各款荧光定量PCR仪的性能比较

1、各款荧光定量PCR仪的性能比较各款荧光定量PCR仪的性能比较各款荧光定量PCR仪的性能比较各款荧光定量PCR仪的性能比较自己从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作，用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪，如ABI5700，ABI7700，ABI7000，ABI7300，ABI7500，MJopticon，MJopticon2，bio-radICycler，LightCycler1.5，roter-gene3000，StratageneMx3000P，line-gene等等。这种仪器各有各的特点，但都存在不足之处。ABI公司的荧光定量PCR仪产品比很多，成系列，但目前而言ABI5700和ABI770

2、0不能够实时在线地检测荧光，所以已经退出历史舞台，特别是ABI7700，不仅很贵，而且采用苹果机电脑，使用很不方便。ABI7000目前也已经裁汰，我用的这台仪器老出问题，曲线极不仅滑，但同样的反应系统在国产机杭州博日line-gene上曲线特别好，在ABI7500上曲线也很圆滑，所以，自己估计是ABI7000设计上有不足之处。而且卤钨灯特别简单坏，在南方，我们实验室平均5个月换一个，配件简单坏，后续使用成本就会高一些。现在市场上的ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改变，可是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。别的我个人感觉ABI7900（ABI公司第二代产品）有

3、些华而不实，价格应该是所有荧光定量PCR仪中最贵的，硬件上跟ABI7700差不了太多，但性能指标还不如ABI7500（ABI公司第三代产品），硬件设计上也不如ABI7500合理。所以这个型号的仪器，谁买了，用的时候会不呼被骗。ABI7500是ABI公司最成功的产品，各方面性能都不错，诚然加热模块还是有一些边缘效应，但使用中央的孔位收效能够获取保证，在96孔板使用中间的48个孔位，结果都能得到保证。总的来说，ABI公司在荧光定量领域上还是做出很多贡献的，其仪器在科研上还是能够用的，但由于硬件设计上的弊端，需要额外的ROX染料进行校正，而且占用了一个检测通道。国内的试剂厂商都不加ROX染料，科研用

4、户一般也不使用，所以其检测的正确性和重复性还是很难保证的，特别浓度较低的模板进行检测时收效不好，偏差会很大。罗氏Roche的LightCycler以运行速度快而著称，在国内市场占有率最高，其设计保证了临床诊断的正确性，又充分考虑了科研功能。但自己最先使用时老出问题，有时阳性1/3曲线做不出来，今后发现这跟其独到的毛细管设计有关系，由于毛细管很细，所以反应液在毛细管中的对流交换特别不畅，没有充分混匀时就加入毛细管会影响反应的进行，自然，热启动酶就不会有这方面的问题了。所以自己在操作时都专门将反应液混杂充分后再加入毛细管，这样在今后的实验中就没有出现过问题。自己开始使用罗氏的仪器时最怕毛细管断裂，

5、操作时特别担忧，熟练今后，规范使用随机赠予的操作配件，也没见毛细管断过。而且最重要的是，罗氏的仪器牢固性特别好，矫捷度明显比其他仪器高，这也许跟毛细管和其检测元件有关系，检测重复性也特别好，所得定量结果可信度高。自己所使用的罗氏LightCycler1.5三四年了也没出现硬件的故障。别的，采用毛细管最大的优点生怕就是能够大量节约成本，由于目前只有毛细管这种反应装置才能够采用10uL的反应系统而不影响试剂的检测矫捷度和牢固性，这样大大地节省了试剂的成本。同样用一般PCR反应管进行10uL系统的荧光定量实验，收效很差，而且明显矫捷度下降，检测结果不牢固。罗氏公司Roche推出的LightCycle

6、r2.0在原有基础上检测通道增加到六个，软件功能也更加丰富。听闻最新推出的LightCycler480是目前全球最先进的荧光定量PCR仪，打破了传统技术的瓶颈，推出了不具边缘效应的高通量荧光定量PCR仪。详尽没适用过，听闻使用特别灵便。MJ的仪器整体上而言比较牢固，但检测矫捷度不高，功能单一，检测通道不多，运行时间太长，一般一次实验要两个多小时。所谓的温度梯度功能在荧光定量PCR平台上一点用途都没有，这主若是由该技术的原理决定的，所以这个功能可是作秀了。伯乐的ICycler仪器也许是设计上的弊端还是什么原因，同样的反应系统，在该仪器进步行实验时，阳性样本的扩增曲线荧光增量比较低，检测收效不好，

7、所以在全国很少用户使用该仪器。伯乐的荧光定量PCR仪目前在国际上仍属低端产品，返修率太高。Line-gene仪器的使用比较方便，但返修率较高，但是厂家就在国内，售后服务特别及时。roter-gene3000跟罗氏公司的LightCycler有很多相似之处，可是roter-gene在操作时比较麻烦，而且采用宽泛反应管，光透性不好，影响了检测结果，这能够从其原始曲线上2/3看出来，但该仪器的软件所表现的是对数曲线，把其原始曲线上的曲析不平掩盖了，其矫捷度不高，在进行微量检测时经常会获取大量假阴性结果。StratageneMx3000P听闻是信价比最高的荧光定量PCR仪，但做工特别粗糙，打开样本仓都

8、能够看到线路和齿轮，估计是为了降低成本而偷工减料了。其采用的卤钨灯光源，使用成本也特别高。该仪器一般在使用中央孔位进行实验时，结果不错，但使用周边孔位时效果很差。而且其检测矫捷度也比较低。听闻昨年Stratagene公司由于PCR的酶入侵了美国第三浪潮公司的专利权，判罚了2200万美元，其荧光定量PCR仪也属侵权产品，这让我想起MJ破产的案例，由于MJ的荧光定量PCR仪入侵了ABI和Roche的专利权而被重罚，最后破产而被伯乐公司低价收买。若是Stratagene被罚破产的话，其不用然这么好运有公司收买它，最后的受害者是广大用户，其售后服务无法获取保证，配件得不到供应。一般而言，用户要选择什么样的仪器，要点看自己将来睁开的工作，我个人认为，在临床诊断上，仪器的牢固性和检测正确性、检测矫捷度自然是首选的指标，在科研上荧光定量PCR技术只会用于整个课题中一个环节，其结果并没有实质意义，其意义在于对后续研究的指导性，自然所得数据越正确，对后续研究的指导性就越高。结果偏差越大的仪器反而会误导用户。仪器厂商推出的所谓四色五色检测通道都是骗人的。80%的用户一辈子只用到一个通道，而且科研用户不会由于做了多通道检测实验而发好文章，除非期刊的编