海枫藤提取物对Na+K+ATP酶活力的影响

1、海枫藤提取物对Na+，K+-ATP酶活力的影响沈放，杨黎江，路斌，王德斌【摘要】目的通过该研究确证彝族传统草药海枫藤中是否含具有强心作用的活性身分，并开端相识该活性身分的存在部位及药效。要领运用大鼠心肌Na+，K+-ATP酶活力测定要领检测海枫藤提取物中是否具有强心类物质。结果海枫藤茎、叶中均含有按捺Na+，K+-ATP酶活力的物质；茎提取物的按捺结果显着优于别的，且其强心活性与剂量呈正相干；同强心苷类物质地高辛比力，海枫藤茎水提取物与地高辛对心肌Na+，K+-ATP酶活力的按捺作用无明显性差异。结论海枫藤提取物中具有雷同于强心苷的活性身分存在，该活性物质重要存在于茎中，且茎的水提取物中含有的

2、强心身分与地高辛的强心作用相近。【关键词】海枫藤Na+K+-ATP酶强心萝藦科植物富含强心苷类身分1，如杠柳属的美叶杠柳Periplaalphylla(ight.)Falner2，杠柳PeriplasepiuBge.3、马利筋属的马利筋AslepiasurassaviaL.4，以及马达加斯加胶藤ryptstegiaadagasariensisBjer.等5。心肌细胞膜上的Na+，K+-ATP酶的活性与心肌紧缩速率有直接接洽，研究表白，强心苷类物质可通过按捺心肌Na+，K+-ATP酶活力来进步心脏搏动速率6，7。1东西1.1质料1.2仪器UV-1600双光束紫外可见分光光度计北京瑞利阐发仪器公司

3、；旋转蒸发仪东京理化；水浴锅；循环水式多用真空泵；低温离心机eppendrf；捣碎机；超低温冰箱美国热电；冻干机德国hristAlpha1-2；枯燥箱。1.3试剂构造匀浆液蔗糖0.25l/L，EDTA25l/L，Tris10l/L，pH7.0，反响液ATP5.0l/L，gl25.0l/L，Nal120l/L，Kl2.5l/L，Tris25l/L，NaN35.0l/L，pH7.4，反响液即在反响液I中加100g/L的地高辛，反响液反响液中参加差异浓度的样品溶液；铁剂含10%三氯醋酸，1%硫脲，3%硫酸亚铁，定磷试剂为11g鉬酸铵与22.5l浓硫酸先溶于100l水中，再稀释至250l，别的未注明试

4、剂均为国产阐发纯。2要领2.1海枫藤果实、茎和叶中有机身分的提取分散流程按照海枫藤果实、叶、茎有机身分提取分散流程，分散得到样品g1，g2，j1，j2，y1，y2。2.2心肌构造匀浆的制备7取康健SD大鼠8只，击头致昏，速取心脏，放入预冷的0.9%Nal中洗去血液，滤纸吸干，称量后按251V/参加构造匀浆液，在冰浴中用玻璃匀浆器制成心肌构造匀浆，经三层纱布过滤，滤液于04冰箱保存。2.3酶促反响7每管加0.1l心肌构造匀浆，空缺管加0.4l10%三氯醋酸和0.5l反响液；总酶管加0.5l反响液；g2-ATP酶管加0.5l反响液；给药管加0.5l反响液。置37恒温水浴中振荡20in取出，立即放入

5、冰裕除空缺管外，别的管敏捷参加0.4l10%三氯醋酸停顿反响，振荡后3000r/in离心10in，取上清液用Harry法测定无机磷含量。与此同时汲取0.1l构造匀浆作得当稀释后用Bradfrd法测定卵白质含量。尺度卵白质溶液接纳牛血清卵白配制，正确称取12.5g，加蒸馏水至50l，酶活力单元以每小时每毫克卵白水解ATP产生的无机磷的微摩尔数表现即lpi/(gprh)。2.4统计学阐发两组间数据差异比力接纳Studentt查验，多组间数据差异接纳Dunans新复极差法查验，当P0.05时以为差异明显，P0.01时以为差异极明显。3结果3.1海枫藤提取物对大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的

6、影响用上述要领测得大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力为0.712lpi/(gprh)，占总酶活力的15.1%，海枫藤提取物对Na+,K+-ATP酶活力的影响见表1。表1海枫藤提取物对大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的影响略由以上结果可以看出，海枫藤茎、叶提取物中含有显着按捺Na+,K+-ATP酶活力的物质，即含有强心类物质。与叶提取物结果比拟可知，海枫藤的强心物质重要存在于茎中。3.2差异浓度的海枫藤茎提取物对大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的影响用10，5，2.5，1g/l差异浓度海枫藤茎醇提物和水提物测定大鼠心肌Na+,K+-ATP酶的活力，结果见表2。表2差异浓度海

7、枫藤茎提取物对大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的影响(略)由以上结果可以看出，海枫藤茎提取物中含有能显着按捺Na+,K+-ATP酶活力的物质，按捺率与剂量呈正相干。海枫藤茎醇提物的按捺回归方程为Y0.7190.0507X,r=0.9994，其半数按捺浓度I50为7.16g/l。海枫藤茎水提物的按捺回归方程为Y=0.7311-0.056X，r=0.9879，其半数按捺浓度I50为6.72g/l。3.3海枫藤茎提取物与强心类药物按捺大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的比力用5g/l海枫藤茎提取物和强心类药物测定大鼠心肌Na+,K+-ATP酶活力，比力海枫藤提取物的强心成果，结果见图1

8、。结果表白，地高辛和海枫藤提取物均具有显着按捺大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的作用。在同样浓度5g/l条件下海枫藤茎醇提物对大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的按捺结果显着低于地高辛海枫藤茎醇提物按捺率为35.0%，地高辛为47.7%，而海枫藤茎水提物对大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活力的按捺结果41.4%与地高辛的按捺结果没有明显性差异。4讨论本研究通过海枫藤果实、茎和叶的乙醇及水提取物对大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性影响的检测实行，创造海枫藤茎、叶的提取物能明显按捺大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶的活性P0.05，表白该植物中含有雷同于强心苷的活性身分存

9、在。海枫藤叶的水提取物和茎的乙醇提取物、水提取物均能显着按捺Na+,K+-ATP酶的活性，但比拟力而言，茎提取物的按捺结果较叶提取物按捺结果显着。茎提取物对Na+,K+-ATP酶活性的按捺率与其剂量呈正相干干系，茎醇提物的半数按捺浓度I50为7.16g/l，海枫藤茎水提物的半数按捺浓度I50为6.72g/l。由此可知，海枫藤含有具强心作用的化合物，即含有强心类物质，且该强心类物质重要存在于茎中。【参考文献】1姚新生.自然药物化学，第3版.北京：人民卫生出书社，2002：299.2邓士贤,王德成,何功倍，等.美叶杠柳Periplaalphylla(ight)Falner的强心作用J.药学学报,1980,4:55.3李玉红，高秀梅，张柏礼，等.香加皮提取物对离体心脏心成果的影响J.辽宁中医药大学学报,2022,7(4):396.4张援虎，温远影，匡廷云.萝藦科马利筋族植物化学身分研究希望()J.自然产物研究与开拓,2000,12