姜黄素自微乳化给药系统的体内外评价

1、姜黄素自微乳化给药系统的体内外评价【摘要】目的将姜黄素ur制成自微乳化给药系统，并对其进展体内外评价。方法测定乳化后乳剂的pH值、自乳化时间、粒径、形态特征、稳定性和体外释放度，考察ur自微乳化给药系统在小鼠体内的药物动力学过程，并与其混悬剂相比拟。结果ur自微乳化给药系统可在4in内乳化完全，乳化后的微乳pH值接近中性，平均粒径为31.98n。以0.25%SDS的纯洁水为释放介质，10in内药物可释放完全。8h内微乳溶液中ur的含量保持94%。小鼠灌胃给药后的药动学过程说明，与ur混悬液相比，微乳的AU进步了12倍。结论自微乳化给药系统可显著进步ur的体外溶出度和体内生物利用度。【关键词】姜

2、黄素；药物释放系统；溶解度；生物利用度1材料与方法1.1材料1.1.1动物小鼠，雄性，体质量202g,福建医科大学实验动物中心提供合格证号：SXK(闽)202220002。1.1.2主要试剂与仪器1.2方法1.2.1urSEDDS的处方优化选择肉豆蔻酸异丙酯为油相，聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40为外表活性剂，乙醇为助外表活性剂作为urSEDDS处方中的辅料。将选择的油相、外表活性剂、助外表活性剂配制成一系列不同比例的自乳化浓缩液，称取约1g，参加药物，滴加至100L37的蒸馏水中，100r/in温和搅拌，使自乳化浓缩液在外界动力下形成乳液，当体系恰好澄清时，记录各组分的量，绘制三元相图，并测定各处

3、方所形成微乳的粒径。1.2.2pH值在室温条件下，将urSEDDS按110进展稀释，形成微乳，测定其pH。1.2.3自乳化效率考察将urSEDDS1g分别参加100L(371)的纯洁水、0.1l/LHl缓冲液和pH6.8PBS缓冲液中，100r/in恒温水浴中搅拌。分别在0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5,4,5,6,7,8,10in取样，放置室温。取3L乳化的液体在550n处测其各时间点的At值，以10in测得的吸收值A0作为100%。计算各时间点A值的相对百分数(At/A0)，以各时间点的(At/A0)对时间t作图。散色光强度到达最大值A的90%所对应的t作为体系的相对自乳化时间。

4、1.2.4乳滴粒径的测定采用激光粒径电位测量仪测量乳化后形成乳液的粒径分布。1.2.5形态观察取自乳化浓缩液，蒸馏水稀释500倍，制备微乳液。将微乳滴于铜网上，用2%磷钨酸负染1in，透射电镜下观察乳滴的形态。1.2.6体外释放度研究1.2.7稳定性试验1.2.7.1低温试验和常温试验将urSEDDS浓缩液一批置于4冰箱中放置7d、室温下放置1月，观察外观并测定含量。1.2.7.2自微乳化后的溶液稳定性取urSEDDS200L,分别参加100L水、0.1l/LHl、pH6.8PBS中，振摇使其自乳化完全后，分别在室温25，37条件下，于0,1,2,3,4,6,8h观察微乳溶液状态并于溶液上层取

5、微乳溶液，用0.45微孔滤膜过滤，应用HPL法测定并记录样面积(Ai)，计算不同时间ur峰面积相对于0h(A0)的百分数(D)，以反映样品中药物含量变化情况。同时取微乳溶液测定其中纳米乳滴的粒径，以评价其物理稳定性。1.2.8体内药动学研究1.2.8.1色谱条件1.2.8.2血浆样品的处理方法精细量取小鼠血浆180L，参加20Lur对照品溶液，涡旋振荡混匀，参加500L乙酸乙脂，涡旋混合3in，10000r/in离心5in，汲取上清液，在余液中再次参加500L乙酸乙脂，涡旋振荡3in，10000r/in离心5in，取上清夜，合并两次上清液，室温条件下通氮气吹干，剩余物加100L流动相复溶，涡旋

6、振荡2in，10000r/in离心5in后取上清液进样测定。1.2.8.3方法专属性考察将小鼠空白血浆样品、空白血浆中参加标准品以及血浆样品的色谱图相对照，考察方法专属性。1.2.8.4标准曲线的制备精细量取小鼠空白血浆180L，参加ur对照品溶液20L，涡旋混合，得到浓度为21，42，84，168，252，336，420ng/L的血浆样品。按血浆样品处理项下方法操作，进样25L，记录色谱图及峰面积，以ur峰面积A为纵坐标，待测物浓度()为横坐标，绘制标准曲线。1.2.8.5精细度和回收率试验取空白血浆180L，分别参加不同浓度ur标准品溶液20L，涡旋混合，制成31.5，168，378ng/

7、L的样品，每个浓度制5份。按血浆样品处理项下方法操作，于1d测定5次，求算日内精细度；于5d中分别取高、中、低3个不同浓度样品同法操作，计算日间精细度。方法回收率实验：将浓度为31.5，168，378ng/L的血浆样品，按血浆处理项下方法操作，记录峰面积A。将A代入标准曲线方程计算测得量，以测得浓度与实际浓度之比计算方法回收率(%)。提取回收率试验：将浓度为31.5，168，378ng/L的血浆样品，按血浆处理项下方法操作，记录峰面积A1。另用流动相配制一样浓度的标准品溶液直接进样，记录峰面积A2，A1与A2之比即为提取回收率。转贴于论文联盟.ll.1.2.8.6血药浓度测定和药动学参数计算将

8、血样按上述血浆样品处理项方法处理后，进样25L测定血浆中ur的含量。根据测得的血药浓度数据，绘制微乳组与对照组的平均血药浓度-时间曲线。将得到的血药浓度结果用DAS软件拟合分析，计算药动学参数。以以下公式计算ur微乳溶液和混悬液小鼠灌胃给药后的相对生物利用度：F(%)=AU(0-)ireulsin/AU(0-)Suspensin100%2结果2.1urSEDDS的处方优化根据假三元相图图1和相图中各处方的粒径分布，urSEDDS优化处方为肉豆蔻酸异丙酯乙醇聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40=202060，每lg中含有药物50g。采用溶解法制备ur自乳化给药系统。按IP乙醇聚氧乙烯氢化蓖麻油RH4022

9、6称取辅料，混合均匀。按辅料量的5%参加ur，涡旋混合至药物全部溶解即得。2.2pH值微乳体系pH值为6.27，说明ur微乳体系的酸碱度接近中性。2.3自乳化效率考察urSEDDS在水、0.1l/LHl缓冲液和pH6.8PBS缓冲液中的相对自乳化时间分别约为3，4，1in。将三者的自乳化时间进展比拟，由此可得出三者之间自乳化效率的上下关系，即pH6.8PBS缓冲液纯洁水0.1l/LHl缓冲液(图2)。2.4乳滴粒径的测定urSEDDS乳化后乳滴的平均粒径为31.9815.9nGaussian分布、27.543.5n(Nip分布)；Nip分布为单峰(图3)。2.5形态观察电镜照片显示，自乳化形成

10、的乳滴形态呈圆球型，大小均匀，互相之间无粘连，粒径大小在50100n图4。2.6体外释放度研究urSEDDS的释药速度很快，10in即将药物全部释放完全，而ur本身不能完全释放出药物，60i时药物仅释放出40%左右(图5)。2.7稳定性试验2.7.1低温试验和常温试验将urSEDDS浓缩液放置于4冰箱放置7d、室温条件中1月，观察其外观仍为深红色澄清、均一溶液，无药物晶粒析出，也无分层现象。测定浓缩液放置前后的药物含量，未有明显的降低。2.8体内药动学研究2.8.1方法学考察色谱行为说明，ur的保存时间约为9.5in，内源性物质及代谢产物不干扰药物的测定(图6)。ur的血浆样品标准曲线方程为：A=296.54+1853.1，r0.9940说明在21420ng/L浓度范围为其线性关系良好。低、中、高3个浓度样品的日内精细度RSD分别为4.25%，3.77%和3.19%，日间精细度RSD分别为7.88%，4.07%和7.24%，方法回收率分别为98.29%、93.01%和96.30%，提取回收率率分别为86.34%、89.49%和80.85%。2.8.2血药浓度测定和药动学参数计算ur微乳和混悬液单次灌胃给药后的平均血浆药物浓度-时间曲线如图7所示。一样剂量下的ur微乳溶液和混悬液小鼠灌胃给药的药动学过程符合单室模型(权重系数1)，其药动学参数见表2。微