XXXXCB910700-G-肿瘤发生发展中关键蛋白的功能与调控

1、项目名称称：肿瘤发生生发展中中关键蛋蛋白的功功能与调调控首席科学学家：肖智雄 四川大大学起止年限限：20122.1至至20116.88依托部门门：教育部 四川川省科技技厅一、关键键科学问问题及研研究内容容本项目拟拟解决的的关键科科学问题题是：原原癌蛋白白和抑癌癌蛋白通通路相互互作用和和信号网网络互动动调控肿肿瘤发生生发展的的分子机机制。恶恶性肿瘤瘤作为细细胞生长长的疾病病，与细细胞生长长、凋亡亡、细胞胞周期、肿瘤细细胞迁移移和侵袭袭等最基基本的生生命过程程紧密相相关。因因此，以以原癌-抑癌蛋蛋白信号号网络互互动为主主要切入入点，发发现及鉴鉴定重要要蛋白的的关键新新靶点及及信号通通路新调调控机制

2、制，深入入探讨原原癌-抑抑癌蛋白白信号网网络信号号通路的的动态变变化，阐阐明其在在肿瘤发发生发展展过程中中的关键键作用，是本课课题拟解解决的关关键科学学问题。本项目将将以原癌癌蛋白（EGFFR，RRas/Rhoo家族，PI33K）、抑癌蛋蛋白(pp53家家族、BBRCAA1、PPTENN)以及及PI33K/AAkt、MAPPK、GGSK33b等关关键信号号通路为为出发点点，研究究这些原原癌蛋白白-抑癌癌蛋白的的关键上上游新调调控因子子、下游游关键新新靶点及及其信号号网络互互动在肿肿瘤细胞胞生长、凋亡、细胞周周期、细细胞迁移移、侵袭袭过程以以及免疫疫球蛋白白受体从从免疫防防御向EEMT恶恶性转化

3、化转变中中的功能能和分子子调控机机制。本本项目的的实施不不仅能够够完善基基本生命命科学理理论与细细胞癌变变理论体体系，而而且为肿肿瘤诊断断治疗提提供理论论指导意意义和潜潜在的药药物新靶靶点，并并对小分分子干扰扰和药物物筛选提提供新的的思路和和方法。围绕上述述科学问问题，我我们将利利用细胞胞生物学学、分子子生物学学、生物物物理学学、遗传传学、系系统生物物学及蛋蛋白组学学等交叉叉科学技技术方法法，发挥挥多学科科团队作作战的优优势，结结合动物物肿瘤模模型以及及临床标标本，阐阐明原癌癌-抑癌癌蛋白网网络互动动及其调调控在肿肿瘤细胞胞生长、细胞周周期、EEMT、细胞迁迁移及侵侵袭过程程中的作作用。主主要

4、研究究内容包包括：1解析析原癌蛋蛋白Raas/RRho家家族上游游调控新新蛋白和和下游作作用新靶靶点在肿肿瘤细胞胞迁移的的分子作作用机制制1）深入入阐明GGankkyriin等关关键调控控蛋白以以及Hiippoo/MSST1-YAPP2信号号转导通通路在肿肿瘤迁移移过程中中的作用用。2）鉴定定恶性肿肿瘤迁移移过程中中关键调调节重要要信号通通路中的的蛋白质质复合体体。发现现新的信信号通路路调控分分子并揭揭示其作作用机制制。3）解析析Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22蛋白质质结构及及其相关关调控蛋蛋白的溶溶液结构构，研究究蛋白的的相互作作用机制制，揭示示其功能能的结构构基

5、础。4）研究究PIKK3CAA对p663的功功能调控控，解析析PIKK3CAA突变体体蛋白调调控p663蛋白白表达的的分子机机制，阐阐明PII3K通通路与pp63调调控细胞胞迁移和和侵袭的的功能相相关性。5）应用用常见肿肿瘤标本本，对GGankkyriin、HHipppo/MMST11-YAAP2、TApp63和和Npp63基基因等的的表达进进行定性性、定量量和定位位分析，揭示其其在肿瘤瘤中表达达的动态态时空关关系。2阐明明抑癌蛋蛋白p553家族族的下游游关键新新靶点以以及上游游调控新新蛋白对对肿瘤发发生发展展的分子子调控机机制研究p553下游游新靶点点Killlinn对S期期监控点点的调控控

6、，阐明明Killlinn抑制DDNA合合成、激激活CHHK1/2的分分子途径径及凋亡亡机理，确定KKilllin/N8-50多多肽与DDNA结结合前后后的结构构。解析p553选择择性调控控的分子子机制，从KRRAB锌锌指蛋白白家族中中筛选pp53调调控分子子，确定定其调控控的细胞胞学效应应。解析SIIRT11-p553复合合体的晶晶体结构构。阐明p663-CCD822通路调调控细胞胞迁移和和侵袭的的机理，研究pp63调调控MAAPK的的机制，阐明pp63-MAPPK通路路与细胞胞迁移和和侵袭的的相关性性。3揭示示细胞周周期中关关键蛋白白调控有有丝分裂裂和染色色体稳定定性及在在肿瘤发发生发展展中

7、的功功能和调调控1）建立立微管动动态不稳稳定性的的检测分分析体系系，阐明明微管相相关蛋白白(e.g. PRCC1)对对微管动动态不稳稳定性的的直接调调控机制制。2）揭示示微管相相关蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修饰对对有丝分分裂的调调控机制制。3）应用用动物模模型并结结合人类类肿瘤标标本检测测，明确确微管相相关蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修饰与与恶性肿肿瘤发生生发展及及转移的的关系。4）解析析微管相相关蛋白白(PRRC1，Nlpp及其截截短体)的三维维结构。4探究究p533、RTTK及免免疫球蛋蛋白受体体三者之之间动态态调控机机制在ppIgRR诱导EEMT恶恶性转

8、化化中的影影响选择有深深厚研究究背景的的、与EEMT恶恶性转化化密切相相关的ppIgRR为主攻攻研究对对象，以以免疫球球蛋白转转运调控控与恶性性转化调调控系统统为核心心研究内内容，构构建工程程细胞株株、工程程动物模模型等研研究系统统，探究究pIggR EEMT恶恶性转化化的分子子机制，重点从从免疫防防御向免免疫背叛叛转变的的分子开开关以及及受体酪酪氨酸激激酶家族族和p553对其其调控机机制两个个研究视视角出发发，研究究pIggR功能能逆转的的动态调调控机制制，阐明明p533、RTTK及免免疫球蛋蛋白受体体三者之之间动态态调控机机制，剖剖析EMMT恶性性转化调调控网络络的关键键节点分分子；在在此

9、基础础上，引引入“基因敲敲除”与“化学干干预”平行研研究策略略，利用用国家化化合物库库，筛选选发现小小分子调调控探针针，从外外源性干干预角度度入手，佐证内内源性调调控的本本质。四个子课课题研究究内容相相互关联联，从点点到面，将深入入探讨原原癌-抑抑癌蛋白白信号网网络互动动在肿瘤瘤发生发发展过程程中的重重要作用用和分子子机制。二、预期期目标本课题总总体目标标是以恶恶性肿瘤瘤细胞为为研究对对象，深深入探讨讨原癌蛋蛋白-抑抑癌蛋白白通路相相互作用用和信号号网络互互动在细细胞生长长、凋亡亡、细胞胞周期和和肿瘤细细胞迁移移等最基基本生命命过程中中的功能能和调控控，发现现和鉴定定肿瘤发发生发展展中新的的关

10、键调调控蛋白白。我们们的研究究将进一一步完善善现有生生命科学学基础理理论以及及细胞癌癌变理论论体系，同时以以这些信信号通路路网络和和重要蛋蛋白质的的分子作作用机制制为突破破点，为为癌症治治疗提供供新策略略和新靶靶点。力力求在肿肿瘤发生生发展领领域中取取得原创创性、前前瞻性、突破性性研究进进展，提提升我国国癌症研研究水平平，保持持国际先先进行列列。本项目的的五年预预期目标标：1建立立一系列列适合于于肿瘤生生长凋亡亡、迁移移和侵袭袭研究的的抑癌蛋蛋白相互互作用研研究体系系，筛选选、发现现和鉴定定一批选选择性pp53家家族上游游调控蛋蛋白、全全新性下下游作用用靶点及及其相互互作用，阐明pp53-p6

11、33信号网网络在肿肿瘤细胞胞迁移和和侵袭中中的作用用机制。2建立立一系列列适合肿肿瘤迁移移和侵袭袭研究的的原癌蛋蛋白通路路的研究究体系，揭示恶恶性肿瘤瘤迁移过过程中GGTPaase Rass/Rhho家族族蛋白的的关键重重要信号号通路及及网络互互动的功功能特点点。3研究究细胞周周期调控控关键蛋蛋白对有有丝分裂裂调控的的分子作作用机制制，揭示示该类蛋蛋白及其其网络互互动在恶恶性肿瘤瘤发生发发展过程程中的关关键作用用。4明确确免疫球球蛋白受受体pIIgR在在EMTT恶性转转化中的的重要作作用，揭揭示免疫疫球蛋白白受体ppIgRR诱导EEMT恶恶性转化化的分子子机制。5人才才培养及及基地建建设： 人

12、才培养养：为我我国培养养一批研研究肿瘤瘤发生发发展机制制的创新新性人才才，打造造一支颇颇具国际际竞争力力的优秀秀创新群群体，重重点培养养2-33名国际际知名领领衔学科科带头人人、2-3名国国家杰出出青年获获得者、2-33名中国国科学院院百人计计划入选选者和一一批博士士后、博博士生、硕士生生。希望通过过本项目目的实施施，取得得具有国国际影响响力并原原创性科科研成果果。在国国际重要要学术刊刊物上发发表高水水平论文文50篇篇以上，其中在在影响因因子大于于10的的刊物上上发表110-115篇，申请专专利100-155项。基地建设设：综合合应用基基因差异异筛选技技术、蛋蛋白质组组学技术术、细胞胞内蛋白白

13、质三维维结构成成像技术术、活细细胞与活活体成像像技术、肿瘤细细胞迁移移研究技技术、体体外微管管动态不不稳定性性分析技技术、遗遗传操作作与模式式动物技技术、XX射线单单晶衍射射分析结结合二维维和多维维核磁共共振（NNMR）技术，建立体体内外多多参数同同步化、时空定定量可视视化的原原癌蛋白白与抑癌癌蛋白结结构与功功能研究究体系，打造国国际同行行瞩目的的代表中中国原创创水平的的从事原原癌蛋白白与抑癌癌蛋白之之间网络络互动与与肿瘤发发生发展展机制研研究的平平台基地地。课题设置置：1课题题设置的的总体思思路课题的设设置主要要考虑当当前癌症症研究领领域的研研究重点点和发展展趋势，并结合合我国常常见恶性性肿

14、瘤诊诊治水平平提高的的重大需需求。以以研究原原癌蛋白白-抑癌癌蛋白网网络通路路及其调调控在细细胞生长长增殖、细胞周周期调控控、肿瘤瘤细胞迁迁移和炎炎癌转化化等方面面的分子子机制为为出发点点，深入入探讨原原癌蛋白白-抑癌癌蛋白信信号网络络互动，以原癌癌蛋白RRas/Rhoo家族、PI33K/AAkt、GSKK3b等等以及抑抑癌蛋白白p533家族、BRCCA1、PTEEN及其其网络互互动为切切入点，研究新新的上下下游调控控蛋白的的生物学学功能及及其在肿肿瘤发生生发展中中的作用用。并以以这些关关键蛋白白为靶点点，筛选选可调控控其功能能的小分分子化合合物，为为临床肿肿瘤诊疗疗奠定分分子生物物学基础础。

15、2各课课题研究究内容及及其与项项目预期期目标的的关系本项目的的设置以以上述思思路为基基础，分分为四个个课题：（1）研究原原癌蛋白白 Raas/RRho家家族新的的上游调调控蛋白白和下游游作用靶靶点在EEMT、肿瘤转转移的分分子作用用机制；（2）研究抑抑癌蛋白白p533家族下下游关键键新靶点点、上游游调控新新蛋白、以及相相关信号号通路对对细胞生生长、凋凋亡、细细胞周期期、细胞胞迁移和和侵袭的的功能和和调控；（3）研究细细胞周期期中关键键新蛋白白调控有有丝分裂裂、染色色体组稳稳定性以以及在肿肿瘤发生生发展中中的作用用；（44）研究究免疫蛋蛋白和小小分子化化合物在在EMTT和肿瘤瘤转移的的调控与与干

16、预的的分子机机制。本项目以以正常细细胞癌变变过程中中最基本本的生物物学过程程，包括括细胞周周期、细细胞增殖殖与凋亡亡、EMMT和细细胞迁移移和侵袭袭为中心心，以调调控这些些基本生生物学过过程的关关键蛋白白和信号号通路为为主线。前两个个课题分分别从原原癌蛋白白Rass/Rhho家族族和抑癌癌蛋白pp53家家族的功功能、信信号通路路和调控控机制进进行并行行和相互互交叉的的研究；课题三三着重研研究生命命现象中中最基本本的细胞胞周期中中调控有有丝分裂裂的关键键蛋白，及其与与前两个个课题所所涉及的的原癌蛋蛋白抑抑癌蛋白白信号网网络中关关键蛋白白的互动动；课题题四研究究免疫球球蛋白受受体以及及受体酪酪氨酸

17、激激酶家族族对EMMT和肿肿瘤转移移的调控控网络。同时研研究小分分子化合合物对这这些过程程的干扰扰，为肿肿瘤诊断断治疗提提供新方方法和新新靶点。本项目的的主要目目标是深深入研究究原癌-抑癌蛋蛋白的相相互作用用。课题题一和课课题二以以原癌蛋蛋白PIIK3CCA、AApakk、Gaankyyrinn、调控控抑制癌癌蛋白pp53、p633为主线线。同时时研究pp53、p633对PII3K和和MAPPK等关关键生长长信号通通路的反反馈调控控。课题题三以细细胞有丝丝分裂调调控关键键蛋白PPRC11、Nllp为切切入点，研究微微管相关关蛋白网网络对细细胞有丝丝分裂过过程中纺纺锤体形形成以及及中心体体、染色

18、色体分离离的调控控，同时时研究pp53对对这些蛋蛋白分子子及其网网络互动动的上游游调控。课题四四以免疫疫球蛋白白受体EEMT恶恶性转化化的分子子机制研研究为切切入点，研究免免疫球蛋蛋白受体体功能逆逆转的动动态调控控机制以以及p553、RRTK及及免疫球球蛋白受受体三者者之间动动态调控控机制，剖析EEMT恶恶性转化化中新的的关键节节点蛋白白的结构构组成，阐明其其动态变变化的网网络调控控机制。 四个子子课题研研究平台台相互交交叉、研研究内容容相互关关联，从从点到面面，课题题一和课课题二中中已建立立的蛋白白组学、蛋白质质结构解解析平台台、和课课题四已已建立的的小分子子化合物物筛选平平台为整整个项目目

19、研究关关键蛋白白的功能能、调控控及分子子机制提提供技术术平台和和支持。其相互互关系如如下图所所示：三、研究究方案课题一：研究原原癌蛋白白Rass/Rhho家族族上游调调控蛋白白和下游游作用靶靶点在肿肿瘤细胞胞迁移的的分子作作用机制制基于原癌癌蛋白RRas等等诱导肿肿瘤的小小鼠模型型，利用用ORIIS系统统， 应应用高通通量基因因沉默技技术和高高内涵技技术等手手段鉴定定恶性肿肿瘤迁移移过程中中关键蛋蛋白质，并探讨讨这些蛋蛋白质在在肿瘤发发生发展展过程中中的功能能与调控控；深入入研究GGankkyriin等癌癌基因以以及Hiippoo/MSST1-YAPP2信号号转导通通路在肿肿瘤迁移移中的作作用

20、；人人肿瘤中中Gannkyrrin等等关键调调控蛋白白的表达达水平与与肿瘤细细胞的转转移程度度的相关关性分析析；利用用NMRR解析GGankkyriin等关关键蛋白白质及其其复合体体的结构构，我们们将利用用已建立立的稳定定表达各各种PIIK3CCA突变变体的细细胞株分分析PII3K信信号通路路调控Np663蛋白白表达的的分子机机制。利利用特异异性磷酸酸化抗体体重点探探索Akkt蛋白白激酶激激活状态态对Np663蛋白白表达调调控的影影响。验验证p663是否否是介导导PI33K信号号通路调调控肿瘤瘤转移的的关键因因素。研研究并评评估p663信号号通路在在肿瘤细细胞迁移移和侵袭袭中的临临床相关关性。

21、承担单位位：四川川大学，军事医医学科学学院， 中科院院生物物物理所课题负责责人： 肖智雄雄教授主要学术术骨干：李慧艳艳副研究究员，袁袁增强研研究员经费比例例：277%课题二：研究抑抑癌蛋白白p533家族及及新的上上游调控控蛋白和和下游作作用靶点点对肿瘤瘤发生发发展的分分子调控控机制研究p553下游游新靶点点蛋白KKilllin对对细胞周周期S期期监控点点的功能能和调控控。明确确Killlinn在S期期染色质质上的定定位、及及其与DDNA复复制蛋白白RPAA和PCCNA之之间相互互关系，阐明KKilllin抑抑制DNNA合成成的分子子机理。揭示KKilllin在在DNAA损伤应应答过程程中的功功

22、能，阐阐明Kiilliin 激激活DNNA监测测点蛋白白CHKK1和CCHK22的分子子途径及及细胞凋凋亡机理理，为肿肿瘤化疗疗放疗提提供进一一步的理理论基础础。通过过NMRR溶液结结构分析析，确定定Killlinn/N88-500多肽与与DNAA结合前前后的结结构及抑抑制DNNA合成成的分子子机理。解析对对p533蛋白功功能选择择性调控控的分子子机制。以我们们新发现现的选择择性调控控p533下游细细胞凋亡亡活性的的KRAAB型锌锌指蛋白白Apaak为切切入点，从KRRAB锌锌指蛋白白家族4400多多个成员员中筛选选鉴定新新的p553选择择性调控控分子，确定它它们所调调控的细细胞学效效应及与与

23、肿瘤发发生发展展的关系系，探索索Apaak对pp53靶靶基因转转录调控控区的表表观遗传传学调节节机制。 解析析SIRRT1-p533蛋白复复合体的的晶体结结构。以以我们发发现的pp63下下游新靶靶点CDD82/KAII1为切切入点，阐明pp63-CD882通路路调控细细胞迁移移和侵袭袭的分子子机理。同时研研究p663调控控MAPPK的分分子机制制，阐明明p633-MAAPK信信号通路路与细胞胞迁移和和侵袭的的功能相相关性。承担单位位： 四四川大学学， 军军事医学学科学院院， 中中科院生生物物理理所课题负责责人： 梁朋教教授主要学术术骨干： 李沁沁桐副教教授，李李力副研研究员，杨娜副副研究员员经

24、费比例例：266.5%课题三：研究有有丝分裂裂关键调调控蛋白白在肿瘤瘤发生发发展中的的作用及及分子机机制研究有丝丝分裂调调控关键键蛋白PPRC11和Nllp的分分子作用用机制及及其网络络互动对对细胞周周期及有有丝分裂裂的调控控，并揭揭示这些些蛋白及及其作用用网络对对恶性肿肿瘤发生生发展及及转移的的作用机机制，最最终明确确以这些些蛋白为为核心的的网络互互动、信信号传导导及蛋白白修饰在在恶性肿肿瘤发生生发展及及转移，甚至治治疗过程程中的重重要意义义。建立立微管动动态不稳稳定性的的检测分分析体系系，阐明明微管相相关蛋白白(e.g. PRCC1)对对微管动动态不稳稳定性的的直接调调控机制制。揭示示微管

25、相相关蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修饰对对有丝分分裂的调调控机制制。应用用动物模模型并结结合人类类肿瘤标标本检测测，明确确微管相相关蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修饰与与恶性肿肿瘤发生生发展及及转移的的关系。解析微微管相关关蛋白(PRCC1，NNlp及及其截短短体)的的三维结结构。承担单位位：中国国医学科科学院， 北京京大学课题负责责人： 姜伟教教授主要学术术骨干： 童彤彤研究员员, 夏斌教教授经费比例例：266.5%课题四：研究免免疫蛋白白和小分分子化合合物在肿肿瘤发生生发展中中的调控控与干预预的分子子机制选择有深深厚研究究背景的的、与EEMT恶恶性转化化密切相

26、相关的ppIgRR为主攻攻研究对对象，以以免疫球球蛋白转转运调控控与恶性性转化调调控系统统为核心心研究内内容，构构建工程程细胞株株、工程程动物模模型等研研究系统统，探究究pIggR在EEMT恶恶性转化化中的分分子机制制，重点点从免疫疫防御向向免疫背背叛转变变的分子子开关以以及受体体酪氨酸酸激酶家家族和pp53对对其调控控机制两两个研究究视角出出发，研研究pIIgR功功能逆转转的动态态调控机机制，阐阐明p553、RRTK及及免疫球球蛋白受受体三者者之间动动态调控控机制，剖析EEMT恶恶性转化化调控网网络的关关键节点点分子；在此基基础上，引入“基因敲敲除”与“化学干干预”平行研研究策略略，利用用国

27、家化化合物库库，筛选选发现小小分子调调控探针针，从外外源性干干预角度度入手，佐证内内源性调调控的本本质。承担单位位： 中中科院上上海药物物所课题负责责人： 耿美玉玉研究员员主要学术术骨干： 俞强强研究员员，黄敏敏副研究究员 经费比例例：200%四、年度度计划研究内容容预期目标标第一年1 建建立一系系列适合合于肿瘤瘤细胞迁迁移和侵侵袭研究究的研究究体系；利用OOriss系统和和高内涵涵技术鉴鉴定关键键蛋白质质;2，研究究Killlinn与RPPA和PPCNAA在细胞胞周期的的相对定定位；筛筛选Appak的的DNAA结合序序列，研研究Appak选选择性调调控p553介导导的细胞胞凋亡的的分子机机理

28、。3. 研研究PRRC1对对中心体体介导的的微管形形成和动动态不稳稳定性；研究确确定Nllp与BBRCAA1相结结合的功功能域，检测其其对细胞胞内中心心体分离离，纺锤锤体形成成和细胞胞有丝分分裂的影影响。4.检测测分析ppIgRR高表达达前后基基因和蛋蛋白表达达的差异异，初步步探讨前前述获得得的候选选目标分分子（群群）在ppIgRR诱导EMMT的具具体调控控机制；研究ppIgRR表达情情况与EEMT恶恶性转化化的临床床相关性性研究。1.建立立肿瘤细细胞转化化及迁移移和侵袭袭模型；筛选、发现一一批新的的Rass通路关关键介导导子及肿肿瘤转移移相关蛋蛋白质。2. 筛筛选、发发现和鉴鉴定一批批新的p

29、p53家家族下游游关键靶靶点及其其相互作作用蛋白白质。分分析Kiilliin作为为DNAA单链高高亲合蛋蛋白抑制制DNAA合成的的分子机机理以及及Apaak的DDNA结结合能力力在其选选择性调调控p553靶基基因中的的功能。3 分分析PRRC1对对体外微微管动态态不稳定定性的直直接调控控机制；初步明明确Nllp与BBRCAA1结合合的细胞胞生物学学意义。4. 初初步鉴定定pIggR介导导EMTT的调控控分子及及其在ppIgRR诱导EEMT的的可能调调控机制制；初步步分析明明确pIIgR与与EMTT恶性转转化在11-2种种肿瘤组组织的临临床相关关性。发表6-12篇篇研究论论文。第二年1.探讨讨G

30、annkyrrin，Hipppo/MSTT1-YYAP22等对RRas诱诱发的肿肿瘤迁移移能力的的影响以以及影响响细胞迁迁移和侵侵润的分分子机制制; 分分析PIIK3CCA突变变体蛋白白调控Np663蛋白白表达的的分子机机制。2. 检检测Kiilliin对 ATMM和ATTR蛋白白磷酸化化及稳定定性的影影响；筛筛选KZZNF家家族中新新的p553调控控分子，确认其其选择性性功能；筛选SSIRTT1及SSIRTT1与底底物p553肽段段结合复复合物的的结晶条条件；鉴鉴定与Np663调控控CD882/KKAI11和MKKP3表表达的分分子机制制。3. 研研究PRRC1对对纺锤体体形成的的影响；明确

31、PLLK1在在Nlpp蛋白分分子的磷磷酸化位位点及与与BRCCA1相相互作用用的关键键位点。明确BBRCAA1-NNlp-PLKK1之间间网络互互动对NNlp在在中心体体定位，有丝分分裂及蛋蛋白稳定定性的作作用。4.研究究候选目目标分子子（群）在pIIgR诱诱导EMMT的具具体调控控机制；进一步步研究ppIgRR表达与与EMTT恶性转转化的临临床相关关性；探探讨pIIgR转转运相关关分子对对其介导导的EMMT效应应的影响响。1.阐明明Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22等参与与肿瘤细细胞迁移移和侵袭袭的分子子机制； 验证证筛选到到的新的的Rass通路关关键介导导子对肿肿

32、瘤迁移移和侵袭袭的影响响。阐明明PI33K信号号通路调调控Np663蛋白白表达的的分子机机制；2. 阐阐明Kiilliin诱导导CHKK1和CCHK22磷酸化化及稳定定性增加加的分子子机制；获得一一批新的的p533上游调调控分子子；获得得SIRRT1与与p533相互作作用的结结构基础础；阐明明Np663调控控CD882/KKAI11和MKKP3表表达的分分子机制制。3. 阐阐明微管管相关蛋蛋白PRRC1对对体外纺纺锤体形形成的直直接调控控机制；阐明NNlp被被PLKK1磷酸酸化修饰饰的细胞胞生物学学意义，明确BBRCAA1-NNlp-PLKK1之间间的网络络互动的的细胞生生物学功功能。4. 阐

33、阐明候选选目标分分子（群群）在ppIgRR诱导EMMT的分分子调控控机制；明确ppIgRR与肿瘤瘤EMTT恶性转转化的相相关性；确定ppIgRR作为复复发转移移预测标标志物及及潜在药药靶的可可行性；初步阐阐明调控控pIggR转运运相关分分子对其其介导的的EMTT效应的的影响。发表6-12篇篇研究论论文；申申请1-2项中中国发明明专利。第三年1.分析析Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22蛋白质质结构，以与人人肿瘤转转移程度度的相关关性;研研究 PPIK33CA对对Np663的负负调控的的生物学学意义。2. 研研究Kiilliin，AATM/ATRR的磷酸酸与及DDNA合合

34、成复制制叉停顿顿的功能能相关性性；研究究KZNNF家族族成员与与p533的相互互作用及及肿瘤相相关性；研究SSIRTT1对pp53活活性调控控的蛋白白结构基基础；研研究Np663对MMAPKK信号通通路的负负调控的的分子机机制。3.分析析PRCC1对细细胞内微微管动态态不稳定定性及纺纺锤体形形成的影影响；研研究Nllp蛋白白关键磷磷酸化位位点及其其功能相相关性； 分析析BRCCA1的的磷酸化化对细胞胞转化能能力的影影响。4. 研研究与转转运相关关调控分分子对ppIgRR诱导EEMT的的影响机机制，探探讨其作作为转移移标志物物的可行行性；分分析受体体酪氨酸酸激酶与与pIggR在恶恶性转化化中的功

35、功能相关关性及其其在pIIgR介介导的EEMT发发生发展展中的作作用机制制；在此此基础上上，初步步研究pp53对对受体酪酪氨酸激激酶家族族分子（群）在在pIggR介导导的EMMT发生生发展中中的影响响机制；1.分析析Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22蛋白质质结构；明确GGankkyriin、HHipppo/MMST11-YAAP2与与人肿瘤瘤转移程程度的相相关性；阐明PPI3KK信号通通路对Np663调控控的生物物学意义义。2.阐明明Killlinn诱导细细胞凋亡亡的信息息通道；揭示对对p533具有选选择性调调控作用用的KZZNF在在肿瘤发发生发展展中的功功能；明明确

36、p553去乙乙酰化修修饰的结结构与其其功能的的相关性性；揭示示p633与MAAPK通通路及在在肿瘤转转移中的的的功能能关联。3. 阐阐明PRRC1对对细胞内内微管动动态不稳稳定性、纺锤体体形成以以及染色色体稳定定性的直直接调控控机制；阐明NNlp磷磷酸化修修饰在细细胞恶性性转化过过程中的的意义，明确pp53-BRCCA1-Nlpp-PLLK1信信号网络络互动在在致癌过过程中的的作用机机理。4. 阐阐明与转转运相关关调控核核心分子子对pIIgR诱诱导EMMT的影影响机制制，明确确其作为为转移标标志物的的可行性性；揭示示与pIIgR诱诱导EMMT相关关的受体体酪氨酸酸激酶及及其调控控机制，明确pp

37、53对对该过程程的影响响。发表7-12篇篇研究论论文；申申请1-2项中中国发明明专利。第四年1.研究究Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22在动物物模型中中对肿瘤瘤细胞迁迁移和侵侵润的影影响；研研究PII3K-p633信号通通路调控控肿瘤细细胞转移移的分子子机制。2. 建建立Kiilliin基因因敲除小小鼠；利利用小鼠鼠模型确确认KZZNF家家族成员员对p553调控控的重要要性；模模拟p553肽段段设计抑抑制SIIRT11去乙酰酰化酶活活性的小小分子抑抑制剂；研究Np663-MMAPKK信号通通路与肿肿瘤转移移的临床床相关性性。3. 研研究PRRC1在在裸鼠模模型中对对与

38、肿瘤瘤发生发发展及转转移的作作用；研研究PRRC1-Aurroraa B-Nlpp为核心心的中小小体蛋白白分子网网络，并并确定该该网络对对中小体体形成以以及对细细胞胞质质分裂的的作用。4. 完完善受体体酪氨酸酸激酶对对pIggR从免免疫防御御向免疫疫背叛转转变分子子调控机机制以及及p533对其的的影响机机制，探探讨候选选分子作作为转移移标志物物的可行行性；筛筛选靶向向免疫球球蛋白受受体EMMT调控控网络的的活性小小分子。1.明确确Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22在动物物模型中中对肿瘤瘤细胞迁迁移和侵侵袭的影影响；阐阐明PII3K信信号通路路对Np663蛋白白表达的的机制，解析PPIK