生理科学实验仿十

1、专业：临床医学： 学号：日期：地点：实验31101036422013 年 11 月 7 日医教 C-512课程名称：生理科学实验指导老师：实验名称： 家兔循环与泌尿系统综合实验实验类型：_探究型同组学生：_、绮_：3110十 家兔循环系统与泌尿系统影响的探究（浙江大学医学院 2011 级临床医学专业 3A 班第 2 组，浙江 杭州 310058）【摘要】目的：观察刺激家兔刺激迷走神经和静脉注射生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素等药物对尿量、血压及尿中某些成分的影响，分析处理的作用机制。 方法：利用颈动脉插管、插管和尿收集方法，检测各处理后家兔尿量的变化及动脉血压的变化。 结果：静脉注射 20mL

2、生理盐水前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 86.75mmHg，注射后最大尿流量为 9.1 滴/min，最高血压值为 129.09mmHg；以强度为 5V，频率 30Hz，波宽2ms 的电脉冲间断刺激迷走神，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 86.98mmHg，电刺激后最小尿流量为 1.8 滴/min，最低血压为 48.71mmHg；静脉注射 5mL 葡萄糖前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 86.87mmHg，注射后，最大尿流量为 16.3 滴/min，最高血压为 101.46mmHg；静脉注射 0.3mL 去甲肾上腺素前，家兔尿流量为 4.5

3、滴/min，平均动脉压为 87.18mmHg，注射后，最小尿流量为 1.3 滴/min，最高血压为 154.07mmHg；静脉注射 5 倍体重剂量前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 87.00mmHg，注射后，最大尿流量为 25.5 滴/min，最高血压为 93.55mmHg；注射 2U 垂体后前，家兔尿流量为4.5 滴/min，平均动脉压为 86.87mmHg，注射后，最小尿流量为 0.5 滴/min，最低血压为48.08mmHg；耳缘静脉注射酚红后 4min 起，家兔尿液中出现酚红。 结论：注射生理盐水、葡萄糖和，能使家兔尿量增加，血压升高；电刺激迷走神经和注射垂体后使家兔

4、尿量减少，血压下降；注射去甲肾上腺素使家兔尿量减少，血压升高；酚红能指示肾脏的排尿速度。【】家兔；循环系统、泌尿系统；动脉血压、尿量；生理盐水、电刺激、葡萄糖、去甲肾上腺素、垂体后【前言】尿生成的过程包括肾小球的滤过作用及肾小管与集合管的重吸收和作用。肾小球滤过作用的动力是有效滤过压，而有效的高低主要取决于以下三个：肾小球毛细血压、血浆胶体渗透压和囊内压。在正常情况下，囊内压不会有明显变化。肾小球毛细血压主要受全身动脉血压的影响，当动脉血压为 80180mmHg 时，由于肾血流的自身调节作用，肾小球毛细压均能维持在相对稳定水平，但当动脉血压高于 180mmHg 或低于 80mmHg 时，肾小球

5、毛细血压就会随血压变化而变化，肾小球滤过率也就发生相应变化。另外，血浆胶体渗透压降低，会使有效滤过压增高，肾小球滤过率增加。影响肾小管、集合管泌尿机能的，包括肾小管溶液中溶质浓度和抗利尿激素等。肾小管溶质浓度增高，可妨碍肾小管对水的重吸收，因而使尿量增加；抗利尿激素可促进肾小管与集合管对水的重吸收，导致尿量减少1。本实验将通过改变动脉血压、改变肾小管溶液中溶质浓度、施加神经体液调节因素以及干扰重吸收来探究家兔的循环与泌尿系统的相互作用与各处理下的相应变化。1.材料1.1 实验动物家兔（由浙江大学实验动物中心提供）1.2 实验仪器血压换能器、计滴器、RM6240 多道生理信号处理系统1.3 试剂

6、药品20%氨基甲酸乙酯、生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素、垂体后、酚红2.方法2.1 实验装置连接和仪器参数设置 血压换能器置于家兔心脏水平位置，换能器输出线接 RM6240 多道生理信号处理系统第 2 通道，计滴器RM6240 多道生理信号处理系统计滴插口。开启 RM6240 多道生理信号处理系统，第 1 通道为计滴器计滴，默认参数；第 2 通道模式为血压，时间常数为直流，滤波频率 100Hz，灵敏度 12kPa，采样频率 800Hz，扫描速度 1s/div。刺激器刺激模式为连续单刺激，刺激强度 510V，刺激波宽 5ms，刺激频率 30Hz。2.2 动物准备2.2.1 家兔麻醉固定 家兔称重

7、后，按 1g/kg 体重的剂量于耳缘静脉注射 200g/L 氨基甲酸乙酯麻醉。快速推注 1/2 或 2/3 麻醉剂后，观察家兔角膜反射，酌情推注所余药物。动物麻醉后仰卧于手术台上，固定四肢，前肢交叉固定，用棉绳钩住兔门齿，将绳索拉紧并缚于兔台铁柱上。2.2.2 颈部手术 剪去颈前部被毛，正中切开颈部皮肤 57cm，钝性分离颈部肌肉、颈部气管和神经鞘，用玻璃分针仔细分离左侧颈总动脉、右侧迷走神经，在迷走神经下穿细线备用。行左颈总动脉插管。2.2.3 腹部手术 从耻骨联合向上沿正中线作长约 4cm 的切口，沿腹白线切开腹腔，将轻拉至腹壁外，辨认清楚和输尿管的解剖位置，用止血钳提起前壁（靠近顶端部分

8、），选择较少处，切一纵行小口，插管后结扎。使插管的管出口处低于膀胱水平，用培养皿盛接由管流出的尿液。如体积仍较大时，可用粗线将扎掉一部分，是内的贮尿量减至最少。用先结扎颈部以阻断同的通路。术毕用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。2.3 实验观察2.3.1 正常的血压和尿量正常尿流量（滴/min）和血压值。2.3.2 快速增加血容量 静脉快速注射生理盐水 20ml。最大尿流量和最高血压值。2.3.3 刺激迷走神经 待尿量回复稳定后用强度 5V，频率 30Hz，波宽 2ms 的电脉冲间断刺激右侧迷走神经的末梢端 12min。最小尿流量和最低血压值。2.3.4 静脉注射葡萄糖 静脉注射 200g/L

9、葡萄糖 5mL。最大尿流量和最高血压值。2.3.5 静脉注射去甲肾上腺素 静脉注射 0.1g/L 去甲肾上腺素 0.3mL。最小尿流量和最高血压值。2.3.6 静脉注射按 5mg/kg 体重静脉注射 10g/L。最大尿流量和最高血压值。2.3.7 静脉注射垂体后静脉注射垂体后2U。最小尿流量和最低血压值。2.3.8 静脉注射酚红 静脉注射 6g/L 酚红 0.5mL，计从注射酚红起到出现酚红的时间。3.结果3.1 快速增加血容量 处理前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 86.75mmHg， 静脉注射 20mL 生理盐水后最大尿流量为 9.1 滴/min，最高血压值为 129.0

10、9mmHg。3.2 刺激迷走神经 处理前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 86.98mmHg，以强度为 5V，频率 30Hz，波宽 2ms 的电脉冲间断刺激迷走神经，电刺激后最小尿流量为 1.8滴/min，最低血压为 48.71mmHg。3.3 静脉注射葡萄糖 处理前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 86.87mmHg，静脉注射 5mL 葡萄糖后，最大尿流量为 16.3 滴/min，最高血压为 101.46mmHg。3.4 静脉注射去甲肾上腺素 处理前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为87.18mmHg，静脉注射 0.3mL 去甲肾上腺素后，最小尿

11、流量为 1.3 滴/min，最高血压为154.07mmHg。3.5 静脉注射处理前，家兔尿流量为 4.5 滴/min，平均动脉压为 87.00mmHg，静脉注射 5 倍体重剂量后，最大尿流量为 25.5 滴/min，最高血压为 93.55mmHg。3.6 静脉注射垂体后处理前，家兔尿流量为4.5 滴/min，平均动脉压为86.87mmHg，注射 2U 垂体后后，最小尿流量为 0.5 滴/min，最低血压为 48.08mmHg。3.7 静脉注射酚红 耳缘静脉注射酚红后 4min 起，家兔尿液中出现酚红。原始数据表见附录。4.4.1 静脉快速注射生理盐水对尿量和血压的影响静脉快速注射生理盐水使家兔

12、血压升高，尿流量增多。是因为静脉快速注射生理盐水引起血容量迅速增加，血压升高，可刺激左心房和胸腔大静脉上的容量感受器和颈动脉窦主动脉弓压力感受器，使神经垂体视上核和室旁核细胞的抗利尿激素减少，抑制了远和集合管对水的重吸收，尿液排出增加；此外，当血压升高超过肾血流的自我调节能力时，可引起肾小球毛细血压升高，同时生理盐水对血浆稀释会引起血浆胶体渗透压下降，二者共同作用使肾小球有效滤过压升高，肾小球滤过率增加2。故尿生成增多。其他神经与体液调节中也参与尿量调节：肾血流灌注增多，抑制肾的近球细胞分泌肾素，紧张素生成减少，使 ADH、醛固酮减少，重吸收减少，尿量增多。抑制肾交感神经活动，去甲肾上腺素减少

13、，对肾脏平滑肌 受体作用减弱，肾相对舒张而肾血流量增加，有效滤过压增加。促使心房肌心房钠尿肽(ANP)，ANP 可使入球小动脉舒张，并可使滤过分数增加，因而肾小球滤过率(GFR)增高，Na+的滤过量也随之增加，此外，ANP 通过其第二信使 cGMP 使肾髓质部集合管上皮细胞顶端膜上的钠通道关闭，从而抑制Na+的重吸收，进而抑制水的重吸收2。4.2 电刺激迷走神经末梢端对尿量和血压的影响刺激迷走神经导致家兔血压降低，尿流量减少。因为刺激迷走神经后其末梢的乙酰胆碱作用于心肌 M 胆碱能受体，通过 G 蛋白-AC 途径使细胞内c水平降低，蛋白激酶A(PKA)活性降低，引起负性变时、变传导、变力作用，

14、导致心肌收缩能力减弱，心率减慢，血压降低2。降低的血压一方面使肾血流量降低，肾小球毛细中血浆胶体渗透压上升速度加快，滤过平衡点靠近入球小动脉端，肾小球滤过率减少；另一方面，颈动脉压力感受器和，水重吸收增多，从而使尿量减少2。的刺激减弱，机体反射性增加抗利尿激素的4.3 静脉注射葡萄糖对尿量和血压的影响静脉注射葡萄糖后家兔尿流量增多，血压增高。其原因为家兔体重 2.5 kg，血量 200 mL，正常血糖浓度为 100 mg/mL，注射 20 %葡萄糖 5 mL 后血糖浓度为 600 mg/mL，超过了肾糖阈，当血液流经肾小球时，大量的葡萄糖滤过进入原尿，小管液中葡萄糖含量增多并超过了近端肾小管的

15、重吸收能力。由于小管液中葡萄糖浓度升高，使渗透压增大，妨碍了肾小管特别是近对水的重吸收，小管液中的钠离子被稀释而浓度降低，故小管液与细胞内之间的钠离子浓度差变小，钠离子的重吸收也减少，结果尿量增多2。而血压升高则可能是由于注射葡萄糖溶液后增加了家兔的血容量所致。4.4 静脉注射去甲肾上腺素对尿量和血压的影响静脉注射去甲肾上腺素使得家兔血压升高，尿流量减少。具体原因为：甲肾上腺素可与心肌细胞膜上的1-肾上腺素能受体结合，产生正性变时、变力和变传导作用，引起血压升高；同时去甲肾上腺素兴奋平滑肌1 受体，引起外周强烈收缩，外周阻力增加2，故血压上升明显。去甲肾上腺素能够激动肾的1 受体，使肾小球入球

16、小动脉和出球小动脉收缩，而前者收缩比后者更明显2。一方面使肾小球毛细血浆流量减少，另一方面，根据微循环的血力学，毛细血压的高低取决于毛细前阻力和毛细后阻力的比值，比值增大时毛细血压降低2。由于入球小动脉收缩比出球小动脉明显，使得肾小球毛细血压下降，肾小球的有效滤过压下降，从而肾小球滤过率降低，尿量减少。4.5 静脉注射对尿量和血压的影响静脉注射后，家兔主要表现为尿流量显著增加，血压略有升高但变化不大。因为（又称速尿）是一类高效能利尿药，可与髓袢升支粗段 Na+-K+-2Cl-共同转运系统可逆性结合，抑制其转运能力，使髓袢升支粗段对NaCl 的重吸收减少，小管液渗透压增高，降低肾脏的稀释功能；同

17、时使髓质间隙渗透压降低，使肾脏的浓缩功能降低，从而产生迅速而强大的利尿作用。此外，速尿可扩张肾，增加肾血流量，进一步增大尿量3。由于速尿对心脏没有激动或抑制作用，故血压不发生明显变化。4.6 静脉注射垂体后对尿量和血压的影响静脉注射垂体后导致家兔尿流量显著减少，血压降低。因为垂体后内含抗利尿激素和催产素，抗利尿激素可以作用于集合管上皮细胞上的V2 受体，被激动后可通过兴奋性 G 蛋白使细胞内c增加，然后通过蛋白激酶A 使胞质内的水孔蛋白 2顶端膜形成水通道，增加水的重吸收而使尿量减少2。其次，垂体后能使内髓集合管对尿素通透性升高，肾髓质间隙液的渗透压升高，肾小管重吸收水增加，从而使尿量减少。抗

18、利尿激素21 受体，具有很强的收缩平滑肌效应，产生升压作用 。但本实还作用于平滑肌的 V验中血压明显降低，这是由于收缩使冠脉收缩过度，引起心肌缺血，从而血压下降。生理浓度下抗利尿激素一般不引起血压升高，这是因为抗利尿激素能提高压力感受性反射的敏感性，其加压作用能立即被降压反射纠正，整体表现为血压降低。4.7 静脉注射酚红的影响静脉注射酚红后 4min，家兔的尿液呈现粉红色，即出现酚红。由于酚红是一种无毒指示剂，进入血液后，与血液中的白蛋白结合，仅 6 %由肾小球滤过排出，94 %由近上皮细胞主动吸收，从尿中排出2。又因为家兔为食草动物，尿液呈碱性，酚红遇碱性尿液呈现红色。5.结论注射生理盐水、葡萄糖和，能使家兔尿量增加，血压升高；电刺激迷走神经和注射垂体后使家兔尿量减少，血压下降；注射去甲肾上腺素使家兔尿量减少，血压升高；酚红能指示肾脏的排尿速度。6.参考文献1生理科学实验（第二版）杭州浙江大学2010:233-2342主编生理学（第二版）人民卫生2010: 337-3603主编药理学（第二版）人民卫生2008:281-282附录表 1. 不同处理下家兔尿流量与血压变化情况平均收缩压平均舒张压平均动脉压处理尿流量（滴/min）（mmHg）（mmHg）（mmHg）静脉注射生处理前4.5104.