羟自由基降解海带硫酸多糖的可行性研究

1、羟自由基落解海带硫酸多糖的可行性研究岳真，李守玲，李玺，曲爱琴【摘要】低分子量海带硫酸多糖已被证实有多种生物学成效，但提获得到的海带硫酸多糖分子量很大，必要进一步落解。如今常用的一些落解要领都有必然缺点，急需探求新的落解要领。羟自由基作为一种高活性物质，对生物大分子有强的粉碎作用。按照这种性子，推断羟自由基可以成为落解多糖的有力东西。文章总结了国际海内使用自由基落解多糖的盼望，研究了自由基落解多糖的机制，并对自由基落解海带硫酸多糖远景举行了预测。【关键词】羟自由基落解海带硫酸多糖海带硫酸多糖Lainariaplysaharidesulfate，是存在于褐藻植物体细胞间的多糖物质，重要身分是-L

2、-岩藻糖4-硫酸酯的多聚物，同时还含有差异比例的半乳糖、甘露糖、木糖和葡萄糖醛酸，已被证实具有调治免疫活性、抗肿瘤、抗辐射、落血压、落血糖、抗血栓、抗氧化等多种生物学成效，是埋伏的海洋药物泉源，但是海带硫酸多糖的药用之路还存在许多题目。从海带中提取的海带硫酸多糖其分子量多数在几十万乃至上百万，分子量较大，免疫原性强，给理化性子阐发及生物学成效研究带来了困难，并且海带硫酸多糖具有很强的庞大性及不均一性，这决定了分子量差异的海带硫酸多糖的生理活性是差异的。多项研究表白小分子海藻硫酸多糖的生理活性比大分子硫酸多糖越创造显。1低分子量海带硫酸多糖的生物学作用研究表白，多糖分子量的漫衍与其生物活性的凹凸

3、有直接接洽。海带硫酸多糖的抗凝血活性与分子量严密相干。研究表白低分子量多糖300040000Da具有类肝素成效，能作用于血纤维卵白溶酶原，表现出明显的抗凝血活性1。Deux等2研究表白分子量8000Da的褐藻硫酸多糖，显着按捺血管内膜平滑肌增生，可防范心瓣手术后的血管再局促病症。分子量35008000Da的硫酸多糖能按捺补体过分活化，防范外源移植历程的超敏排挤3。李兆杰等4从海带中提取的低分子量海带硫酸多糖能扫除活性氧自由基，明显低落高脂血症大鼠血清和构造中脂质过氧化物LipidPerxideLP的含量，具有体表里抗氧化的本领。付雪艳等5研究表白低聚海带硫酸多糖大概按捺血管告急素的天生，对肾血

4、管性高血压大鼠有明显的落压作用。同时，研究表白多糖的抗肿瘤作用也必要必然聚合度和必然分子量的多糖。高向东等6提取的均匀相对分子量15000Da的多糖，对S180肉瘤、Heps实体瘤、E实体瘤等多种小鼠移植性肿瘤均有较好的按捺作用。由于低分子量多糖普及的生物学成效，接纳得当的要领把其分子量低落，是当前海藻多糖研究的一大课题。落解不但有利于举行布局阐发，减小免疫原性，还能进步其生物学成效。2海带硫酸多糖的落解要领研究对付海带硫酸多糖来讲，如今已有多种落解要领，如酸解法、碱解法、盐解法、酶解法超声波落解及-射线落解，但这些要领都有必然的缺点。酸水解中糖苷键的断裂根本上是随机的，落解产物分子量漫衍较大

5、，给分散纯化带来必然的困难；碱水解可引起多糖残基上某些-S4基团因亲核打击造成的脱落和多糖链布局的变革，而硫酸基是多糖发挥生理活性所必需的基团，硫酸基的脱落导致生理活性的丧失。酶法对多糖的落解多数是随机的，所得落解产物分子量范畴较大，并且糖苷酶分散纯化比力困难，代价昂贵，不得当大范围产业消费；氧化落解法、超声波法及-射线法等要领，对一样平常的实行室，受到必然的限定。比来的一系列研究表白，酶法、氧化落解法、超声波法及-射线法等落解历程中，自由基都发挥着紧张的作用。方靖7指出纤维二糖脱氢酶落解木质纤维素历程中产生羟自由基。羟自由基完全有大概打击粉碎其相近的木质纤维素大分子，加快底物的落解。付海英8

6、在海藻酸电钠离辐射落解研究中指出脉冲辐射使水合电子被转化成羟自由基，羟自由基打击海藻酸钠多糖分子，产生落解。由此可见，自由基大概成为多糖落解的可行要领。3羟自由基落解多糖的开端研究3.1自由基概述自由基是游离存在的、带有不成对电子的分子、原子或离子,其化学性子很生动。在体内固然不竭地产生，但也不竭地被消除，正常状态下处于动态平衡。具有不配对电子的氧自由基，重要包罗超氧阴离子自由基-2、羟自由基H、过氧化氢H22等。此中H自由基带有一个不成对电子，性子极为生动，其反响活性和毒性都很强。大量研究表白，自由基对脂膜、卵白质、核酸等生物大分子具用粉碎作用。因此关于自由基的研究绝大多数会合在怎样扫除自由

7、基、按捺自由基迫害上，对自由基的现实应用研究较少。3.2羟自由基落解多糖的研究盼望iller创造9，H22可以落解植物多糖，而羟自由基比H22更有用，它能很轻易的使多糖包罗透明质酸，脱乙酰壳聚糖，支链淀粉、木聚糖和肝素落解。解聚之后的身分假设进一步接纳凝胶过滤，离子互换色谱或凌驾滤分级法可制得分子量较均一的组分。按照对木聚糖落解的布局阐发，其侧链上的半乳糖、木糖易被H自由基打击，从而造成骨架的断裂。王蔚等10在研究褐腐真菌落解纤维素时创造，褐腐菌固然大量落解木料，却不具有外切葡聚糖酶。研究表白，多株褐腐菌均有羟自由基天生，羟自由基氧化断裂纤维素链内或链间的氢键，继而断裂糖苷键，使纤维素表暴露更

8、多的复原性和非复原性末了，为纤维素酶的进一步落解提供有利条件。利多卡因葡聚糖能被u2+，H22，V混淆物所落解。在有H22，V的存鄙人,u()敏捷被复原为u()，并与H22起反响，经旋转诱捕实行证实有H产生。产生的H打击利多卡因葡聚糖，产生中央自由基，进而导致一系列的分子重排。这些分子重排引起了葡聚糖的氧化落解11。过二硫酸盐与大气打仗产生的羟自由基导致斯佩尔特小麦木聚糖分子量显着低落。阐发效果表白自由基打击在糖苷毗连上。启动反响后，落解受控于解聚反响，是解聚反响和再聚合反响竞争的效果12。ShEikert13研究表白植物胞壁过氧化物酶产生的羟自由基，打击并粉碎细胞壁多糖，是植物扩大生长历程中

9、细胞壁疏松的缘故原由。3.3自由基落解多糖的机制研究自由基落解多糖的机制，与其粉碎脂质和DNA相雷同，见图1。开始羟自由基快速打击糖链a，夺取与相连的H原子，天生羟烷基自由基，这些产物自由基可以互相反响，也可与2反响天生相应的过氧化自由基b，过氧化自由基极不不变，导致碳链断裂，多糖落解。过氧化自由基还大概撤除H2或2，形成相对不变的含氧基，在有复原剂条件下重新合成糖链d13。4羟自由基落解海带硫酸多糖的开端试验及预测由上可以看出，如今的多糖落解要领都有必然的缺陷。要想进一步发挥多糖的生理作用必必要求有越发成熟落解机制。羟自由基作为多种生物大分子的“粉碎者，已经成为新型的多糖落解东西。对付拥有浩

10、繁生理活性的海带硫酸多糖来讲，其侧链和木聚糖一样，也是通过半乳糖这个焦点与多糖主链相毗连的，因此可以思量使用自由基的要领落解海带硫酸多糖。我们举行的开端实行表白，羟自由基能明显低落海带硫酸多糖的分子量，得到分子量较会合的落解产物。我们盼望这种新型落解要领的研究有利于更好地综合使用我国富厚的海洋资源，进步我国海洋产物的技能含量，为新药和保健食品的开爆发出孝敬。【参考文献】1Linelhevlt.AdisahariderepeatunitistheajrstrutureinfuidansfrtspeiesfbrnalgaeJ.arbhydrateResearh,2001,330:529.2Deux

11、.LleulareightFuidanPreventsNeintialHyperplasiainRabbitIliaArteryIn-StentRestensisdelJ.ArterislerThrbVasBil,2002:1604.3Tisst.InteratinffuidaniththeprteinsfthepleentJ.BihiiaetBiphysiaAta,2022,1651:5.4李兆杰，薛长湖，陈磊，等.低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯的扫除活性氧自由基和体内抗氧化作用J.水产学报,2001,25(1):64.5付雪艳，薛长湖，宁岩，等.岩藻聚糖硫酸酯低聚糖落压作用的开端研究J.中国海

12、洋大学学报(天然科学版),2022,34(4):560.6高向东,吴梧桐.螺旋藻多糖抗肿瘤作用的研究J.中国药科大学学报,2000,31(6):458.7方靖，曲音波，高培基，等.纤维二糖脱氢酶天生羟自由基和复原种种自由基的研究J.中国生物化学与分子生物学报,1999,15(3):448.8付海英，姚思德，吴国忠，等.海藻酸钠的电离辐射落解研究J.辐射研究与辐射工艺学报,2022,2(3):169.9JanieG，iller.harateristisfxylgluanafterattakbyhydrxylradialsJ.arbhydrateResearh,2001,332：389.10王蔚,高培基.褐腐真菌木质纤维素落解机制的研究盼望J.微生物学转达,2002,29(3):90.11GivanniTab.ESRstudyfthenn-enzyisissinfxylgluanbyanasrbate-H22-ppersyste:theinvlveentfthehydrxylradialandthedegradatinfasrbateJ.JurnalfInrganiBiheistry,2001,84:179.12AndreiSarbu.Radial