血清丙氨酸氨基转移酶IFCC方法测定

1、精选文档精选文档PAGEPAGE8精选文档PAGE血清丙氨酸氨基转移酶IFCC介绍方法测定实验原理国际临床化学学会(IFCC)介绍的紫外连续监测法。ALTL-丙氨酸+-酮戊二酸丙酮酸+L-LDH（乳酸脱氢酶）谷氨酸丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD+H2O加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是为了稳固ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)1标本：2.1病人准备：12小时禁食。2.2种类：血清，肝素或EDTA血浆。标本寄存：3天内的活性损失：28保留：10%；1525保留：17%；标本稳固性：-20保留起码可稳定4周。标本运输：常温

2、条件下保留运输。标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。实验资料6.1试剂奥林巴斯ALT测定试剂盒试剂1+试剂2试剂准备：试剂为即用式。试剂稳固性与储存：试剂保留于28，若无污染，可稳固至无效期。试剂不行冰冻。变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或许未开盖的液体有积淀时，表示试剂已变质，不可以继续使用。注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不行进口！防止接触皮肤及粘膜。应采纳必需的预防措施使用试剂。6.2校准品：使用奥林巴斯企业供给的校准品对自动分析仪进行校准，详细拜见生化查验校准品和质控品.SOP文件。6.3质控品：详细拜见生化查验校准品和质控品.SOP文件。仪器：奥

3、林巴斯AU2700生化剖析仪操作步骤8.1项目基本参数：拜见生化查验奥林巴斯AU2700生化剖析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：拜见生化查验奥林巴斯AU2700生化剖析仪操作规程.SOP文件查验结果的判断与剖析质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行剖析，以2S为质控警示限，3S为失控限，绘制质控图，判断能否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。计算方法：以TruCalU复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告靠谱的检测结果，以U/L报告。12.参照值范围4不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛女性31U/L103

4、5U/L男性41U/L1050U/L参照值因性别、年纪、饮食和地区的不一样而有所差别。依据好的实验室经验，每个实验室应成立自己的参考值。临床意义1,2：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反响。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时明显高升。而AST水平的高升和心肌或骨骼肌伤害，以及肝组织伤害等都相关。所以同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴识肝伤害和心肌或骨骼肌伤害。AST/ALT比率用于肝病的鉴识诊疗。比率1和严重肝病相关，常见慢性肝病。操作性能1

5、4.1线性范围4800U/L14.2精细度：精细度的评估是依据NCCLS介绍的标准方法，AU2700批内精细度小于3%，总精细度小于3%。用于剖析的质控血清和数据办理切合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛批内xsCV天间xsCV精细度(U/L)(U/L)(%)精细度(U/L)(U/L)(%)n=20n=20样品122.80.703.08样品122.21.386.22样品242.60.681.60样品2样品399.30.920.92样品31011.021.00含磷酸吡哆醛批内x精细度(U/L)s(U/L)CV(%)批间精细度x(U/L)s(U/L)CV(%)n=20n

6、=20样品133.30.992.96样品1样品272.11.361.88样品272.02.042.83样品31331.761.32样品31282.772.1614.3方法学比较：不含磷酸吡哆醛本企业不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对78个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果以下：y=1.00 x+0.00U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本企业含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对80个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果以下：y=1.00 x+0.00U/L；r=0.994。14.

7、4敏捷度：本试剂的检测限为4U/L。14.5病人结果可报告范围4U/L-800U/L高出范围结果办理本法对ALT活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超出上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，从头测定，结果乘以10。16.病危报警值的办理17.方法限制性17.1本法对ALT活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超出上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，从头测定，结果乘以10。17.2扰乱物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红

8、蛋白浓度4.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有察看到扰乱。挽救举措：当仪器发生故障时，快速联系仪器厂家进行维修。参照文件1.ThomasL.Alanineaminotransferase(ALT),Aspartateaminotransferase(AST).In:ThomasL,editor.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.MossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology.In:BurtisCA,Ashwood

9、ER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.617-721.3.BergmeyerHU,HorderM,RejR.InternationalFederationofClinicalChemistry(IFCC)ScientificCommittee,Analyticalsection:approvedrecommendation(1985)onIFCCmethodsforthemeasurementofcatalyticconcentrationofenzymes.Part3.IFCCmethodforalanineaminotransferase(L-alanine:2-oxoglutarateaminotransferase,EC).JClinChemClinBiochem1986;24:481-95.4.LorentzK,RohleG,SiekmannL.EinfuhrungderneuenStand