DB12-T375-2008奶牛乳房炎诊断技术规范

1、ICS 65.020.30B41备案号：DB12DB12/T 3752008奶牛乳房炎诊断技术规范2008-04-15 实施Technical Standard on Diagnosis of Mastitis of Dairy Cows2008-03-13 发布天津市质量技术监督局发布DB12/T 3752008附录C均为资料性附录。完提出。 M畜牧兽医研究所。本标准附录A、附录B、 本标准由天津市农业科 本标准起草单位：天津 本标准主要起草人：张国伟、鄢明华、王建国、刘兰兰。奶牛乳房炎诊断技术规范1范围本标准规乳房炎实验室本标准适丁奶牛乳调炎的诊断。卜列术语利定义适用丁本标准。定了奶牛乳房

2、炎诊断的术语和定义、临床型乳房炎诊断、隐性型乳房炎现场检测和隐性型 诊断技术。2术语和定义2. 1乳房炎riast i t i s乳腺组织受到物理、化 乳的性状品质发生异常为特2.22. 3亚临床型乳房炎subc 乂称隐性型乳房炎。乳 生改变。2.4体细胞 somatic ce I III胞利腺上皮细胞的合称。乳汁中白纟2. 5体细胞数每毫升乳汁中体细胞的个数，简称see。somat i c ceI count3临床型乳房炎诊断学、微生物刺激所发生的以乳腺组织发生病理变化，乳汁中的体细胞增多, 征的一种炎性变化。临床型乳丿寿炎 clincial mast its乳房、乳汁肉眼可见炎症病理变化，

3、或呈现全身性临床症状。I i nc i a I mast it i s房、乳汁均无肉眼可见异常变化，乳汁体细胞数增加，pH值等理化性质发3. 1根据炎症： 性F他性乳房世、乳房脓肿、3. 2主要临床恃征 临床型乳房炎的主要临床特征见表1。过程的性质将临床型乳房炎分为浆液性乳房炎、卡他性乳房炎、纤维蛋白性乳房炎、脓乳房蜂窝织炎、出血性乳房炎和坏疽性乳房炎。DB12 仃 37520082表1临床型乳房炎的主要临床特征类型孚u号外观及触诊变化乳汁变化体温及其他全身症状浆液性乳房炎红、肿、扌 必上淋巴，奴痛明显；较坚硬；乳 吾增大。泌乳量减少，乳汁稀薄，含絮 片。严車时体温升高，精神委 顿，食欲废绝。

4、卡他性乳房炎输乳管乳池卡4及 也充血、肿J状的结节；（；可感到波动或似面团最先挤出的乳汁稀薄含絮片， 后挤乳汁不含絮丿M体温升爲，心率加快，精 神沉郁，食欲减退。腺泡卡4ik红、肿、痛；有局灶性肿块。稀薄如水样，含絮片或凝块同上。纤维蛋口性乳房炎肿大，热、 呆部时， 役音；乳.剧痛，坚硕；丿玉迫乳池 了纤维蛋口凝块引起的捻 ；上淋巴结肿大。病初乳汁中含有絮状物，2d3d后，只挤出几滴乳清或带何 纤维蛋白残渣的黄口也浓汁。体温升高至40C41C； 心率加快，精神萎顿，食 欲减退或废绝。脓性卡 他性乳 房炎急性期红、肿显-d- 淋巴结肿）热、痛明k；乳房1:、O乳量剧减或全无，乳汁呈水样， 含絮丿

5、了，味咸、苫，混有脓汁。体温升爲令41C；精神委 顿，食欲减退或及绝。慢性期红、肿减早，热、痛不明显；乳叶 逐渐萎缩变硬。乳汁稀薄或黏液样，呈淡黄色 或黄色，甚金无乳。体温恢复正常；全身症状 消失。乳房脓肿红、肿、步 的脓肿块， 或向外破步 张度增加， 淋巴结肿决L痛明显；有大小不等 浅土时，可-感到波动，：；位于深部时，乳房紧 穿刺流出脓汁。乳房上O乳汁呈粘性脓样，會絮片。体温升爲；食欲差或废绝。乳房蜂窝织炎显著肿胀， 天后形成 巴结肿大。发热、坚硕而疼痛，数 波动的脓肿。乳房上淋乳量剧减，乳汁稀薄，含絮丿体温升尙；脉搏、呼吸加 快，食欲减退。岀们性乳房炎红、肿、熬 色或紫红H 大。、痛；皮

6、肽表面出现红*点；乳房上淋巴结肿.-乳汁稀薄，呈淡红或粉红色， 混有血液及凝乳或凝血絮状 物。体温升高；脉搏、呼吸加 快，食欲丿发纟也，反停止。坏疳性乳房炎皮状最初IL 有痛感；几 黑红色，曳 形成坏疽忡 整个患叶M叫紫红也斑点，发热， J、时后肿大，发青，呈 ;k,发硕，痛感消失；J贵疡，有臭味；严車时 *脱落乳中带血，或挤出少量黑褐色 有气泡的稀薄液体，或仅能挤 岀大量腐败臭味的气体；后期 从乳头内自动流出黄色透明的 液体。体温突然升也达41C 41.5C；呼1吸急促，脉搏 数增加，町视粘膜发纟LL 食欲不振或废绝，反停 止，腹泻。4隐性型乳房夠现场检测4. 1试剂和器材4.1.1兰州乳房

7、4.1.2专用检验4.2操作4. 2. 1清洁乳头个杯中，将检验舟倾斜60。，使多余的乳汁流出杯外，留在杯内的乳汁约2mL。 4.2.2用定堇加；断液充分混匀，经10s30s观4. 3结果判定隐性型乳房炎炎试验（LMT,诊断液，1： 3稀释备用；或犬津乳房炎试验（TMT）诊断液。 盘，2mL5mL,定堇加液器。弃去前2把3把乳汁，直接自奶牛4个乳室分别挤取适堇乳汁亍专用检验盘的四夜器向每杯待检乳样中各加2mL诊断液，随即平置检验盘并做旋转摇动，使乳汁与诊 察反应结果。现场检测判定标准见表2。DB12/T 3752008 表2隐性型乳房炎现场检测判定标准反应描述结果判定记录符号混合物呈液状，倾斜

8、检验盘时，液体移动流畅，杯底无沉淀物。阴性(-)混合物呈液状，倾斜检验盘时，杯底可出现微量沉淀物，摇动则消失。可疑()杯底出现少量稀代粘性沉淀，但 检验盘时，有一饵的粘附性。不成胶状，倾斜检验盘时，沉淀物散布于杯底，旋转摇动弱阳性(+ )杯底沉淀物量较好，也较粘稠，#有少量胶状物，倾斜检验盘时，沉淀物有明显粘附于杯 底而难以流动的*象。旋转摇动佥验盘时，沉淀物有聚中心倾向。阳性(+)杯内混合物的大申分或全部参与 附于杯底，旋转#动检验盘时，M成明显胶状凝集物，倾斜检验盘时，凝集物几乎完全粘 *集物聚中心呈团块，难以散开。强阳性( + + + )5隐性型乳房炎实验室诊断5. 15.25. 35.

9、4房炎实验室宁断方法有乳汁体细胞计数法、苛性钠凝乳试验法、过氧化氢酶法。 抱计数法：见隐性型乳乳汁体细苛性钠凝试验法：见 过氧化氢论法：见附录附录Ao 附录B。 Co附录A（资料性附录）我汁体细胞计数法（Little和Plastr idge法）A. 1试剂和器时A. 1. 1美兰染单液：美兰乙摩饱和溶液30mL （美兰2g, 95%乙醇lOOmL）, 10%氢氧化钠溶液0. ImL,蒸馅 水lOOmL,将上母溶液混合摇。，过滤后备用。A. 1.2二甲苯、95%乙醇。A. 1.3显微镜、|载玻片、0. QlmL微量加样器。A. 2操作:清洁乳头,孑去前2把3把乳汁，用清洁容器采集3mL5mL乳汁

10、。:充分摇匀新曷乳样，用0. OlmL微量加样器吸取中部乳汁0. OlrnL,将乳样滴丁载玻片上,A.2.1乳样采集A. 2. 2涂片制备仔细涂布成1cm2积的乳膜；由然干燥后，用二甲苯脱脂5min,再置95%乙醇中固定5 min-lOmin；用inn,美兰染色液染色5hin,水洗；再用95%乙醇脱色数分钟，水洗干燥后镜检。A.2.3镜检计数 在普通显微莒油镜下观察（最好用10X目镜，其视野直径耍求为0.016cm）,计数100 个视野内的体细数量。IA.3结果计算按式（A. 1） *算体细胞数体细胞队壁翌衅Lx平均每个视野的体细胞数 （A.1）r视评岬A. 4判定标准体细胞数超过4乂个判定、

11、隐性型乳房炎。B. 1试剂和器时附录B（资料性附录）苛性扇凝乳试验法（Whiteside法，又称改良华氏试验）B. 1.1 4%氢鼻化钠溶液。B. 1.2黑色玻也板、细玻棒成牙签或火柴棒、滴管。B.2操作 3把乳汁，用清洁容器采集3mL5 mL乳汁。 个大十字，以固定四个被检乳室的位置。（每份乳样用一支滴管）分别取四个乳室的乳汁各5滴于玻璃板上，然后B.2. 1清洁乳*,弃去前2扌B. 2. 2在洁净皿玻璃板上划B. 2.3摇匀新，乳样后以滴各加4%氢氧化钠*液2滴，随即迅速用细玻棒或牙签或火柴棒呈同心圆状均匀搅拌，并扩散成2. 0cm2. 5cm的圆形，20s南观察结果。B.3结果判定B.

12、3. 1B. 3.2B. 3. 3B. 3.4B. 3.5肉眼可见变化，判定为阴性（+ ）。 敬转透明，出现细小的颗粒状凝集物，判定为可疑（）。混合物无混合物略：混合物略却明，出现较氏凝块，判定为弱阳性（+）。混合物呈，样透明，出现大凝块，搅动时，形成丝状凝集物，判定为阳性（+）。 混合物完冬透明，出现乳冃色的大凝块，有时全部凝成一大块，判定为强阳性（+）。DB12/T 3752008附录C（资料性附录）过氧化氢酶法（双氧水玻片法）C. 1试剂和器材配成6%9%也0?试剂。现配现用。 滴管等。C. 1. 1取双氧冰（30%赋2）,白色衬垫物、C. 1.2载玻片、0.2操作C. 2. 1清洁乳头 C. 2.2将洁净载