医学免疫学课件：自身免疫病治疗新策略 凋亡-抗原诱导治疗

1、自身免疫病治疗新策略：凋亡-抗原诱导治疗（apoptosis-antigentherapy）1.自身免疫病三类免疫反应和自身免疫病第三类免疫反应和自身免疫病最近几年，越来越多的证据表明，第三类免疫反应在一些自身免疫病的发展和持续中起了很大的作用，比如类风湿性关节炎(RA)，多发性硬化(MS)，1型糖尿病(T1D)，葡萄膜炎，银屑病。而且表明，这些之前认为是Th1细胞主要作祟的病，可能第1类免疫反而是起的保护机制。之后又发现，Th1/17细胞介导的免疫反应，既有重叠的部分，也有功能不同的部分。在一/三类免疫之间，既有拮抗，又有重叠，如果缺乏第一类免疫反应的细胞因子，那么就会促进第三类免疫反应，让

2、后者占据主导位置，反之亦然，所以他们之间也存在一种平衡。在小鼠模型中，第三类天然免疫细胞分泌的细胞因子已经足以激活银屑病这样的自身免疫病了，而T细胞激活会使得病情缓慢不愈。AID vs AD自身炎症性疾病(autoinflammatorydisease，AID)由于基因突变使编码蛋白发生改变，导致固有免疫失调而引起全身性炎性反应。AID主要包括一组单基因遗传病，如家族性地中海热。AID还包括一些多基因疾病，如克罗恩病和痛风。更多新的AID正在被逐渐认识和命名。AID vs AD自身免疫病(autoimmunedisease)包括了一组可累及各个组织和器官的疾病，通常主要指弥漫性结缔组织病。AD

3、亦分为单基因病和多基因病，后者包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、多发性硬化（multiple sclerosis，MS） 、系统性血管炎、1型糖尿病等。AD常分为两类疾病，即多器官(系统)疾病和单一器官(组织)受累疾病。AD病因不明，遗传和环境因素都可能参与其中，但适应性免疫系统针对自身抗原的超强反应发挥了主要作用。自身免疫病的治疗治疗任何自身免疫性疾病的终极目标是：预防自身抗原反应性T细胞或B细胞的激活及其引起的组织损害和炎症反应。（一）抗炎药物（二）免疫抑制剂（三）免疫调节（四）血浆置换（五）对症治疗2.Th17细胞2.1简介Th17细胞 (Thelpercell17,T

4、h17)，Th17细胞是一类产生IL-17的Th细胞亚群，与许多炎症反应和自身免疫性疾病的发生和发展有关。Th17的发现源于实验性自身免疫性脑炎（EAE）和胶原诱导性关节炎（CIA）这两个典型动物实验模型，发现发挥促炎效应的是由分泌IL-17的一种新亚群，而非Th1细胞介导。这种新发现的亚群以分泌IL-17为主，因此被命名为Th17或产IL-17T细胞。Th17细胞的特征是在其胞内表达RORt（维甲酸相关孤核受体t，它是Th17细胞特异性转录调控因子）。Th17细胞表达多种细胞因子，包括IL-17A、IL-17F、IL-21和IL-22。目前研究中普遍采用的是2009年提出方法，把分泌IL-1

5、7A作为人类Th17细胞的表型特征。2.2细胞因子IL-17从1993年首次发现IL-17A以来，人们已经发现了六个IL-17家族细胞因子，分别为IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F。IL-17A和IL-17F是Th17的效应因子，二者在染色体的上位置十分接近。TCR信号通路NFAT结合位点Interleukin-17AandInterleukin-17F:ATaleofTwoCytokines2.2 细胞因子IL-17效应因子IL-17作为致炎细胞因子，可以促进T细胞的激活，刺激上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞产生：IL-6、IL-8、粒细胞-巨噬

6、细胞刺激因子(GM-CSF)及细胞黏附分子(CAM-1)，从而导致炎症的产生。启动因子IL-17是T细胞诱导的炎症反应的早期启动因子，可以通过促进释放促炎细胞因子来放大炎症反应。IL-17与受体结合后，可通过MAP激酶途径和核转录因子kB(NF-kB)途径发挥其生物学作用。在动物实验中，给予IL-17A靶向自身疫苗可预防自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)。用IL-17RA拮抗治疗或用IL17抑制抗体治疗，都可以减弱类风湿性关节炎Th17细胞能够分泌产生IL-17A、IL-17F、IL-6以及肿瘤坏死因子(TNF-)等，这些细胞因子可以集体动员、募集及活化中性粒细胞。Th17细胞产生的IL-17能有

7、效地介导中性粒细胞动员的兴奋过程，从而有效地介导了组织的炎症反应。2.3 Th17细胞的功能2.3分化2.3分化2.3分化抑制Th1和Th2细胞分别产生的型干扰素(IFN-)和IL-4可共同下调Th17细胞反应。2.4 Th17细胞与自身免疫病：促炎因子IL-17具有促炎症作用，诱导促炎细胞因子(如IL-6、TNF)、趋化因子和基质金属蛋白酶的表达，引起组织细胞浸润和组织破坏。IL-17也参与中性粒细胞的增殖、成熟和趋化，对T细胞的活化起协同刺激作用，并能促进树突状细胞的成熟。IL-22参与Th17细胞的效应功能。IL-17与IL-22协同作用，可以增强炎症反应并造成组织损伤。IL-17与IL

8、-22共同表达被认为是自身攻击性(auto-aggressive)T细胞和促炎症T细胞的标志。2.4 Th17细胞与自身免疫病多发性硬化（multiple sclerosis，MS）是以中枢神经系统白质炎性脱髓鞘病变为主要特点的自身免疫病。主要临床特点为中枢神经系统白质散在分布的多病灶与病程中呈现的缓解复发，症状和体征的空间多发性和病程的时间多发性。在MS的病程中，由Th17细胞分泌 IL-17、IL-6、IL-21、IL-22、IL-23和肿瘤坏死因子 TNF-发挥着关键作用，自体活化的Th17细胞通过分泌IL-17和IL-22，来破坏原先紧密链接的由中枢神经内皮细胞构成的胶质蛋白网，穿透血

9、脑屏障，进入中枢神经系统实质内，这一过程也被证明是MS发病的起始和关键过程。同时在MS病人外周血检测中，发现DC细胞分泌IL-23水平增高，这也与前文DC细胞通过IL-23调节Th17和IL-17水平的结论相吻合。EAE模型CCL20Th17CCL20Th17细胞增多为什么？口腔肠道3.Treg细胞分类：按来源不同胸腺-自然发生调节性T细胞(naturallyoccurringTreg,nTreg)抗原特异性：胸腺中的自身抗原 E.g.CD4+CD25+Treg细胞外周-诱导性调节性T细胞(inducedregulatoryTcells,iTreg)抗原特异性：组织特异性抗原和外来抗原 E.g

10、.Tr1,Th3通过分泌抑制性细胞因子发挥免疫调节作用，如IL-10，TGF-通过细胞间直接接触发挥作用Treg细胞作用方式 Treg细胞的可塑性Treg细胞的可塑性CD4+T细胞有明显的可塑性，特别是Treg和Th17细胞。在两类细胞间，还有一些额外的亚类，包括IL-17+IFN-+细胞、IL-17+IL-10+细胞、IL-17+FoxP3+细胞。人类外周血和淋巴组织中也存在在CD4+FoxP3+Treg细胞，可以表达CCR6，并有能力产生IL-17。这类产生IL-17的Treg细胞共表达FoxP3和RORt，并且强烈抑制反应性CD4+T细胞增殖的能力。这些细胞可能是人类CD4+T细胞的一个

11、亚类，表现出都是具有Treg和Th17细胞的功能特征：IL-17的产生、CCR6的表达和免疫抑制作用。CD4+FoxP3+RORt+细胞可能是转化的一个类型，可以产生Th17和Treg细胞，主要根据感受局部的环境决定，如果感受到前炎症的环境，Treg细胞可以释放IL-17。Th17-likeTregcell4.凋亡-抗原诱导治疗产生自身抗原特异性的Treg细胞导入体内，实验对于EAE有明显的治疗效果，目前的研究仅限于体外诱导后注入未免疫的小鼠，起到预防作用，或者在疾病发生前的免疫幼稚型老鼠。但是，未免疫的老鼠和疾病状态下的人、发炎的组织有很大的区别，发炎组织里，自身免疫的细胞无法控制地被激活，

12、分泌促炎症因子在免疫幼稚型的老鼠中，激活的Treg可以充分发挥作用，但是在炎症这种非正常状况下，Treg的功能可能会被抑制，甚至可能转化为效应T细胞所以最大的问题是在炎症状态下产生Treg细胞，并且发挥作用所以，这种新的思路建立在重编程的思想上在自身免疫的环境中，修复，并且重新引导回免疫耐受的状态这种方法可以建立一种机制，在体内诱导出抗原特异性的Treg细胞EAE模型自身抗原是髓鞘脂蛋白pPLP: proteolipidproteinpeptidePLP139151pMOG: myelinoligodendrocyteglycoproteinpeptide35553组对照是：自身免疫小鼠+PB

13、SIRR，PLP，IRR，MAC，OVA，对照组都发展成了复发型EAE*IRR+MAC+PLP与3个对照组相比，出现了显著的抑制所有接受射线的小鼠Treg细胞有所增加，但是只有免疫耐受的小鼠分泌IL-17的TH17细胞有所下降在脾脏内，Treg细胞出现的频率和总数也有所增加*在成功诱导免疫耐受小鼠里，由pPLP引起的T细胞扩增和炎症因子都大幅减少了*用抗体除去90%的CD8+T细胞和B细胞，不影响CD4+T细胞，也达到了效果脊髓中的浸润性炎症T细胞数量减少，Th17减少，Treg变多，整体CD4+T细胞不变MT-response不受影响TGF-发挥关键作用吞噬细胞产生的TGF-是一过性的如果在之前的治疗方案中，加入TGF-的抗体，TGF-的中和会完全转换了耐受的方向并且让小鼠回复到之前的病理水平免疫耐受的小鼠中，TGF-可能是由吞噬细胞和Treg细胞共同产生的，吞噬细胞来源的是因为放射之后吞噬凋亡细胞，Treg细胞产生的TGF-是由于后续发展的抗原刺激的特异性Treg细胞产生 Treg细胞的关键作用*去除后的小鼠表现出炎症细胞的升高，病情更加严重 Treg细胞的关键作用一，凋亡是开启长期免疫耐受的关键因素二，这种新的治疗方法不会分