宠物人兽共患寄生虫病及其疫苗研究展望

1、宠物人兽共患寄生虫病及其疫苗研究展望人兽共患病(znsis)主要由细菌、病毒和寄生虫这三大病原生物引起，有记载的人兽共患病约200种。我们将在人与脊椎动物之间自然传播的寄生虫病和寄生虫感染称为人兽共患寄生虫病(uniableparasitsisntanandanial,PA),至今已报道70多种，在人兽共患病中占重要地位。其病原包括原虫、蠕虫和节肢动物中能钻入或进入宿主皮肤或体内寄生的种类共120多种1,2。随着世界经济的开展和人们生活程度的进步，在兴隆国家和开展中国家先后掀起了宠物热。我国近十年来，宠物业在全国迅猛开展，犬、猫、鱼、鸟等已进入百姓家庭。宠物，特别是与人关系最亲密的犬、猫的饲养

2、，既使人们的生活增添了乐趣，又给人类安康带来了威胁。它使宠物市场出现了前所未有的商机，也给人兽共患寄生虫病的防治带来了严峻挑战。为此，本文就宠物(犬、猫)PA及其疫苗防治研究现状作一综述。1宠物(犬、猫)人兽共患寄生虫病1.1主要种类经文献检索，有记载的犬、猫人兽共患寄生虫病至少有39种，约占PA的56%，其中原虫病9种(内脏利什曼并皮肤利什曼并皮肤黏膜利什曼并肺孢子虫并弓形虫并非洲锥虫并克氏锥虫并等孢球虫并贾第虫病)、吸虫病8种血吸虫并华支睾吸虫并后睾吸虫并双腔吸虫并棘口吸虫并片形吸虫并异形吸虫并并殖吸虫病、绦虫病8种猪绦虫/囊虫并牛绦虫/囊虫并棘球蚴并泡球蚴并裂头蚴并裂头绦虫并复孔绦虫并细

3、颈囊尾蚴病、线虫病10种钩虫并膨结线虫并毛细线虫并麦地那龙线虫并犬恶丝虫并马来丝虫并吸吮线虫并颚口线虫并粪类圆线虫并旋毛虫病、棘头虫病1种猪巨吻棘头虫病和节肢动物病3种蝇蛆并疥螨并蠕形螨病，病原涉及80多种医学寄生虫和节肢动物3。1.2生活史类型21.3流行因素去除后，这种特异性获得免疫也将逐渐消失，重新处于易感状态，很易发生再感染。对某些寄生虫的易感性除与免疫有关外，还与宿主的食性、生活习性等因素有关。1.4防治原那么PA的防治常根据流行情况和流行规律，制定相应的法规监视管理制度，将控制传染源、切断传播途径和保护易感宿主有机结合起来，因地制宜，以防为主，综合防治。而免疫预防(iunprphy

4、laxis),应用疫苗接种的方法诱导宿主产生特异性免疫，以预防和控制寄生虫病已被国内外科学家认为是最平安、有效的防治措施，也是人们多年来共同追求的目的。2宠物犬、猫人兽共患寄生虫疫苗研究2.1现状与需求长期以来，无论对人或兽的寄生虫病防治都以药物驱虫为主，并获得了显著成效。过去的10年，驱虫药已成为动物药品市场中增长最快的领域，约占世界动物药品销售额18万亿美元的四分之一4。至今，药物驱虫仍然在治疗和控制寄生虫病中发挥着重要作用。但是，长期、大量化学药物的应用，出现了药物抗性寄生虫、化学药物残留以及药物残留引发的食品平安和环境污染等问题5。加之，寄生虫存在明显的再感染现象、抗虫新药研发周期长、

5、投资宏大以及宠物主对疫苗预防的渴望和需求，这些都引起了研究者和商家的高度关注。一个寄生虫病疫苗防治的新领域正悄然兴起，一个潜在而宏大的宠物寄生虫疫苗商品市场将面临竞争。2.2疫苗研究进展由于疫苗平安、无副作用、无残留、无污染，具有预防和治疗的双重成效，且易被消费者承受，所以人类对几乎所有传染病都提出疫苗防治的要求。虽然，寄生虫构造、抗原复杂、寄生部位和免疫机制特殊等原因给疫苗研制带来了重重困难，但是，消费者对安康和平安的需求以及盈利超过3万亿美元的宠物市场对疫苗的需求，对寄生虫疫苗的研究产生了宏大的动力。虽然，兽用寄生虫疫苗研究已获得明显进展，但至今，商品寄生虫疫苗绝大多数仍为活疫苗或致弱活疫

6、苗。由于其存在保护率低、平安性差、产量低、本钱高等问题，商业前景不容乐观Bain,19996。而基因工程疫苗和核酸疫苗的研究，可使寄生虫疫苗的产业化和商品化成为现实，许多科学家对此寄予极大的期望Alarn等,19997。lsn等,2000;Augstine,20018，9。利什曼原虫疫苗的研究经历了全虫疫苗、重组疫苗和核酸疫苗的过程。1999年，研究证实LPG(lipphsphglyan)是阻断传播中有希望的候选疫苗。目前，硕大利什曼原虫核酸疫苗保护性抗原基因有外表抗原gp63、LAK、PSA-2、外表抗原/gp46/-2等。Handan等(2001)发现DNA疫苗也有治疗作用10，endez

7、等(2001)用L.ajr对57BL/6小鼠免疫实验研究，结果说明DNA疫苗接种可产生有效的保护性11。另外，还发现一种可诱导更高保护率的LAK蛋白，并在构建硕大利什曼原虫LAKDNA疫苗后，证实其能诱导Th1反响，可控制感染12。FrtDdge动物卫生组织1999研制的贾第虫疫苗，能减少或阻止犬和猫肠道内贾第虫包囊脱囊，最终实现疫苗接种动物体内无滋养体感染lsn等,200013。1993年，英特威公司以致弱S48株刚地弓形虫研制弓形虫DNA疫苗“Txvax,用其滴鼻预防绵羊弓形虫病获得有效的结果。有关弓形虫核酸疫苗的研究，Angus等(1996)用弓形虫SAGI重质粒免疫小鼠进展初步研究。周

8、永安等(1999)用PDNA3-p30真核表达质粒免疫小鼠，结果显示血清抗体升高，感染小鼠存活时间延长14。郭虹等(1999)将PDNA-RPI重组质粒以IFN-为佐剂免疫小鼠，结果显示NK细胞活性、D8+T细胞明显增高，D4+/D8+比值明显降低15。预防球虫病的重组疫苗正在研究中，用沙门氏杆菌作为载体表达的球虫抗原EalA诱导免疫应答的研究也在实验中(Sng等，2000)16。许多实验研究说明预防原虫感染的保护性免疫是可以人工建立的。开展过程。随着生物高新技术的开展，血吸虫疫苗候选抗原分子或抗原基因不断被发现和鉴定，基因工程疫苗已成为主要研究方向。1998年，H/TDR在两个独立的研究室对

9、几种曼氏血吸虫(S)疫苗候选分子进展了平行实验，并提出6个最具潜力的疫苗候选分子，包括28kDaSGST(谷胱甘肽-S-转移酶)、97kDaSParaysin(副肌球蛋白)、IrV-5(致弱尾蚴免疫血清挑选的抗原分子)、TPI(丙糖-膦酸酯异构酶)、S23(膜相关抗原)和S14(脂肪酸结合蛋白)。其中，GST已进入临床期试验，paraysin、AP-4/TPI和S14抗原将按GP标准制备用于临床试验，而IrV-5和AP-3/S23被推荐采用DNA免疫的形式继续研究2。1999年报道，肝片形吸虫分泌的组织蛋白酶L1和L2是重要的蛋白分子，参与免疫逃避、组织穿透和营养吸收等功能(ulahy等，19

10、99;Spithill等,1999)17，18。用其接种牛，可减少虫负荷42%69%，虫卵活力下降60%，假设将其与高分子血红蛋白结合，保护率可增加至73%(Gnigle等，1995)。Piaenza等1999用其接种绵羊，保护率为60%，减卵率为71%81%，将其与天然亮氨酸氨肽酶结合时，保护率可增加到79%19。肝片形吸虫其他蛋白分子，如谷胱甘肽S转移酶GST和多种脂肪酸结合蛋白FABP对牛的保护率分别是19%67%和55%，但有关肝片形吸虫重组疫苗的试验未见报道Spithill等，199920。囊尾蚴病和棘球属棘球蚴病绦虫的重组疫苗研究已获成功。20世纪80年代，在中国、新西兰和澳大利亚

11、、阿根廷分别施行的试验结果证明棘球蚴疫苗EG95对牛群感染的保护率达96%100%。预防绵羊带绦虫感染的疫苗45的保护率达92%以上，牛带绦虫疫苗预防牛的感染同样有效。EG95和45抗原在六钩蚴外表表达，与抗体和补体结合，阻止六钩蚴逸出和移行，从而发挥保护免疫作用。其另一重要特性是能产生跨种保护，已证实绵羊带绦虫45、T18tT16分子的复合物能诱导人工感染猪的保护率达93%。因此，在预防人类感染中有应用潜力Lightlers等，200021。habalgity(2001)报道棘球绦虫六钩蚴的脂肪酸结合蛋白以致弱的鼠伤寒杆菌LVR1表达形式口服接种犬，可产生有效的体液和细胞免疫应答，作者建议研

12、究其他犬用候选疫苗时应用这种表达形式，因为鼠伤寒杆菌LR1对犬无害22。别离和克拢并有证据说明，ASP是有前景的疫苗候抗原23。血矛属、奥斯特属和毛圆属消化道线虫，是牛、羊等动物最主要的寄生虫，在驱虫药市场中占有最大的份额，人们投入的研究精力也最多。有效的线虫疫苗是一种具氨肽酶A和活性的110KDa的H11蛋白分子。H11在线虫微绒毛上表达并与抗体结合，可破坏线虫四期幼虫和成虫的摄食才能，对绵羊羔的保护率达90%以上。这种保护率与抗体滴度相关。因H11在自然感染时不具免疫原性，而被认为是一种“隐蔽抗原(Netn等，1999)24。研究显示，捻转血矛线虫p100GA1在预防山羊异源感染时保护率为

13、60%、虫卵减少率为50%。从众多的疫苗成分中提取能产生穿插保护的单一分子，或至少是少数几个分子已成为线虫疫苗研究的焦点。而“隐蔽抗原被认为是最理想的候选物。另一挑战是通过重组DNA等技术使疫苗研究产业化，重组H11、H-gal-GP和TSBP的研究正在向这个方向开展Knx等,200125。蜱、螨、吸血蝇、毛虱等。最具里程碑意义的是一种由大肠杆菌表达的B86基因工程疫苗TikGard(T)，由澳大利亚生物技术所和联邦科学与工业研究组织SIR结合研制，用于预防牛的微小牛蜱illadsen,199526。此后，在酵母中也表达成功类似的重组疫苗Gava(T)并由古巴哈瓦那Heber生物技术科学院商品

14、化消费(Garia等，2000)27。该疫苗诱导的抗体可结合、溶解蜱肠细胞上的B86分子，从而干扰蜱的吸血行为，使其繁殖才能下降。1999年，澳大利亚生物技术所研制出第二代能产生强而持久免疫应答的微小牛蜱疫苗TikGardPlus(T)。同年，加拿大批准一种预防牛纹皮蝇的蛋白酶“hypderinA重组疫苗上市销售Pruett,199928。2.3寄生虫疫苗研究展望上述证据说明，PA种类多、流行因素复杂、防治难度大。人们试图寻找一种有效预防和消除这类疾病的新方法、新途径。大量研究结果证明，接种疫苗诱导宿主产生保护性免疫，以防治寄生虫和节肢动物对宿主的感染或损害是可行的。尽管已有多种寄生虫疫苗候选

15、抗原的研究获得明显进展，但大多数疫苗诱导的免疫保护率尚未令人满意。抗原别离与筛癣基因克隆与重组、高效表达、进步保护率穿插保护力等仍然是今后一段时间研究的重点。当然，寄生虫疫苗制剂的研究和商品化过程并非一朝一夕，它涉及寄生虫生物学、分子生物学、免疫学、疫苗试验、产业化和商品化等许多环节。我们相信，随着免疫学、基因组学和分子生物学等现代高新技术在寄生虫学研究领域的应用和开展，寄生虫疫苗必将在PA的防制中发挥重要作用。【参考文献】2吴观陵.人体寄生虫学，第3版.北京:人民卫生出版社，2022,55.4DaltnJP,ulahyG.Parasitevainesarealiiity?Veterinary

16、Parasitlgy,2001,98:149-167.9AugustineP.ell:sprziteinteratinsandinvasinbyapiplexanparasitesfthegenusEieria.IntJParasitl,2001,31:1-8.10HandanE.Leishaniasis:urrentstatusfvainedevelpent.linirbilRev,2001,14(2):229-243.11endezS,GurunathanS,KahaiS,etal.TheptenyanddurabilityfDNA-andprtein-basedvainesagainstLeishaniaajrevaluatedusingldse,intranderalhallenge.JIunl,2001,166(8):5122-5128.25KnxDP,SithD.Va