病毒 (6)精品课件

1、关于病毒 (6)第一张，PPT共五十三页，创作于2022年6月第一节 病毒的一般特征及其分类 病毒是没有细胞结构，专性寄生在活的敏感宿主体内，可通过细菌过滤器，大小在0.2m以下的超微小微生物。一、病毒的特点1.个体极小。大的病毒直径在250350nm，小的病毒直径1530nm，大多数直径小于150nm。 2.专性寄生。本身不具备独立的代谢能力，只能在活的寄主细胞内生长繁殖，离开寄主细胞不具备任何生命特征。第二张，PPT共五十三页，创作于2022年6月3.没有细胞结构，只有一种核酸类型，化学组成和繁殖方式都较简单。化学组成主要是蛋白质和核酸组成的大分子化合物。 4.没有或缺乏完整的酶和能量合成

2、系统，也没有核糖体。（依靠寄主的酶和能量合成系统繁殖）。 5.在寄主细胞内的病毒对各种化学药剂和抗菌素不敏感。（可能对干扰素敏感）。经提纯分离在体外的病毒结晶，用不少的药物都可杀死之，但寄主细胞内的病毒均不敏感。 6.经提纯的病毒结晶能保持侵染力。 第三张，PPT共五十三页，创作于2022年6月二、病毒的分类 国际病毒分类委员会提出病毒的分类原则：核酸类型、结构和分子量病毒体的形状和大小病毒体的形态结构对乙醚或氯仿的敏感性抗原性在细胞培养物上的生长特性对理化因素的敏感性宿主种类；传播方式和媒介种类；流行病学特点及临床病理学特征。 第四张，PPT共五十三页，创作于2022年6月拟病毒：只含有不具

3、独立侵染性的RNA或DNA组分非细胞生物真病毒：至少含有核酸和蛋白质两种组分亚病毒类病毒：只含独立侵染性的RNA组分朊病毒：只含单一蛋白质组分第五张，PPT共五十三页，创作于2022年6月 人们习惯上仍根据病毒的宿主将病毒分为动物病毒、植物病毒、昆虫病毒、微生物病毒四类。流行性感冒病毒1、动物病毒：寄生在人体和动物细胞内，包括脊椎动物病毒和无脊椎动物动物。脊椎动物病毒： 人：流行性感冒、麻疹、肝炎、流行性乙型脑炎、腮腺炎、天花等。第六张，PPT共五十三页，创作于2022年6月第七张，PPT共五十三页，创作于2022年6月乙型肝炎病毒第八张，PPT共五十三页，创作于2022年6月第九张，PPT共

4、五十三页，创作于2022年6月第十张，PPT共五十三页，创作于2022年6月埃博拉病毒Ebola virus 诺瓦克病毒Norwalk virus出血热肠炎第十一张，PPT共五十三页，创作于2022年6月 家畜：口蹄疫、猪瘟、牛瘟、鸡瘟。人畜共患：狂犬病病毒即“猪繁殖与呼吸综合征” 猪蓝耳病第十二张，PPT共五十三页，创作于2022年6月无脊椎动物病毒： 主要在节肢动物的昆虫纲中发现，也见于蜘蛛纲、甲壳纲。棉铃虫病毒对虾白斑杆状病毒第十三张，PPT共五十三页，创作于2022年6月2、植物病毒 绝大多数种子植物均能发生病毒病，尤其是禾本科、豆科、十字花科等。植物病毒和其它病毒一样是严格寄生物，但

5、它们的专化性不强，一种病毒往往能寄生于不同科、属、种的栽培、野生植物上。第十四张，PPT共五十三页，创作于2022年6月3、微生物病毒：细菌噬菌体真菌真菌病毒单细胞藻类噬藻体放线菌噬放线菌体噬蓝藻体第十五张，PPT共五十三页，创作于2022年6月三、亚病毒 经典的病毒即真病毒，是一种极为简单的生命形式，却不是最简单的生命形式。目前所知最简单的生命形式称之为亚病毒，没有真病毒的形态结构，能利用非自身编码的酶系统进行复制，有侵染性，并可在寄主中引起症状。 亚病毒包括：类病毒、卫星RNA（卫星病毒）、拟病毒、朊病毒。 第十六张，PPT共五十三页，创作于2022年6月 (一)类病毒(viroid) 是

6、寄生于高等生物细胞中一类最小的新病原体，有类似病毒的一面，故称类病毒，属于亚病毒或不完全病毒。在结构组成上比病毒更简单，仅是一个没有蛋白质外壳的游离的环状单链RNA分子。 类病毒是具有高度侵染性的病原体，这种小分子RNA能在敏感细胞中自我复制，并不需要辅助病毒（由于这种不同于已知病毒的特性，称为类病毒）。 第十七张，PPT共五十三页，创作于2022年6月（二）拟病毒（virusoid) 拟病毒是一种类似于类病毒的病毒，其核酸组成，大小，二级结构（分子内部的碱基配对形成的二级结构）均与类病毒相似，故又称之为类似类病毒。(ViroidLike RNA)，又称为拟病毒，碱基对350个左右 ，但是依靠

7、辅助病毒才能复制。(三)朊病毒（prion=Protein infection，1983年划分) 它是一类侵染动物并在宿主细胞内复制的无免疫性的小分子疏水蛋白质，简称蛋白质侵染因子。与羊瘙痒症、疯牛病、人库鲁病、阿尔茨海默氏症等脑退行性疾病有关。第十八张，PPT共五十三页，创作于2022年6月第十九张，PPT共五十三页，创作于2022年6月 一、病毒的形态和大小 大多数病毒比细菌小得多，但比多数蛋白质分子大，大小相差很远，直径在10-200nm之间。大多数病毒个体直径小于150nm，较大的直径在250350nm，小的直径1530nm。 第二节 病毒的形态和结构痘病毒疱疹病毒粘病毒噬菌体第二十张

8、，PPT共五十三页，创作于2022年6月最大的病毒米米病毒Mimivirus: Mimick-ing microbe virus直径可达650nm 第二十一张，PPT共五十三页，创作于2022年6月形态：球形、卵圆形、砖形、杆状、丝状、蝌蚪状等第二十二张，PPT共五十三页，创作于2022年6月植物病毒：多呈杆状、丝状，也有不少呈球状（二十面体）动物病毒：主要是球形、卵圆形、砖形烟草花叶病毒脊髓灰质炎病毒第二十三张，PPT共五十三页，创作于2022年6月细菌病毒：多为蝌蚪形，也有微球形和丝状的第二十四张，PPT共五十三页，创作于2022年6月二、病毒的化学组成和结构（一）化学组成 大多数由核酸和

9、蛋白质组成，有的还有脂类、多糖，有的噬菌体含有脂肪。1、核酸：病毒只含一类核酸（DNA或RNA）植物病毒：大多数为RNA，少数DNA噬菌体：大多数为DNA，少数RNA动物病毒：部分是RNA，部分是DNA 2、蛋白质：主要的组成成分 功能：（1）构成病毒粒子外壳，起保护作用（2）决定病毒感染的特异性（3）决定病毒的抗原性（4）构成酶。结构复杂的大病毒多数含有酶第二十五张，PPT共五十三页，创作于2022年6月衣壳粒（capsomere）：构成病毒粒子的最小形态单位，每个衣壳粒是由1-6个同种多肽分子折叠缠绕而成的蛋白质亚单位，它以对称的形式有规律地排列成杆状、球状、二十面体或其他形状。蛋白质衣壳

10、（capsid）：由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳。核衣壳（nucleocapsid）：病毒蛋白质衣壳和核酸的合称。（二）结构：蛋白质衣壳+核酸内芯被膜（envelope）：也称囊膜、外膜，在核衣壳外包裹的包膜，由脂类和多糖组成。刺突（spike）：有些病毒粒子表面，尤其是在有囊膜的病毒粒子表面有突起物，也称囊膜突起如粘病毒等。第二十六张，PPT共五十三页，创作于2022年6月第二十七张，PPT共五十三页，创作于2022年6月核衣壳的对称形式螺旋对称型二十面体立体对称型复合对称 型第二十八张，PPT共五十三页，创作于2022年6月一、病毒的繁殖过程 包括吸附、侵入、复制、聚集与

11、释放四步第三节 病毒的繁殖第二十九张，PPT共五十三页，创作于2022年6月1、吸附（adsorption）： 在通常情况下，敏感细胞表面具有特异性表面化学组分作为接受部位，病毒也含有与其“互补”的特异性化学组分作为吸附部位，这种吸附作用是不可逆的。T2噬菌体是以尾部末端和寄主的受点吸附的。一种细菌可以被多种噬菌体感染，噬菌体在同一寄主细菌的不同受点上吸附。第三十张，PPT共五十三页，创作于2022年6月2、 侵入（penetration）：噬菌体吸附在细菌细胞壁的受点上以后，尾部的酶水解细胞壁产生一个小孔，然后尾鞘收缩将核酸注入细菌细胞中，蛋白质壳体留在外面。从吸附到侵入，时间间隔很短，只有

12、几秒到几分钟。 第三十一张，PPT共五十三页，创作于2022年6月 病毒侵入的方式取决于宿主细胞的性质尤其是其表面结构，至少有四种方式：（1）借吞噬作用或吞饮病毒将整个病毒粒子包入敏感细胞，如痘类病毒；（2）具脂蛋白囊膜的的病毒，其囊膜与细胞膜融合或相互作用脱去囊膜，核衣壳直接侵入细胞质中，如流感病毒；（3）某些病毒粒子与宿主细胞膜上的受体相互作用，使核衣壳侵入细胞中，如脊髓灰质炎病毒；（4）有的病毒能以完整的病毒粒子直接通过宿主细胞膜穿入细胞质中，如呼肠孤病毒。 第三十二张，PPT共五十三页，创作于2022年6月3、 核酸复制（biosynthesis）：噬菌体核酸进入寄主细胞后，操纵寄主细

13、胞的代谢机能，大量复制噬菌体核酸，但不形成带壳体的粒子，称为潜育期。第三十三张，PPT共五十三页，创作于2022年6月4、 聚集与释放（assembly and release）： 病毒核酸的复制与蛋白质的合成是分开进行的。寄主细胞合成噬菌体壳体（T2噬菌体包括头部尾部）和核酸组合形成完整的噬菌体粒子。噬菌体粒子成熟，引起寄主细胞的裂解释放出病毒粒子。第三十四张，PPT共五十三页，创作于2022年6月第三十五张，PPT共五十三页，创作于2022年6月二、病毒的溶源性 溶源性（lysogeny）：是温和噬菌体侵入细菌细胞后产生的一种特性。当温和噬菌体侵入宿主细胞后，其DNA随着宿主细胞DNA的复

14、制而复制，但噬菌体的蛋白质不能合成，宿主细胞也不裂解，继续进行正常的分裂繁殖，在偶尔情况下，某一代中其中一个宿主细胞发生裂解释放出新的子代噬菌体，而在许多代不发生裂解的宿主细胞中又检查不到噬菌体的存在，但它们却具有产生成熟噬菌体粒子的潜在能力。人们把温和噬菌体侵入宿主细胞所引起的这种特性叫溶源性。第三十六张，PPT共五十三页，创作于2022年6月第三十七张，PPT共五十三页，创作于2022年6月一 、病毒的培养特征（一）病毒在液体培养基中的培养特征 浑浊菌悬液接种噬菌体透明裂解液（二）病毒在固体培养基上的培养特征第四节 病毒的培养噬菌斑荧光假单胞菌噬菌斑：将噬菌体接种在敏感细菌形成的菌落上，噬

15、菌体在接种部位进行反复感染，将宿主细菌的菌落裂解成空斑，即噬菌斑。第三十八张，PPT共五十三页，创作于2022年6月二、病毒的培养基 病毒的培养基即相对应的敏感宿主细胞，要具备如下条件：1、 必须是活的敏感动物或是活的敏感动物组织细胞2、 能提供病毒附着的受体3、 敏感细胞内没有破坏特异性病毒限制性核酸内切酶 脊椎动物病毒的培养基：胚组织细胞、人组织细胞、人肿瘤细胞、动物组织细胞、鸡、鸭细胞、敏感动物 植物病毒的培养基：相应的敏感植株和敏感植株的组织 噬菌体的培养基：相应的敏感细菌第三十九张，PPT共五十三页，创作于2022年6月三、病毒的培养（一）动物病毒的培养 动物病毒的培养方法有动物接种

16、、鸡胚接种和组织培养技术。第四十张，PPT共五十三页，创作于2022年6月1、 动物病毒的空斑试验（1）单层细胞的制备和培养 将动物组织切成0.5-1 mm3小块 洗涤 5%胰酶消化10-15 min 收集细胞并计数 加入细胞生长液并分装 37培养2-3d第四十一张，PPT共五十三页，创作于2022年6月（2）病毒样品的采集与制备 固体样品加液体培养基制成悬液，10000r/m 离心10 min，取上清液备用。 液体样品直接离心。 空气样品用泵抽取至长有宿主细菌的平板上，或是将长有宿主细菌的平板在空气中暴露30-60min。纯化：40，000 100，000g离心场中沉降1-2 h。第四十二张

17、，PPT共五十三页，创作于2022年6月（3）动物病毒的接种与观察空斑：是原代细胞或传代单层细胞被病毒感染后，细胞被病毒蚀空形成的空斑（也称蚀斑）。一个空斑代表一个病毒。通过计数可知单位体积样品中的病毒数。 病毒空斑单位（plaque formation unit）nPFU= 空斑平均数病毒稀释度/病毒接种量 第四十三张，PPT共五十三页，创作于2022年6月2 、系列稀释终点 病毒的滴度：指能产生培养管中的50%CPE（细胞病理效应）的最高稀释度（即最少的病毒量），称为TCLD50（组织培养感染剂量）。 若是敏感动物，则用ID50（使50敏感动物发生变化的感染剂量）或LD50（引起50敏感动

18、物死亡的致死剂量）表示病毒的滴度。第四十四张，PPT共五十三页，创作于2022年6月 第五节 病毒对物理、化学因素的抵抗力及在污水处理过程中的去除效果 一、病毒对物理因素的抵抗力 对病毒影响最大的物理因素是温度、光和干燥1、 温度 在宿主细胞外的病毒大多数在55-65下几分钟到十几分钟被灭活。注：病毒受理化因素作用后失去感染性，称为灭活（inactivation）。灭活的病毒仍保持其抗原性和红细胞吸附、血凝以及细胞融合等活性。 第四十五张，PPT共五十三页，创作于2022年6月高温灭活的机制：（1）蛋白质变性。阻碍病毒吸附到宿主细胞上，削弱感染力；或病毒不能脱壳；或酶失活（2）包膜降解（3）高

19、于70可能破坏核酸。 低温不能灭活病毒，通常在-75（干冰）或-196（液氮）中保存病毒。第四十六张，PPT共五十三页，创作于2022年6月2、 光及其他辐射（1）紫外辐射： 灭活的部位是病毒的核酸。可使核酸中的嘧啶环受影响形成胸腺嘧啶二聚体；还可造成DNA链断裂、DNA分子内或分子间交联、DNA与蛋白质交联等。 紫外辐射的致死作用会随培养基的浊度和颜色的增加而降低。（2）可见光 在天然水体和氧化塘中，日光对肠道病毒有灭活作用。 光灭活作用：在氧气和染料存在的条件下，大多数肠道病毒可被可见光杀死。第四十七张，PPT共五十三页，创作于2022年6月（3）离子辐射：X射线、射线。机制：核酸断裂；破坏蛋白质；电离产生过氧化物。3、干燥 干燥是控制环境中病毒的重要因素。相对湿度越大，病毒的存活时间越长。 干燥易使病毒灭活，机制在于病毒成分的解离和核酸的降解。 第四十八张，PPT共五十三页，创作于2022年6月二、病毒对化学因素的抵抗力 病毒的灭活有体内灭活和体外灭活。 体内灭活：抗体和干扰素。 体外灭活：1、破坏病毒蛋白质的化学物质 蛋白质变性剂：酚、吐温（Tween-80）、SDS，破坏病毒的衣壳 低渗