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1、Word文档 自诱导TB培养基Terrific BrothAutoinductive Terrific Broth产品基本信息 产品名称：自动诱导TB培育基；自动诱导超级肉汤英文名称：Autoinductive Terrific Broth；Terrific Broth - Auto Induction Medium培育基类型：加富培育基级别：for microbiology品牌：GRiSP产品名目号：GCM19.0500产品规格：500g产品外观：米色均一粉末。灭菌后颜色与澄清度：琥珀色透亮溶液。保存条件：密封，2-25C保存。留意事项：避开摄入、吸入、皮肤接触。 产品描述： 自动诱导超级肉

2、汤(Autoinductive Terrific Broth)也称自动诱导TB培育基，用于Lac启动子驱动的大肠杆菌重组蛋白表达，无需添加IPTG。自诱导TB培育基能够获得高细胞密度，蛋白表达率高出IPTG诱导过程好几倍。 工作原理： Terrific Broth 由LB培育基改进而来，目的是获得高密度细胞。E. coli在该培育基中生长速度快于其在LB培育基或 2x YT肉汤中的生长速度。使用TB培育基还可以获得高产量质粒DNA和重组蛋白。 通常，外源蛋白在细菌中表达时常使用IPTG诱导的启动子，如Lac启动子。当细胞密度达到抱负值时，通过向培育基中加入IPTG的方法诱导蛋白表达。使用这个自

3、动诱导培育基，不再需要监测细胞密度和添加IPTG。葡萄糖作为半乳糖操纵子的阻遏因子阻挡细菌利用-乳糖，而被优先代谢，促进高密度生长。一旦培育基中的葡萄糖被耗尽（通常发生在对数期的后期），乳糖被-半乳糖苷酶转换成异乳糖（葡萄糖-1,6-半乳糖），而后者作为IPTG诱导型启动子的诱导剂，引起乳糖阻遏子从与DNA结合的位点上释放，启动重组蛋白的表达。对于DE3基因型的E.coli中，异乳糖使T7lac启动子去阻遏，并诱导lacUV5启动子表达T7 RNA聚合酶。通过这种方式，在细菌培育物生长到某一特定点时蛋白表达自发开头，去掉了监测细胞密度（OD600）和添加IPTG这两个步骤。与传统IPTG诱导的蛋白表达过程相比，使用自动诱导培育基极大地便利和简化了试验流程。另外还便于多克隆分析，如蓝白斑筛选。该培育基中含有抱负比例的葡萄糖和-乳糖作为碳源和能量来源。胰蛋白胨供应氮源、维生素、矿物质和氨基酸，这些养分成分是细胞生长所必需的。酵母提取物是丰富的B族维生素来源。Studier salts为细菌细胞的生长供应最佳的生理环境。 配方与配制方法 Tryptone12.0 gYeast Extract24.0 g-乳糖2.0 g葡萄糖0.5 gStudier盐17.05 gFinal pH7.0 0.2 1. 称取55.55g 脱水培育基粉末，用1L去离子水加热溶解。2. 煮沸1min。3.

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