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文档简介
1、关于抗体免疫学第一张,PPT共二十六页,创作于2022年6月抗血清(antiserum)机体经特定抗原免疫后含特定抗体的血清。第二张,PPT共二十六页,创作于2022年6月治疗:用抗血清治疗被剧毒蛇咬伤的人员;抗白喉抗血清治疗白喉病。预防:研究人员、消防人员及战斗人员预先注射抗破伤风抗体。 抗血清制备的目的1、被动免疫预防和治疗第三张,PPT共二十六页,创作于2022年6月2、免疫学诊断及鉴定试剂 如抗甲型肝炎病毒表面抗原Ab、抗艾滋病毒抗血清等。 E.coli、Bt、根瘤菌等的标准抗血清,血型鉴定用的抗血清。abcABC第四张,PPT共二十六页,创作于2022年6月Ag2341-含多个抗原表
2、位的抗原免疫动物,可刺激体内多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的抗体的混合物多克隆抗体(Polyclonal antibody, pAb)B1B4B3B2B1B1B1B1B2B2B2B2B3B3B3B3B4B4B4B4第五张,PPT共二十六页,创作于2022年6月羊常用于较大批量地生产抗体(商品)马:常用于大批量生产治疗用抗体(商品)1、常用的免疫动物兔子(rabbit):最常用于自制抗体,抗体量较多。(新西兰,大耳白)一、多克隆抗体第六张,PPT共二十六页,创作于2022年6月小鼠(mouse):可用于自制抗体,但抗体量很少。(Balb/c,昆明鼠)大鼠(rat):可用于自制抗体,免疫过程要
3、麻醉动物。(Wistar大鼠)豚鼠(guinea pig):国外实验室常用第七张,PPT共二十六页,创作于2022年6月2、抗原剂量选择兔子(rabbit):200g1 000g/次小鼠(mouse):50g400g/次大鼠(rat):100g1 000g/次第八张,PPT共二十六页,创作于2022年6月3、佐剂的应用非特异性免疫增强剂,当与抗原一起注射或预先注入机体时,可增强机体对抗原的免疫原性或改变免疫应答类型佐剂(adjuvant)无机佐剂:氢氧化铝、明矾等有机佐剂:卡介苗等Freund佐剂:弗氏不完全佐剂和弗氏完全佐剂可溶性抗原?第九张,PPT共二十六页,创作于2022年6月4、免疫的
4、基本步骤(1)、注射途径和位点口服肌肉皮内皮下静脉腹腔耳后足掌背部淋巴结周围第十张,PPT共二十六页,创作于2022年6月(2)、基础免疫(3)、加强免疫首次第2次以后大量抗原完全弗式佐剂+抗原量1/52/5多次,间隔2-4周不完全弗式佐剂+第十一张,PPT共二十六页,创作于2022年6月加强免疫两次或三次以后的第7天取血(4)、抗血清效价测定第十二张,PPT共二十六页,创作于2022年6月(5)、制备抗血清最后一次免疫后7-10天放血放血放置,凝固,吸取血清离心纯化分装冻存第十三张,PPT共二十六页,创作于2022年6月多克隆抗体制备第十四张,PPT共二十六页,创作于2022年6月特异性不强
5、5、制备多克隆抗体的主要局限 交叉反应纯化相对困难无法连续生产抗原A抗原B第十五张,PPT共二十六页,创作于2022年6月“多克隆抗体制备”小结多克隆抗体(Polyclonal antibody, pAb):含多个抗原表位的抗原免疫动物,可刺激体内多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的抗体的混合物基本步骤:1、常用的免疫动物:马、羊;兔,豚鼠;大鼠,小鼠。2、抗原剂量选择:50g1 000g/次。3、佐剂的应用(可溶性抗原):Freund佐剂。4、免疫的基本步骤:(1)、注射途径和位点;(2)、基础免疫:首次,大量抗原+完全弗氏佐剂;(3)、加强免疫:第二次以后,间隔多次,少量抗原+不完全弗氏佐
6、剂;(4)、抗血清效价测定:加强免疫两次或三次以后的第7天取血,测定效价;(5)、制备抗血清:最后一次免疫后7-10天放血,静置,吸取血清,离心,纯化,分装,备用。制备多克隆抗体的主要局限:特异性不强;纯化相对困难;无法连续生产第十六张,PPT共二十六页,创作于2022年6月Ag2341B1B4B3B2B1B1B1B1B2B2B2B2B3B3B3B3B4B4B4B4单克隆抗体:单个B细胞克隆针对一个抗原决定簇所产生的一种均一的抗体。第十七张,PPT共二十六页,创作于2022年6月骨髓瘤细胞:不能合成或分泌Ig,具有在体外长期连续继代的特性。 细胞融合(cell fusion),是在自发或人工诱
7、导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。第十八张,PPT共二十六页,创作于2022年6月二、单克隆抗体(monoclonal Ab, mAb)1975年,由Kohler和Milstein建立1984年,获诺贝尔奖Georges J.F. Khler Csar Milstein 淋巴细胞杂交瘤技术第十九张,PPT共二十六页,创作于2022年6月免疫的淋巴细胞: 具有合成分泌抗体的功能 但不能在体外连续继代生长。骨髓瘤细胞:不能合成或分泌Ig。 具有在体外长期连续继代的特性。 单克隆抗体技术的原理杂交瘤细胞:合成抗体、能在体外长期连续传代第二十张,PPT共二十六页,创作于2022
8、年6月单抗与多抗的区别第二十一张,PPT共二十六页,创作于2022年6月免疫治疗与药物结合的免疫-化学疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位。单抗的应用:“导弹”疗法因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。单抗导航系统药物弹头第二十二张,PPT共二十六页,创作于2022年6月鼠源抗体对人而言,具有免疫原性。可能产生抗鼠抗体的抗体。第二十三张,PPT共二十六页,创作于2022年6月三、基因工程抗体 按不同的需要,将抗体的基因进行加工、改造和重新装配,然后再导入到适当的受体细胞内进行表达的抗体分子,这也就是第三代抗体。保持单抗高特异性的优点克服单抗为鼠源性的弊端第二十四张,PPT共二十六页,创作于2022年6月1血清中含量最高的Ig是 ,含量最低的Ig是 。 2在五类Ig中,分子量最大的是 ;参与粘膜免疫
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