防己渗漉工艺的优选研究

1、防己渗漉工艺的优选研究【摘要】目的研究防己渗漉提取的最正确工艺。方法以防己总碱和粉防己碱为考察指标，采用正交实验法对防己的渗漉工艺进展研究。结果确定了最正确工艺条件为浸渍24h，60%乙醇6倍量渗漉，渗漉速度为快速。结论工艺合理可行，可应用于消费。【关键词】防己渗漉正交实验总生物碱粉防己碱Abstrat：bjetiveTstudytheptiuperlatinnditinsfrRadixStephaniaeTetrandrae.ethdsTheperlatinpressfRadixStephaniaeTetrandraeasstudiedbyrthgnaldesign，andthententl

2、evelfttalalkalidsandtetrandrineereusedasindexes.ResultsTheptiuperlatinnditinsfrRadixStephaniaeTetrandraeereasflls：thenentratinfethanlas60%,thetiefsakas24h,theratefperlatinas5lin-1kg-1，andthevluefslventas6ties.nlusinTheethdisreasnableandfeasible，andanbeappliedtbathprdutin.Keyrds：RadixStephaniaeTetran

3、drae；Perlatin；rthgnaldesign；Ttalalkalids；Tetrandrine防己为防己科植物粉防己StephaniatetrandraS.re的枯燥根。具有利水消肿、祛风止痛的成效。临床上用于水肿脚气，小便不利，湿疹疮毒，风湿痹痛，高血压病等1。本品是一味临床常用的中药，在许多成药中均有使用，其主要有效成分为生物碱类，以苄基异喹啉型生物碱为主，为脂溶性有效成分，另外也包含少量水溶性季铵碱类2。所以，为保证有效成分的充分提取，消费上通常采用醇提工艺，以渗漉法和回流法为主。为降低本钱，进步收率，为大消费提供实验根据，我们对防己的乙醇渗漉工艺进展了优选考察。实验采用正交设

4、计法，分别以总生物碱、粉防己碱为考察指标，以乙醇浓度、浸泡时间、乙醇倍数、渗漉速度为考察因素进展研究，获得了较为理想的优选工艺。现报道如下。1仪器与材料高效液相色谱仪，P680A，美国戴安；UV-1100紫外分光光度计，北京瑞利分析仪器；751G分光光度计，上海分析仪器厂；电子天平，0.0001g/0.00001g,XR205S-DR，瑞士普利赛斯。渗漉筒，500l，自制。防己，购于成都市荷花池药材市场，产地：浙江，含粉防己碱1.13%；粉防己碱对照品，含量测定用，批号0711-20005，中国药品生物制品检定所产品；乙醇，医用，95%，购于宜宾保康药业泸州分公司；其余试剂均为分析纯。2方法与

5、结果2.1方案设计经历及预实验结果说明，渗漉工艺的主要影响因素为乙醇浓度、浸泡时间、乙醇倍数、渗漉速度等，应选定以上4个考察因素，每个因素设三程度，以防己总碱、粉防己碱的提取率为评价指标权重系数均为0.5，按L9(34)正交表实验，表头设计见表1。表1因素程度略称取防己粗粉100.0g，参加1倍量相应浓度的乙醇，搅拌均匀，密闭放置2h,待药粉充分膨胀和润湿后，装筒，按?中国药典?2022年版渗漉法1实验，参加相应浓度的乙醇，浸泡1248h，开场渗漉，流速15lin-1kg-1，搜集相应量的渗漉液，并用一样浓度的乙醇定容到1000l，得样品液含生药0.1g/l。2.2总生物碱的含量测定2.2.1

6、贮备液的制备精细称取5g粉防己碱对照品，至10l容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀0.496g/l。2.2.2最大吸收波长的选择精细称取粉防己碱对照品1g，置25l量瓶中，用乙醇稀释至刻度，精细汲取0.2l，置10l量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。采用紫外分光光度法，在波长200400n处进展扫描，结果见图1。粉防己碱的最大吸收波长为282n。2.2.3标准曲线的绘制分别精细量取贮备液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2l，置10l容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。以乙醇为空白，在282n处测定吸收度，根据测定结果绘制标准曲线，并求得回归方程：A=12.949309-0.063,相关系

7、数r=0.99998。2.2.4样品的测定分别精细量取样品溶液5l,置100l烧杯中，水浴蒸干，残渣加混合溶剂乙醚：氯仿：乙醇：10%氨水，2582.5140l，搅拌后浸泡10in，超声处理10in，放置片刻，倾滤，残渣用混合溶剂洗涤3次，5l/次，滤液水浴蒸干，残渣用乙醇溶解并定容至25l，精细量取上述溶液1l，置10l容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，以乙醇作空白，于282n处测定吸收度，计算总生物碱含量。结果见表2。2.3粉防己碱含量测定2.3.1色谱条件色谱柱为DikaKrasil18(2504.6,5),流动相为乙腈甲醇0.06%二乙胺溶液602020，检测波长282n，流速1.0l/i

8、n,进样量10l。2.3.2对照品溶液的制备精细称取粉防己碱对照品10g，置10l棕色量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀1g/l。2.3.3供试品溶液的制备精细量取样品液10l，置50l蒸发皿中，水浴蒸干，残渣，用流动相溶解，转入25l量瓶，加流动相至刻度，摇匀，离心，取上清液，0.22滤膜过滤。2.3.4标准曲线的制定取上述对照品溶液用流动相稀释，制备成每毫升含0.05，0.10，0.25，0.50，0.75，1.00g粉防己碱的系列标准溶液，按上述色谱条件分别进样5l，以粉防己碱的峰面积A为纵坐标，浓度为横坐标作图，求得粉防己碱的回归方程为：A=63.8738-0.3118，r=0.9

9、998，粉防己碱浓度在0.051.0g范围内与峰面积线性关系良好。2.3.5测定分别精细汲取对照品溶液(0.25g/l)与供试品溶液各10l,注入液相色谱仪，测定，按外标法计算含量，即得。液相色谱图见图23，测定结果见表2，方差分析见表3。表2防己渗漉正交实验表及结果略表3方差分析略直观分析及方差分析说明，乙醇浓度对防己的渗漉工艺有极显著影响，应选择最正确浓度A1，而B，D因素对工艺的影响较小，从方便消费、节约本钱的角度，选择浸泡24h,(B2)，搜集6倍量渗漉液1，渗漉速度为快速D3。即A1B21D3。据此条件，验证3批。结果见表4。表4验证实验略3讨论在方法学研究中，参照文献资料我们考察了

10、甲醇-水(4060)，甲醇-水-二乙胺(82180.2)，甲醇-水(8317，含0.5g/L的三乙胺)，甲醇-乙腈-水-二乙胺(6525100.08)，甲醇-乙腈-0.003L/LKH2P4-二乙胺(5525200.06)等多种流动相系统，结果说明本文方法别离度好，别离效能高。流动相中参加少量二乙胺，能较好地改善别离度，并使峰形更好。验证实验的结果说明，优选工艺收得率与正交实验结果接近，但优选工艺节约了乙醇，减少了时间，降低了消费本钱，粉防己碱的提取率到达了83%，说明本工艺合理可行，适用于大消费。从实验结果看，随着防己总碱提取率的增高，粉防己生物碱的提取率也相应增高，说明两者的含量之间有一定对应关系。防己总碱的检测参照文献方法3，采用了混合溶剂。可以