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文档简介

1、实验八叶绿体中色素的提取和分离教学目的 初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 探索叶绿体中有几种色素 。实验原理 叶绿体中的色素能溶解在丙酮( 有机溶剂 , 酒精 、 汽油 、 苯 、 石油醚等 ) 中 , 所以用丙酮可提取叶绿体中色素。 色素在层析液中溶解度不同 , 溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢, 因而可用层析液将不同的色素分离。实验程序) 称取 5g 绿色叶片并剪碎提取色素) 加入少量 sio2 、 caco3 和 5ml 丙酮 收集到试管内并塞紧管口) 将干燥的滤纸剪成6cm 长 , 1cm 宽的纸条 , 剪去一端两角

2、( 使层析液同时到达滤液细线 )制滤纸条) 在距剪角一端1cm 处用铅笔画线) 用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线滤液划线 TOC o 1-5 h z ) 干燥后重复划2-3 次1 ) 向烧杯中倒入3ml 层析液( 以层析液不没及滤液细线为准)纸上层析 ( 2 ) 将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁, 轻轻插入层析液中3 ) 用培养皿盖盖上烧杯观察结果 : 滤纸条上出现四条宽度、 颜色不同的彩带( 如下图 )最宽: 叶绿素a ;最窄: 叶绿素b ;相邻色素带最近: 叶绿素 a 和叶绿素 b ;相邻色素带最远 : 胡萝卜素和叶黄素。实验关键如菠菜叶 、 棉花叶 、 洋槐叶等 。

3、 选材时应注意选择鲜嫩、 色浓绿 、 无浆汁的叶片 画滤液细线时, 应以细 、 直 、 颜色浓绿为标准, 重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行 , 重复 2-3 次 。 层析时不要让滤液细线触及层析液。注意事项 因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂 , 所以研磨要快, 收集的滤液要用棉塞塞住 , 层析时要加盖, 尽量减少有机溶剂的挥发 。 在研磨时要加少许二氧化硅 , 目的是为了研磨充分 , 有利于色素的提取 ; 加少许碳 酸钙 TOC o 1-5 h z 的目的是为了防止研磨过程中 , 叶绿体中的色素受到破坏。 分离色素时, 一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液, 这是因为色素

4、易溶解在层析液中 , 导致色素带不清晰, 影响实验效果。【 同类题库 】 下列哪一种液体不能作为叶绿体中色素提取液?( c )a 丙酮溶液 b 酒精溶液 c 水溶液 d 汽油 在叶绿体中色素的提取与分离实验中 , 扩散速度最快的色素是( d )a 叶绿素 ab 叶绿素 b c 叶黄素 d 胡萝卜素 将菠菜叶表皮细胞和人的口腔上皮细胞制成装片 , 从盖玻片一侧滴入 30%的蔗糖溶液, 另一侧用吸水纸重复吸收几次, 分别放在显微镜下观察, 其结果是 (d)a 前者发质壁分离, 后者也发生质壁分离b 前者发生质壁分离, 后者破裂c 前者发质壁分离, 后者质壁分离复原d 前者发生质壁分离, 后者皱缩

5、如果没有丙酮和菠菜叶, 要保证分离后色素带清晰, 可以用来替代的最佳实验材料是(a)a 酒精和麦苗b 酒精和大白菜c 蒸馏水和大白菜d 蒸馏水和麦苗 用韭菜做“叶绿体色素的提取和分离实验” , 下列不能用作提取剂的是( a )a 水 b 丙酮 c 酒精 d ccl4 为了提取绿色植物叶绿体中的色素, 在研磨绿叶时加入少许碳酸钙 , 其作用是 ( b )a 调节 ph , 加速色素溶解b 调节 ph , 防止叶绿素被破坏c 使绿叶研磨充分d 有利于四种色素的分开 在研磨绿叶时, 下列哪种物质不需要加入 ( b )a 丙酮b 层析液 c 碳酸钙d 二氧化硅( 多选 ) 某学生在做“叶绿体色素的提取

6、和分离实验” 时 , 收集到的滤液呈淡绿色, 其原因可能是( ac )a 叶片较老较黄b 加入的二氧化硅多了些c 研磨不充分d 漏斗基部塞的脱脂棉多了些 做色素提取和分离实验的正确装置是图中 ( d ) 在进行叶绿素提取和分离实验时, 不能让层析液没及滤液细线的原因是( c )a 滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实验结果b 滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散c 色素会溶解在层析液中而使结果不明显d 滤纸条上几种色素会混合起来 某人做叶绿体中色素分离实验时, 使用的是圆形滤纸, 装置如下图 。 实验结束时在圆形滤纸上形成四个同心色素圆环, 则最内圈所呈颜色为 ( d )a 橙黄色b 黄色c

7、蓝绿色d 黄绿色 叶绿体中色素经层析后, 出现在滤纸上扩散最宽的色素带是( a ), 最窄的色素带是 TOC o 1-5 h z ( c ), 最整齐的色素带是( c )a 叶绿素 ab 叶绿素 b c 胡萝卜素 d 叶黄素 叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分离开的原因是( c )a 色素提取液中的不同色素已分层b 阳光的照射使不同的色素彼此分开c 滤纸对各种色素的吸附力不同 d 丙酮酸使色素溶解并彼此分离的扩散速度不同 在叶绿体色素的提取和分离实验中 :( 1 ) 研磨绿叶时为防止叶绿素被破坏而加入 caco3 的原理是。( 2 ) 定性滤纸进行干燥处理的目的是。( 3 ) 对滤纸剪去两角的目的

8、是。( 4 ) 所画滤液细线越细越齐越好, 这样可避免 以取得较好的分离效果。( 5 ) 层析装置加盖的目的是。( 6 ) 滤纸条上色素带最宽的颜色是, 相邻色素带间距离最近的是与 。 (12 ) 使层析液在滤纸条上均匀扩散( 3 ) 使层析液同时到达滤液细线( 4 )( 5 ) 避免层析液挥发影响效果并引起中毒 ( 6 ) 蓝绿色 ; 叶绿素 a ; 叶绿素 b 某同学在做 “叶绿体中色素的提取和分离” 实验时 , 操作情况如下所述, 结果实验失败, 请指出其错误所在 :(1 ) 将 5 克新鲜菠菜剪碎后 , 放入研钵中 , 加入酒精 、 石英砂后 , 迅速研磨 。( 2 ) 用毛细吸管吸取

9、少量滤液, 沿铅笔细线小心均匀地划出一道滤液细线 , 并连续迅速地重复划 2-3 次 。3 ) 把划好细线的的滤纸条插入层析液中并不断振荡, 以加快层析液在滤纸条上的扩散。 ( 1 ) 未加碳酸钙 , 叶绿素可能会被破坏( 2 ) 划滤液细线时, 不能连续迅速地重复划2-3 次 , 要待干后才能划第二次, 同样划第三次( 3 ) 层析时不能振荡烧杯 , 这样会使滤液细 TOC o 1-5 h z 线上的色素部分溶解到层析液中 , 使色素带不清晰 分别在 a 、 b 、 c 三个研钵中加入 2 克剪碎的新鲜菠菜绿叶, 并按下表所示添加试剂 ,经研磨 、 过滤得到三种不同颜色的溶液, 即 : 深绿

10、色 、 黄绿色 ( 或褐色 ) 、 几乎无色 。试回答 :( 1 ) a 处理得到的溶液颜色是, 原因是 。( 2 ) b 处理得到的溶液颜色是, 原因是。( 3 ) c 处理得到的溶液颜色是, 原因是。 ( 1 ) 黄绿色 ( 或褐色 ); 部分叶绿素受到破坏( 2 ) 几乎无色 ; 叶绿素不溶于水( 3 )深绿色 ; 大量叶绿素溶于乙醇中 篇二 : 清华大学普通生物学实验报告模板叶绿体色素的提取 分离 、 理化性质普通生物学实验报告实验名称: 叶绿体色素的提取分离、 理化性质 TOC o 1-5 h z 实验原理:1 、 提取色素 : 叶绿体色素不溶于水, 常用有机溶剂提取 。 本实验采用

11、乙醇提取。2 、 分离色素 : 本实验采用层析法。 溶剂通过毛细管作用浸润薄层板, 带动色素向上移动, 由于吸附剂对不同的色素吸附能力不同 , 吸附力强的色素相对移动要慢一点 , 各组分有不 同的移动速度而彼此分开。3 、 h+ 和 cu2+ 对叶绿体中 mg2+ 的取代作用 : 叶绿素中镁可被h+ 取代 , 形成褐色去镁叶绿素 , 去镁叶绿素遇铜生成铜带叶绿素 。4 、 光的破坏作用 : 叶绿素化学性质不稳定, 易受强光破坏, 而类胡萝卜素较稳定 。5 、 皂化作用 : 叶绿素是由叶绿酸和甲醇与叶绿醇形成的酯, 故可与碱发生皂化反应 , 生 TOC o 1-5 h z 成甲醇和叶绿醇及叶绿酸

12、盐, 叶绿酸盐溶于水。 此法可将叶绿素与类胡萝卜素分开。6 、 荧光现象 : 叶绿素吸收光量子转变为激发态, 激发态分子不稳定 , 变回到基态时发射出红光量子, 产生红色的荧光。实验仪器和材料:、 新鲜的菠菜叶片 。、 乙醇 ( 体积分数95%) 、 碳酸钙粉末、 展开剂 ( 石油醚 : 丙酮 : 苯=7:5:1, 体积比)。、 天平 , 研钵 , 漏斗 , 滤纸 , 三角瓶 , 剪刀 , 点样毛细管, 层析缸 , 硅胶预制板。、 小试管 , 试管架 , 水浴锅 , 10 毫升移液管。、 蒸馏水 , 苯 , 稀盐酸 ( 质量分数 5%), 醋酸 - 醋酸铜溶液, 氢氧化钾 - 甲醇溶液 。实验

13、步骤 :理化性质 :1 、 色素分离较明显、 叶绿素 a、 叶绿素 b 、 叶黄素 ( 如图。、 研磨时加入碳酸钙粉末可以减少叶片中色素的破坏。 铜代叶绿素较稳定, 故可以用 TOC o 1-5 h z h+和cu2+来制取绿色植物浸渍标本。、 实验过程中叶绿体色素的提取实验中 , 只要有几滴滤液滴下, 就可以做分离实验, 叶绿体色素的理化性质中 光的破坏作用”、“h拜口 cu2+对叶绿体中mg2+的取代作用”这两个实 验可以较早地进行, 从而缩减实验等待时间 , 提高实验效率。、 叶片加入醋酸- 醋酸铜溶液90c水浴加热的实验现象不明显, 可能的原因是, 在加入水浴后没有及时拿出并观察到叶片

14、变成黄色的现象, 以至于叶片前后颜色对比不明显。、 光对叶片的破坏作用我们组的实验现象并不明显 。 可能的原因如下: 天气多云 , 光照不是很强烈; 静置时间稍短, 有些叶绿素还没有被破坏。、 实验综合感想:这一次的实验总体比较顺利 , 剪叶片 、 研磨 、 画线 、 点样 、 层析 ? 可能因为高中做过一次叶绿素的提取与分离的实验, 当时用的是纸层析的方式, 这一次实验与上一次相比 , 由于支持物的不同 , 分离出了六条色素带, 比上一次多了两条, 说明叶绿素提取液中的色素种类是十分多而复杂的, 老师说更高级的分离还可以看到更多的叶绿素带, 感觉世界好奇妙。 实验中 ,最感到新奇的是荧光现象

15、的实验, 在试管两侧居然能够看到完全不同的色彩, 我和恬缘都觉得真是十分神奇。实验过程中 , 也遇到了两人合作不力我把恬缘的皂化反应的液体当成废液倒掉导致重做的问题 , 但是我们的层析一次成功大大缩短了实验时间 , 除了 90 c 水浴的实验需要时间较长来不及重新实验和天公不作美光照不是很给力以外, 其余实验都得到了比较满意的结果。 收货颇丰 。 最后 , 感谢老师和助教在实验过程中给予我们的帮助 !附 : 图片图1 图2 图3图4 图5图6图 7 图 8 篇三 : 绿叶中色素的提取和分离的实验报告绿叶中色素的提取和分离的实验报告一 、 实验目的 1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法 。 2. 比较 、 观察叶绿体中四种色素 : 理解它们的特点及与光合作用的关系二 、 实验原理 光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上, 而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂 中 。 故要提取色素, 要破坏细胞结构, 破坏叶绿体膜, 使基粒片层结构直接与有机溶剂接触 , 使色素溶解在有机溶剂中 。 叶绿体中的色素有四种, 不同色素在层析液( 脂溶性强的有机溶剂 ) 中的溶解度不同 , 因而随层析液的扩散速度也不同 。三 、 材料用具 取新鲜的绿色叶片 、 定性滤纸 、 烧杯 、 研钵 、 漏斗 、 纱布 、 剪刀 、 小试管、 培养皿 、 毛细吸管 、

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