实验 1光学显微镜与洋葱表皮细胞的观察

1、实验1光学显微镜的使用方法与植物细胞的观察一、实验目的1、了解光学显微镜的一般构造和性能；2、学会正确地使用光学显微镜，熟练地掌握对光，低高倍物镜的使用技术，以及显微 镜的维护；3、学会临时装片的制作；4、掌握植物细胞的结构，并了解每一结构的特征及功能二、实验内容1、光学显微镜的构造、使用方法及维护；2、临时装片的制作及徒手切片的练习；三、实验材料洋葱（Allium ceph鳞片叶四、实验用品普通光学显微镜；镊子、载玻片、盖玻片、滴管、培养皿、纱布、吸水纸、擦镜纸； 碘液、水。五、实验方法（一）普通光学显微镜的构造、使用方法及维护1、显微镜的构造显微镜的基本结构可以分两部分，即光学部分与机械部

2、分。（1）光学部分物镜、目镜、聚光器、光圈、反光镜、镜筒（2）机械部分镜座、镜柱、镜臂、载物台、物镜转换器、调焦螺旋2、显微镜的使用方法（1）把显微镜放在桌上，稍偏向身体的左方，离桌子边缘约5厘米的位置，右侧放记录 本或绘图纸等。（2）在使用显微镜观察切片前，首先要调节好光源。在实验室中可利用灯光或自然光， 但不能利用直射的太阳光，以免损伤眼睛及制片。为了迅速而正确地对光，先用低倍镜（这里指的是10X物镜），开大光圈，在目镜上观察 和转动反光镜，寻找最光亮的部分，同时必须使整个视野（就是在显微镜中所能看到的 范围）的光线均匀。如果靠近灯光，可取凹面的反光镜，如果离光源较远，可用平面的 反光镜。

3、（3）把制片（切片）放在显微镜的镜台上，把需要观察的部分移到物镜下面，然后用压 片夹压紧。（4）通过目镜进行观察，观察时应睁开双眼，用左眼看目镜。（5）在开始观察时，为避免物镜压坏制片，可以先从侧面注视物镜与制片间的距离，同 时逐渐降落镜筒，使之靠近盖玻片，然后通过目镜观察，慢慢转动粗调节器，使镜筒逐 渐上升，直到看清制片中的影像为止。（6）需要观察制片中某一部分的细微结构时，可先在低倍镜下找到最合适的地方，并将 其移到视野的中央，然后转动镜头转换器，转用高倍镜(40X)观察。当换到高倍镜后， 应该就可以看到制片中的影像，如果不太清楚，可以转动细准焦螺旋使影像清晰可见。 7)用毕擦洗载物台、复

4、原3、显微镜的放大倍数目镜的放大倍数X物镜的放大倍数4、显微镜的维护使用显微镜过程中要注意以下几个问题：(1)自显微镜柜中取出显微镜时，要用右手握住执手，左手托住镜座，小心地放到桌面 上，不可单手拎着移动。任何旋钮转动有困难时，绝不能用力过大，而应查明原因，排除障碍。如果自己不 能解决时，要向指导教师说明，帮助解决。保持显微镜的清洁，尽量避免灰尘落到镜头上，否则容易磨损镜头。同时要尽量避 免试剂或溶液滴到显微镜上，特别是用高倍物镜观察时，镜头很容易被染料或试剂沾污， 一旦被沾污，应立即用擦镜纸擦拭干净。由于光学玻璃比一般玻璃的硬度小，易于损伤。因此擦拭光学透镜只能用专用的擦镜 纸，不能用棉花、

5、棉布或其它物品擦拭。擦时要先将擦镜纸折叠为几折，从一个方向轻 轻擦拭镜头，每擦一次，擦镜纸就要折叠一次，以免沾在擦镜纸上的灰尘损伤透镜，使 镜面出现一条条的划痕。每次实验结束时，应将物镜转成“八”字形垂于镜筒下，然后降下镜筒，避免物镜 镜头下落时与聚光器相碰撞。显微镜应存放于阴凉干燥的地方，若放在潮湿处，一旦镜 片上着生霉菌，就会腐蚀镜片，且很难除去。显微镜的存放要做到四防：防潮、防腐、防热、防撞击。临时装片的制作(1)准备、(2)取材、(3)盖上盖玻片、(4)染色、(5)观察(1)准备用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净擦拭玻片时要注意用左手的拇指和食指 夹住玻片的两端，右手的拇指和食指衬垫

6、上洁净的纱布后，夹在玻片两面，同时擦拭，以 防将玻片损坏。然后，在载玻片中央滴一滴清水。取材用刀子将洋葱每隔5mm纵切成条形状，然后用解剖刀将条形状的鳞片叶内表皮切为5 X5mm左右的方块状，再用镊子撕下正方形内表皮。把表皮平铺在载玻片的水滴中。盖上盖玻片盖玻片与载玻片成45度角，将盖玻片的一边先接触液滴，另一边缓慢的盖下去染色在盖玻片的一侧滴一滴碘液，用吸水纸在盖玻片的另一侧用吸水纸吸水，使材料染色， 染色时间可以稍微长一点，染色效果更好。5）观察用吸水纸把临时装片底部的水擦干，放到显微镜的载物台上，用压片夹压好，开始观察。（三）植物细胞结构的观察1、植物细胞基本结构的观察用镊子撕取一小块洋葱鳞片叶内表皮，制作成临时装片，置显微镜下观察。先用低 倍物镜观察细胞的形状和排列方式，再在高倍物镜下观察细胞的结构。（1）细胞壁、（2）细胞质、（3）细胞核为什么在显微镜下看不到细胞膜？要想观察细胞膜应对细胞做如何