C-反应蛋白测定试剂盒胶体金免疫层析法产品技术要求

1、 医疗器械产品技术要求编号：C-反应蛋白测定试剂盒(胶体金免疫层析法）1.产品型号/规格及其划分说明1.1 规格10/20/50人份。1.2 组分每盒含10/20/50人份试纸条和1份说明书和样品缓冲液(0.1mol/L 的Tris-HCl缓冲液，pH值7.0)。每人份试纸条包括1份检测卡、1支滴管和1包干燥剂。定量检测卡由样品垫、硝酸纤维素膜（T线包被鼠抗C-反应蛋白单克隆抗体；C线包被羊抗鼠多克隆抗体）、金标垫（包被胶体金标记的鼠抗C-反应蛋白单克隆抗体）、吸水纸、塑料载板组成。2. 性能指标2.1 物理性状2.1.1 外观测定试剂应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；材料附着牢固；标签字迹

2、清晰，无破损。2.1.2 膜条宽度测定试剂的膜条宽度2.5mm。2.1.3 液体移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min。2.2 空白限空白限应不高于0.5g/mL。2.3 精密度2.3.1 批内精密度批内精密度CV(%）应不高于12.0%。2.3.2 批间精密度批间精密度R（%）应不高于15.0%。2.4 线性范围在0.5g/mL，150g/mL的范围内，线性相关系数应不低于0.990。2.5 准确度回收率应在85%115%之间。2.6 分析特异性含浓度不低于150mg/L C-反应蛋白的零浓度C-反应蛋白样本，检测结果不高于0.5g/mL。2.7 稳定性将测定试剂在430的环境中放置

3、18个月后，取样分别检测2.1、2.2、2.3.1、2.4、2.5、2.6项，结果应符合各项目的要求。3. 检验方法3.1.1 外观随机取一支测定试剂，自然光下目视观察，应符合2.1.1的要求。3.1.2 膜条宽度用游标卡尺（精度为0.05mm）随机检测两支测定试剂，计算两次检测结果的平均值，测定结果符合2.1.2的要求。3.1.3 液体移行速度取两支测定试剂，按说明书进行操作，从测定试剂加入空白对照液开始用秒表计时，直至空白对照液达到硝酸纤维素膜与吸水纸交界线时停止计时，所用的时间记为（t），用游标卡尺测量样品垫、金标垫和硝酸纤维素膜的总长度记为（L），则计算L/t即为移行速度，重复测量2支

4、测定试剂，求平均值，测定结果应符合2.1.3的要求。3.2 空白限取同一批号的C-反应蛋白测定试剂20支，按厂家说明书操作检测空白对照液，计算结果的平均浓度（）和标准差（S），空白限为+2S，结果应符合2.2规定。3.3 精密度3.3.1 批内精密度取同一批号的C-反应蛋白定量检测试剂30支，按厂家说明书操作检测浓度为3g/mL0.3g/mL和50g/mL5g/mL和100g/mL10g/mL的C-反应蛋白测定样品液，每个浓度各检测10次，分别计算测定结果的平均浓度（）和标准差（S），按照公式（1）计算变异系数（CV），其结果应符合2.3.1规定。其中xi为10次测量值之和，n为测量次数。3.

5、3.2 批间精密度取三个批号的C-反应蛋白测定试剂，按厂家说明书操作检测浓度为3g/mL0.3g/mL和50g/mL5g/mL 的C-反应蛋白测定样品液。样本用每个批次的产品至少重复测定三次，求平均值。按照公式（2）计算相对极差（R%），其结果应符合2.3.2规定。其中R为相对极差，为测量结果的最大值，为测量结果的最小值，为测量结果的算术平均值。3.4 线性范围将接近线性范围上限的高值样本按一定比例稀释为至少5种浓度，其中低值浓度的样本须接近线性范围的下限，每个浓度检测3支，记录各浓度水平的测量结果，并计算各浓度水平三次测量值的平均值（），以浓度值（）为自变量，以测定结果均值（）为因变量求出线

6、性回归方程。按公式（2）计算线性回归的相关系数（），其结果应符合2.4规定。其中为5个浓度值的平均值；为测量值的平均值。 （3）3.5 准确度在380L的正常人血清样本中，加入20L标准溶液（用新生小牛血清将C-反应蛋白纯品（购自 HYPERLINK /link?url=xYw2fEudnKMseyvCvXkkIL3F_rJTqh-Hm1hmW9PwewO t /_blank 杭州启泰生物技术有限公司）配制成1mg/mL的标准溶液），配制成测定样品液。取同一批号的C-反应蛋白测定试剂3支，按厂家说明书操作检测测定样品液，重复测定3次,按照公式（4）计算纯品回收率，其结果应符合2.5规定。 （4

7、） 式中：R回收率； V加入标准液体积； V0人血清样品的体积； C 人血清样品加入标准液后的测定浓度； C0人血清样品的测定浓度； Cs标准液的浓度。3.6 分析特异性取1份C-反应蛋白含量为零的样本，添加C-反应蛋白，使样本中C-反应蛋白的浓度不低于150mg/L，使用C-反应蛋白测定试剂对样本进行检测，测定样本中C-反应蛋白的含量，结果应符合2.6规定。3.7 稳定性将测定试剂在430环境中放置18个月后，分别检测2.1、2.2、2.3.1、2.4、2.5、2.6项，结果应符合各个项目的要求。4. 术语无 附录C-反应蛋白测定试剂盒（胶体金免疫层析法）校准品的溯源说明1.1 基本情况说明

8、采用普迈德（北京）科技有限公司的校准品作为测定试剂的测定样本。普迈德（北京）科技有限公司采用的校准品能够溯源到C反应蛋白(CRP)定量检测试剂盒(胶体金法)（天津中新科炬生物制药有限公司）。普迈德（北京）科技有限公司的校准品是用著名抗原抗体生产商启泰公司生产的纯品配置的（纯品浓度：2.4mg/ml、目录号：CRP01）。校准品采用浓度为150g/mL、100g/mL、50g/mL、10g/mL、0.5g/mL的纯品。2 企业标准品的溯源及验证2.1 企业校准品的溯源2.2 企业校准品的初赋值用C反应蛋白(CRP)定量检测试剂盒(胶体金法)（天津中新科炬生物制药有限公司）检测用纯品配置成的150

9、ug/ml的样品测定液，测定6次取其平均值作为150ug/ml C-反应蛋白纯品的校准值。然后根据150ug/ml C-反应蛋白纯品的校准值将该浓度的纯品分别稀释成校准值为150g/mL、100g/mL、50g/mL、10g/mL、0.5g/mL的校准品。将用CRP配制好的5种校准品各取1支，用C反应蛋白(CRP)定量检测试剂盒(胶体金法)（天津中新科炬生物制药有限公司）测定，每个样品平行测定三次求平均值。测定完成后，按公式（1）计算工作校准品标示浓度和西门子BNPRO测定浓度的偏差，偏差应小于15%，并计算各浓度水平三次测量值的平均值（），以校准值（）为自变量，以测定结果均值（）为因变量求出

10、线性回归方程。按公式（2）计算线性回归的相关系数（）且相关系数R应大于0.975。可认为配制的工作校准品无误，此工作校准品可以用于对人血浆赋值和制备产品的标准曲线。相对偏差（%）=校准值-/校准值100% （1）（2）2.3 企业校准品的修订选择C反应蛋白高中低值的血清40份，用C反应蛋白(CRP)定量检测试剂盒(胶体金法)（天津中新科炬生物制药有限公司）定量测定系统检测选定的40份血清，然后用本公司校准品校准的测定试剂检测选定的40份血清，按公式（3）以天津中新科炬的结果为自变量()，以本公司的测定结果均值为因变量()求出线性回归方程和线性相关系数r,。两组数据的相关系数应大于0.975方可确认计量学上溯源的有效性。（3）2.4 企业校准品的验证重复2.2和2.3，直至线性回归方程的线性相关系数大于0.975，按照公式(5)计算其不确定度U，不确定度范围在8%范围内，则符合要求。说明校准品赋值完成。(5)式中：对比试剂盒的真值； X本公司试剂盒的值； n测试的次数。3 产品二维码的制作用普迈德生产的C-反应蛋白测定试剂盒检测本公司校准值为150g/mL、100g/mL、50g/mL、10g/mL、0.5g/mL的校准品，每个浓度重复检测6次。将每个浓度测定结果的峰