病毒体的性质

1、2.3.2 病毒的蛋白质、病毒蛋白质的分类根据是否存在于病毒粒子中分为:结构蛋白(Structural protein )非结构蛋白(Nonstructural protein )幻灯片41结构蛋白(Structural protein ):构成一个完整的、形态成熟的病毒颗粒所必需的蛋白质。壳体蛋白包膜蛋白存在于病毒体中的酶4E结构蛋白(non-structural protein )：由病毒基因组编码，但并不结合于病毒颗粒中的蛋白质。在病毒的复制和增殖过程中发挥定的作用。主要是酶类。幻灯片42、病毒蛋白质的功能构成病毒衣壳和囊膜的重要成分保护病毒核酸参与病毒的吸附与侵入过程，决定病毒对宿主和

2、组织的嗜性构成病毒的表面抗原，能刺激机体对相应病毒产生免疫应答反应构成病毒的血凝素，使病毒具备血凝特性构成病毒的酶类，如逆转录病毒的逆转录酶，-RNA病毒和呼肠孤病毒的 RNA聚合酶,正粘病毒和副粘病毒的神经氨酸酶等。幻灯片43三、参与病毒复制过程的酶的来源1、宿主细胞的酶或经病毒诱导修饰了的宿主细胞酶2、病毒的一些非结构蛋白（如脊髓灰质炎病毒的依赖于RNA的RNA聚酶）3、存在于病毒体中的酶：参与病毒的侵入、释放过程：溶菌酶、神经氨酸酶参与病毒的大分子合成的酶：逆转录酶、依赖DNA勺RNA聚酶、修饰酶幻灯片442.3.3 病毒的其它组成一、病毒的脂类的特性来自于宿主细胞，具有宿主细胞的特性主

3、要存在于包膜中，是构成病毒包膜脂质双层不可缺少的部分与病毒的吸附、侵入和释放过程有关 幻灯片45二、病毒的碳水化合物的特性（戊糖以外的糖类）来自宿主细胞主要存在于包膜中：糖蛋白、糖脂噬菌体DNA削密咤上附着有葡萄糖残基正粘病毒和副粘病毒的刺突也是由糖蛋白所构成糖蛋白能刺激机体产生 Ab幻灯片462. 4理化因子对病毒的作用保护作用：有益于病毒的生存诱变作用：造成病毒某些生物学特性的改变灭活作用：使病毒活性丧失2.4.1物理因子2.4.2化学因子2.4.3病毒的保存幻灯片474. 1物理因子一、温度（“喜冷怕热”）1、病毒的感染半衰期：60 C -sec , 37 C -min , 20 c -

4、h ,4 C -d , -70 C -mon , -196 C -year2、不同病毒对热的敏感性不同肠道病毒，湿热 75 C 30min轮状病毒，湿热 100 c 5min乙型肝炎病毒，60 C 10h , 85 c 60min ,煮沸1min能破坏其传染性，但不能完全破坏 其抗原性，高压121c 1min才能将其抗原性彻底破坏。幻灯片483、作用机制：使病毒蛋白质，特别是病毒的表面蛋白质变性。核酸对热的抵抗力较强。4、影响因素：蛋白质、钙、镁一一降低病毒对热的敏感性蛋白酶、核酸酶一一增强病毒对热的敏感性5、温度的剧烈变化，尤其是反复冻融常可使许多病毒很快灭活。疱疹病毒在4c的存活时间比在-

5、20 C长幻灯片49二、电离辐射电离辐射中的 X射线和丫射线作用于其它物质后产生次级电子，次级电子再通过直接和间 接作用，作用于病毒核酸（DNA RNA而使病毒失活。单链病毒对电离辐射的灭活作用比双链病毒敏感约10倍。幻灯片50（主要作用于核酸）三、紫外线波长：328210nm,最大杀病毒作用是 265ns机制：使喀咤碱基之间形成二聚体DNA : TT、CK CC RNA : UU核酸链断裂分子内或分子间交联核酸和蛋白质之间的交联核酸不能复制和转录，从而导致病毒的灭活，但病毒蛋白质的免疫原性仍保持。反转录病毒和埃博拉病毒很难被紫外线杀灭幻灯片51四、超声波（20kHz的声波）主要以强烈振荡作用

6、对病毒、其它微生物以及细胞呈现杀灭或破坏作用。 病毒学中的应用：破碎细胞，释放病毒粒子幻灯片522. 4.2化学因子化学灭活剂化学保护剂幻灯片53一、化学灭活剂酶类蛋白变性剂氧化剂酸、碱其它化学试剂：福尔马林和亚硝酸等幻灯片541、酶类核酸酶 破坏核酸磷脂酶破坏囊膜磷脂蛋白酶：胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等幻灯片552、pH大多数病毒pH 6-8 稳定pH9.0迅速灭活FMDV 在 pH6.0-6.5 和 pH8.0-9.0 均迅速灭活鼻病毒：pH5.3 迅速灭活呼肠孤病毒：pH5.3稳定肠道病毒：pH2.2 在24h内保持感染性披膜病毒：pH8.0以上 稳定幻灯片563、脂溶

7、剂乙醛、氯仿、丙酮：灭活有囊膜病毒氟里昂、正丁烷：抽提脂质和蛋白质，常用于病毒成份的提取幻灯片574、甲醛和戊二醛机制：1、与腺喋吟、鸟喋吟、胞喀咤的胺基结合2、与蛋白质的胺基结合3、对病毒的核酸和蛋白质都有破坏作用，但首先是作用于病毒的核酸应用：用于灭活病毒生产疫苗浓度：0.05-0.2% （福尔马林）戊二醛对病毒的作用与甲醛相似，但灭活作用更强，常用于实验室污染器材消毒。幻灯片585、烷化剂机制：烷化剂上的活性烷基使蛋白质分子上游离的-COOH -NH2、-SH、-OH和核酸分子中的N发生烷基化作用，使病毒的蛋白质和核酸结构改变，功能丧失，从而被灭活。种类：环氧乙烷、环氧丙烷、澳化甲烷、3

8、一丙内酯、乙酰乙烯亚胺等病毒学中的应用：气体消毒剂灭活病毒，制备疫苗幻灯片596、蛋白质变性剂石炭酸阴离子去污剂：SDS去氧胆酸钠非离子去污剂：吐温 -20、吐温-80、NP-40尿素、月瓜幻灯片60石炭酸：剥离病毒粒子的蛋白质衣壳SDS剥离病毒粒子的蛋白质衣壳使蛋白质降解为多肽溶解病毒囊膜吐温和去氧胆酸钠：破坏病毒的囊膜，但可保存病毒粒子原来的蛋白结构和抗原性。NP-40:裂解病毒蛋白质月尿素、月瓜：破坏氢键和氨基酸残基的非极性侧链之间的疏水键，使蛋白质变性幻灯片617、保护剂能够减轻病毒保存过程中其他理化学因子对病毒的损伤，从而保持病毒的感染性、 抗原性等生物活性的物质。甘油：在50%勺甘

9、油盐水，病毒可存活达几十天、几个月至几年（牛瘟病毒例外）。二甲基亚碉（DMSO）:减少冷冻过程中微小冰晶的形成幻灯片62病毒冻干用保护剂明胶、血清、月东、白蛋白、谷氨酸、脱脂奶、乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇等不同保护剂的作用机制不同低分子物质（5%-10%的糖类、5%谷氨酸钠）：使干燥样品中的最终水分含量不致过低, 可防止蛋白质的变性。高分子物质（血清、明胶、白蛋白）：促进病毒制品在冻干过程中的升华干燥，当冻干的病毒加水复原时，可提高溶解性。幻灯片632.4.3病毒的保存、病毒的短期保存直接置-30 C冰箱中保存悬浮于50%T油盐水中，再置-30 C冰箱中保存幻灯片64二、病毒的长期保存1、快速

10、低温冻存于病毒悬液内加入灭活的动物血清或其他蛋白质保护剂和5%-10%勺DMSQ迅速置-70 C或-196 C保存。含病毒的组织材料可以直接低温冰冻保存；或先浸入50%T油生理盐水中，再低温保存。幻灯片652、冷冻干燥加入保护剂，在真空条件下使冰冻的病毒悬液脱水。操作步骤：1、用保护剂（脱脂牛奶、明胶、灭活的正常动物血清、饱和蔗糖溶液等）将病毒液作1-5倍的稀释。2、分装安甑或青霉素瓶，每支 0.5-2mL。3、放入事先预冷的-30 C- -40 C酒精中冻结1-2h ,或于-70 C冰箱中冻结4h以上。4、置于冻干机内，冷冻干燥。5、抽真空并封瓶，置-20 C以下低温保存。Smd幻灯片66思