几种水溶性维生素对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用

1、几种水溶性维生素对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用【摘要】目的探究研究几种水溶性维生素VitB1、VitB6、VitB12andVit对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用。方法采用改进的TT法，来检测小鼠腹腔巨噬细胞活性。结果VitB150l(0.0025g),VitB6200l(0.002g),VitB12200l(0.002g),Vit200l(0.08g)均对小鼠腹腔巨噬细胞有活性增强作用。结论几种水溶性维生素VitB1、VitB6、VitB12andVit对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用。【关键词】水溶性维生素；TT法；小鼠巨噬细胞Tstudytheativatinfinvitriearphages

2、ithvariusaterslublevitains【Abstrat】bjetiveTprpsestudyingtheeffetfvariusaterslublevitains(VitB1,VitB6,VitB12andVit)finvitriearphagesativatin.ethdsTheartiletkthedifiedethdfTTtexplsetheativatinfinvitrriearphages.ResultsVitB150l(0.0025g),VitB6200l(0.002g),VitB12200l(0.002g),Vit200l(0.08g)allstiulatedthe

3、effetfinvitriearphages.nlusinVariusaterslublevitains(VitB1,VitB6,VitB12andVit)hihereabletstiulatetheativatinfinvitriearphagesunderertainnentratin.【Keyrds】aterslublevitain;TTethd;iearphage维生素是维持人体正常生理功能及细胞内各种能量代谢生化反响所必需的一类低分子量有机化合物。尽管机体对这类物质需求量相对很少，但是它们却非常重要，是人体必不可少的微量物质，假如缺乏，可引起各种各样的疾玻因此某些种类维生素对人体的免

4、疫系统的免疫功能也起着重要作用，影响免疫系统的各种细胞功能。最近许多年，国内外营养免疫学者都在研究讨论各种维生素对免疫系统的作用，企图探明各种维生素对免疫细胞活化的增强或抑制，为进步机体免疫力，本文选用和人类基因组具有相当局部同源性小鼠，选用体外实验检测维生素B1、B6、B12和维生素对小鼠腹腔巨噬细胞活性作用的研究。sn(1983)1报道噻唑蓝TT比色法，经后人改进，使这种方法更加完善成熟，成为定量、重复性好、简便易行检测免疫细胞活性的好方法。我们采用此法，检测小鼠腹腔巨噬细胞的活性，现将结果报告如下。1材料与方法11实验动物和主要试剂及实验仪器IR小鼠体重202g，雄性，由首都医科大学实验

5、动物部提供。RPI1640培养液为Hylne公司产品。噻唑蓝TT为Siga公司产品，10%十二烷基磺酸钠SDS为BRL公司产品，淋巴细胞别离液为TBD生物技术开展中心产品，液体石蜡油为北京旭东化工厂产品，VitB15g/l、VitB65g/l、VitB120.5g/l均为天津金耀氨基酸产品，Vit400g/l为北京双鹤药业产品，酶标仪为SLT公司产品型号为A-5082。1.2方法1对小鼠腹腔注射VitB1、VitB6、VitB12和Vit，无菌液体石蜡油，取IR小鼠40只分成4组，每组10只，分别为1组、2组、3组和4组。1组为VitB1实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水0.2l

6、/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB10.05l/只作为实验组。2组为VitB6实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水0.2l/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB60.2l/只作为实验组。3组为VitB12实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水0.2l/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB120.2l/只作为实验组。4组为Vit实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水0.2l/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射Vit0.2l/只作为实验组。以上4组小白鼠经腹腔注射生理盐水和维生素，均于48h后再经腹腔注射无菌液体石蜡油0.1l/只。48h后行颈

7、椎脱臼处死。2巨噬细胞的制备：将处死的小白鼠行腹部皮肤消毒后，持镊提起腹中部皮肤并剪开，暴露腹膜，避开血管剪开腹膜一小口。用毛细吸管取出腹腔液，并搜集于试管中。作好标记后离心，弃上清，洗3次，立即进展台盼蓝染色，计算活细胞数。细胞数108/l。3噻唑蓝比色法，将制备的小鼠巨噬细胞按组分管，每组实验管孔3管孔对照管孔3管孔。37温育2h后，每管加10%SDS溶于双蒸水，轻轻震荡，待甲簪颗粒完全释放后，再用酶标仪测D570值。2结果2.1VitB1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用VitB1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，VitB150l0.0025g对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P0.01，见图1。

8、图1VitB1对小鼠巨噬细胞活性的作用略2.2VitB6对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用VitB6对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用,VitB6200l(0.002g对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P0.01，见图2。图2VitB6对小鼠巨噬细胞活性的作用略2.3VitB12对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用VitB12对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，200l(0.002g)对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P0.001，见图3。图3VitB12对小鼠巨噬细胞活性的作用略2.4Vit对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用Vit对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，200l(0.08g)对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P0.0

9、1，见图4。3讨论sn1983年1报道噻唑蓝TT比色法测定细胞活性。TT可被各种类型的活性细胞RB除外摄取，活性强的细胞摄取较多的TT，在线粒体内被脱氢酶复原为甲簪颗粒Frazan,颜色由黄变深紫，参加SDS使细胞完全裂解释放出甲簪，在波长570n下酶标仪测量D值，图4Vit对小鼠巨噬细胞活性的作用略D值越高，其甲簪浓度越高，反响活的细胞活性越强2，3。因此，TT法可定量检测各种细胞的活性。我们曾经报道几种水溶性维生素对小鼠淋巴细胞活性的作用4。本报道VitB1、VitB6、VitB12和Vit对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，它们在一定浓度下对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，VitB12尤为显著

10、。VitB1、VitB6、VitB12均涉及体内细胞正常生理生化功能，因此，它们当然参与小鼠腹腔巨噬细胞的生化反响，完成正常生理功能。Vit经临床实验证实5，它具有抗氧化作用，增强巨噬细胞的吞噬杀菌功能，并有增强淋巴细胞功能曾已报道的Vit还参与免疫球蛋白的二硫键的形成，从而促进免疫球蛋白的合成。有增加补体1和干扰素的产生，以及增强NK细胞的活性，因此增强人体抗肿瘤的作用6，7。营养免疫是当今热门的研究课题之一。人体许多种疾病都涉及免疫系统，免疫系统有防御、监视、耐受和调节功能。各种营养素，是人体依存最为重要的环境因素，也是维持人体正常免疫功能和安康的物质基矗各种维生素虽然人体每日需要量很少，

11、它们常以辅酶或辅基的形式参与酶的功能，尤其是B族的维生素，因此它们在调节人体物质代谢过程中起着关键的作用。研究各种维生素对人体免疫系统的作用是营养免疫的重要任务。【参考文献】1sann,T.Repidlrietriassayfrellulargrthandsurviralappliatintprliferatinandyttxiityassays.JIunleth，1983,65：55-63.2陈哲生.噻唑蓝比色法检测细胞的活性.上海医学检验杂志，1994，94：205-206.3陈哲生.噻唑蓝比色法用来研究人类淋巴细胞和小鼠巨噬细胞细胞的活性.上海免疫学杂志,1992,12(5)：269-317.4孙明洁.几种水溶性维生素对小鼠淋巴细胞活性的作用.中华中西医杂志,2022，216：28