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文档简介
1、大连依利特高效液相色谱仪操作程序梯度仅作参考(不同实验需区别对待)请尽早阅读使用手册仪器组成大连依利特高效液相色谱仪由泵两台、检测器一台、柱温箱(选配)一台及色谱数据处理系统组成。2开.机接通稳压电源,依次打开两台泵开关,检测器开关,柱温箱开关(实验无温度要求可不开),(第一次使用连续按两下泵“操作菜单”进入菜单2,按“下光标”键进入泵的设定选项,分别设定好泵。具体参考泵使用手册泵设定第页)通入经过滤并超声处理的流动相,打开放空阀,按“冲洗”键排除气泡,按“冲洗”键放空阀出口无液体流出时,需要用注射器抽去管路上的气泡,待气泡排尽后(一般至少3、秒以上),再按一次“冲洗”键,停止冲洗,然后关闭放
2、空阀。(注:更换流动相时需要注意是否互溶。具体参考泵使用手册流动相的更换第页)打开计算机主机开关,显示器开关,打印机开关。进入色谱数据处理系统(具体参考色谱数据处理系统使用手册(第章系统控制页)在计算机桌面上双击色谱数据处理,或者在开始菜单f程序f色谱数据处理f色谱数据处理系统,启动色谱数据,点击左边仪器控制f系统配置,选择检测器,泵泵柱温箱(未开启可不选),点击验证系统配置,弹出窗口内当前的设备必须包括前面所有选择的仪器(检测器,泵,泵,柱温箱),否则不能进入下一步操作。2.3分.析2参数的设置若是一个新的分析物质,点击“新建一个新方法”,点击左边仪器控制f仪器控制,在“梯度控制”内设置总流
3、速,两种流动相比例,梯度曲线设置,最大压力等;在“柱温箱”内设置温度;在“检测器”内设置检测波长,点击“发送仪器参数”;点击“启动泵”按钮,选择“立即启动”(普通色谱柱)或者“缓启动”(不能承受压力变化的特殊色谱柱),开始运行泵。点击左边“分析方法”一“分析方法”,在“数据采集方法”内输入采集时间,缺省路径(自动保存位置);系统默认实验结束后手动点击“保存”按钮保存手动保存数据,如需设置自动保存数据,在“分析自动化”内,勾选“数据采集并存储”,在“预定文件名内”输入样品名称,勾选“时间”或“序号”作为保存名称的后半部分然后点击“文件”一“另存为”一“存储方法”,选择保存位置,输入名称,将此方法
4、保存为方法,方便以后直接调出使用,2.3.若2是.一2个以前分析过的物质,则点击“打开”图标,打开之前做好并保存的一个谱图,查看“仪器控制”“分析方法”里面参数是否与要求一致,一致即可点击“发送仪器参数”,启动泵;不一致稍微修改后点击“发送仪器参数”,启动泵。3.谱图采集具体参考色谱数据处理工作站用户使用手册(第五章,数据采集)页3.点1击“启动基线监测”,开始查看基线,待基线平直后,点击“停止当前数据采集”。将手动进样阀的手柄扳到状态,取好样,将进样针扎入进样口(进样针必须扎到底,绝不允许使用气相的尖针进样),点击“启动数据采集”,将手柄扳到状态,将样品缓慢注入定量环,马上将手柄从状态扳到状
5、态,此时开始在内采集数据。在采集过程中可点击“谱图预先设置”,改变、轴坐标,以观察到需要的、清晰的图谱。3.4若在采集中看到主峰出完,基线走直一段时间后,即可点击“停止当前数据采集”,停止采集,按“保存”按钮,选择保存位置,写上文件名称,点击保存,保存谱图数据;或者设置在合适的时间等自动结束数据采集后,再保存数据。4谱.图处理具体参考色谱数据处理工作站用户使用手册(第六章,谱图处理)页点击“打开一个数据或方法文件”,在目标文件夹内双击之前保存的色谱图,即出现样品色谱图。点击色谱图上的“最大化”按钮,在谱图的下方会出现具体的数据,或者点击“查看组分表与积分结果”,出现组分表窗口,与谱图下方出现的
6、数据一致,在窗口内单击右键,出现菜单,选择“属性”,弹出“项目选项”窗口,在我们所需要的选项前打钩,在组分表内出现相应的图谱数据。根据需要对色谱图及数据进行分析处理,然后点击“打印预览”,查看是否符合要求,然后再点击“打印”即可打印相应的图谱及数据。5关机测定工作完成后,用甲醇洗泵、柱和检测器。逐级关闭软件窗口退出,关闭计算机和打印机,或者等柱子冲洗完毕后再一起关闭亦可。如反相色谱柱保存步骤。普通有机相水相体系(不含缓冲盐)可以直接用纯有机相体系洗倍柱体积(以上),走平基线,保存柱子及仪器。2用普含缓冲盐(酸,碱,盐等)流动相做实验时,先用甲醇:水=1:09(0或乙腈:水1)洗倍柱体积(以上),再换上纯甲醇(或纯乙腈)体系洗倍柱体积(以上),走平基线,保存柱子及仪器。其他色谱柱保存严格按照其说明操作。5普冲2洗完成后,关闭泵,检测器,关闭稳定压电源,再拔出输入电源插头,作好使用登记。6注意事项6普流1动相必须经过过滤和超声处理,样品也必须经过过滤
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