干后，置于烘箱内加热活化，在温度10

4、5左右保持活化30in，然后放入枯燥箱中保存，备用。2方法2.1工艺设计采用加热回流的提取方法，提取时选择了加水量、提取时间及提取次数3个因素，每个因素选取三个程度设计了正交实验方案，实验因素程度见表1。根据以上因素程度,选择L9(3)4正交设计表，按照正交实验表项下的实验条件进展提取，用出膏率及齐墩果酸的含量作为考察指标，对水提工艺条件进展优眩2.2样品溶液的制备药材经60恒温烘30in，稍加捣碎，称取处方药材共64g。按正交实验表项下设计的实验条件以加热回流方式进展提取，合并水提取液。将上述提取液浓缩，定容至一定体积，制得样品溶液。表1提取实验程度因素略2.3出膏率测定精细量取一定体积样品

5、溶液，置于已枯燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸发至近干，再放置烘箱于105烘34h，置枯燥器中冷却至室温，精细称量质量，按下式计算出膏率。出膏率%=VV100%(g)为浸膏质量，(g)为药材质量，V为样品溶液总体积，V为量取样品溶液的体积。转贴于论文联盟.ll.2.4齐墩果酸的含量测定2.4.1标准曲线的制备采用高氯酸香草醛比色法测定齐墩果酸的含量4。精细量取齐墩果酸对照品使用液0.2g/l的三氯甲烷溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6l0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2g，分别置于刻度离心管中，水浴挥干溶剂，各精细参加5香草醛乙酸溶液0.2l，高氯酸0.8l，混匀，置于

6、70恒温水浴上加热15in，冷却至室温，精细参加醋酸乙酯4l，摇匀。以试剂为空白，在555n处测定吸光度值，结果见表2。并以吸光度A对对照品使用液体积V进展直线回归，得回归方程A0.9425V0.0052，r=0.9978。表2标准曲线测定数据略2.4.2样品测定精细量取一定体积的样品溶液，浓缩成稠膏，枯燥，称量质量。精细称取上述膏体10g于圆底烧瓶中，参加三氯甲烷30l，70恒温水浴回流1h。用分液漏斗分出三氯甲烷层，于残渣中再参加三氯甲烷30l，同样回流提取1h，合并三氯甲烷溶液，无水Na2S4枯燥，过滤，挥干溶剂，再用三氯甲烷定容至5.00l，备用。用精细汲取样品溶液5l，对照品溶液30

7、l点于同一硅胶板上，用三氯甲烷甲醇冰乙酸54011展开10，取出，挥干溶剂，再放入饱和碘蒸气缸中显色，定位后再挥去碘，将斑点分别刮入具塞刻度离心管中，各参加5香草醛乙酸溶液0.2l，高氯酸0.8l，混匀，同“2.4.1标准曲线的制备项下操作。离心后取上清液于555n处测定吸光度，同时做空白实验在硅胶板上刮取与样品斑点同样大小的空白硅胶进展实验。根据吸光度A，由回归方程计算出齐墩果酸的含量。3结果出膏率正交实验结果见表3。由表3可知，因素的极差很小，因此把因素与空白项合并，作为误差项，方差分析结果见表4。齐墩果酸含量测定正交实验结果见表5，方差分析结果见表6。表3出膏率L9(3)4正交实验略由表

8、3可见，RARBR，说明对出膏率的影响程度依次为AB，即提取次数是主要因素，其次是加水量，提取时间的影响最校A因素中A3A2A1，B因素B3B2B1，因素321，从节约的角度，选择2。从表4可见，提取次数对出膏率有显著影响，加水量和提取时间无显著性影响。因此，以出膏率为指标，优选出复方降脂灵水提取工艺的最正确条件为A3B32。表4出膏率方差分析略从表5可见，优先顺序为AB，即提取次数是主要因素，其次是提取时间，加水量的影响最校A因素中A3A2A1，B因素B3B1B2，因素231。由表6可见，提取次数，加水量和提取时间3个因素对齐墩果酸的含量均无显著性影响。因此，以齐墩果酸含量为指标，优选出复方

9、降脂灵水提取工艺的最正确条件为A3B32。表5齐墩果酸L9(3)4正交实验略表6齐墩果酸方差分析略正交实验结果说明，综合出膏率和齐墩果酸含量指标，最正确提取工艺为A3B32，即加水量为药材量的12倍，提取时间2h及提取3次，出膏率及所得齐墩果酸的含量最高。对于出膏率，提取次数有显著性影响，加水量和提取时间无显著性影响；对于齐墩果酸，提取次数、加水量和提取时间3个因素的影响均无显著性差异。【参考文献】1唐春萍,郭姣,陈红红,等.调脂灵对高脂血症大鼠降脂作用的实验研究J.中国实验方剂学杂志,2022,13(5):24.2田丽婷,马龙,堵年生.齐墩果酸的药理作用研究概况J.中国中药杂志,2002,27(12):884.3郭彤,郭姣,何伟,等.丹七降脂汤治疗高