高通量测序培训班3-高通量测序在遗传性疾病检测中的应用与进展

1、18/5/15人类疾病分类染色体病：染色体数目或结构异常所致的疾病称为染色体病。通量测序在遗传性疾病检测中的应与进展单基因病：由于单个基因的突变而引起的遗传病。由于单基因病的发生基本上受一对等位基因控制，故又称孟德尔遗传病。人类遗传性疾病获得性疾病（不会遗传）多基因病：受多个微效基因和环境因素共同影响的疾病，又称多因子病或复杂疾病。夏 昆中南学命科学学院线粒体遗传病：线粒体DNA突变可以引起的人类疾病。复杂疾病单基因病Duchenne肌营养不良症（假性肌肥大型）多基因病染色体病John Forbes Nash 著名数学家；1994年诺贝尔经济学奖得主；博弈论创始人之一凡高和他的向日葵唇裂与腭裂

2、遗传学研究三大里程碑遗传 因 素染色体病单基因病环境 因 素1953年 发现DNA 双螺旋2003年哮喘、精神分裂症糖尿病、唇裂完成HGP计划高血压脊柱裂2005年 启动国际人类单体型图计划消化性溃疡先天性心脏病结核病传染病坏血病认识人类疾病的遗传学基础成为可能物理、化学因素损伤118/5/15遗传和基因组学对医学的影响 2009，基因组医学（Genomic Med） 2011，精准医学（Precision Med）疾病的负担和复发监控孕前和产前诊断预后和治疗决策基因组学循证医学向精准医学的转变疾病的易感性筛查和诊断新生儿筛查Calzone, et al. (2013)基因结构变化遗传变异：遗

3、传和基因组学对生命周期的管理DNA SequenceDNA 序列n 单个碱基的变异 点突变 、单核苷酸多态性 (SNPs)孕前和产前筛查Single base-pair changes point mutations 、SNPs (Single生命结束后管理新生儿筛查Nucleotide Polymorphisms: 3Mb diff. between any two genomes; 0.1%)n 小片段的插入/缺失 移框突变，微卫星.Small insertions/deletions frameshift, microsatellite, minisatellite.n Mobile e

4、lementsretroelement insertions (300bp -10 kb)n 较大片段基因组变异（重复、缺失、扩增）生命末期管风险预测理Large-scale genomic variation /Deletions and Amplifications(10 kb)合适的时间给病合适的筛查，诊断和治疗n基因组拷贝数变异(CNVs)个体化医疗筛查与诊断Segmental Duplications /deletions/ CNVs (Copy Number Variation, Upto 15Mb diff. between any two genomes, 3%)疾病分型Cyt

5、ogeneticsn 染色体变异 易位、倒位、融合基因.细胞遗传学Calzone, et al. (2013)Chromosomal variationtranslocations、inversions、fusions.什么是点突变、小片段插入缺失？一、基于高通量测序检测点突变、小片段插入缺失218/5/15测序技术概况第二代测序第代测 1977年，Sanger测定了第个基因组序列2001年， HGP就是以Sanger测序为基础第代测序具有通量、准确性、灵敏度、动化程度和低运成本等优势适用于少量样品的单个基因测序，测序于分析成本很高，无法大规模应用。Genome SequencingTG.GT

6、TC.CCCG.CA随着二代测序技术的AC.GCTT.TCAC.GC GA.GCTG.ACCT.TGGT.GCAC.GCAC.GCAA.GC AT.ATTT.CC发展，外显子捕获等靶向捕获技术快速发展。GenomeShort fragments of DNAShort DNA sequencesACGTGGTAACGTATACACTAGGCCATAACGTGACCGGTACTGGTAACGTACACCTACGTGACCGGTACTGGTAACGTACGCCTACGTGACCGGTACTGGTAACGTATACACGTGACCGGTACTGGTAACGTACACCTACGTGACCGGTACTG

7、GTAACGTACGCCTACGTGACCGGTACTGGTAACGTATACCTCT.GTAATGGCGTGGCGTATACACCCTTAGCATAACGTGGTAATGGCGTATACACCCTTAGGCCATASequenced genome全外显子测序数据分析全基因组测序数据分析Leslie G. Biesecker, et al. N Engl J Med 2014Leslie G. Biesecker, et al. N Engl J Med 2014318/5/15点突变、结构变异的检测数据分析标准流程BWAGATKANNOVARAccuracy rate:SNVs: 98%;I

8、nDels (1-3 bp): 95%;InDels (4-15 bp): 90%;InDels (15-50 bp): 85%;Grimm D, Hagmann J, Koenig D, et al. Accurateindel prediction using paired-end short readsJ.BMC genomics, 2013, 14(1): 132.418/5/152010年采芯定位+外显组测序技术克隆共济失调致病基因TGM6遗传性脊髓小脑性共济失调（SCA）亚型致病基因的定位与克隆发病年龄较晚，40-48岁，平均43.70 2.90岁病情进展缓慢，没有遗传早现现象小脑

9、性共济失调表现，头部MRI为小脑萎缩伴明显锥体外系表现，如痉挛性斜颈排除所有已知SCA基因突变一个四代常染色体显性遗传的SCA大家系(CS家系)新一代测序鉴定致病基因的研究策略遗传病家系Yes已知基查No小家系系分析测序家系共在其他家系先证者发现新的验证发患者中筛查基因序SNPs和STR连锁分析将该SCA家系的致病基因定位于20p13-12.2，18.45cM(8.4Mb) ，91个候选基因518/5/15四位患者全外显子组重测序平均深度和模深度分布CS家系内四名患者外显子重测序高级生物信息分析结果Sample III:6(Whole/Locus)Sample III:7(Whole/Locu

10、s)Sample III:17(Whole/Locus) (Whole/Locus)Sample IV:1FilterNS/SS/ Indel5796/34869/65649/40734/95780/40931/85842/37891/8III:6III:7IV:1Not in dbSNP 129 Not in dbSNP 129, nor ineight HapMap exomes 616/6520/6674/7661/7Not in dbSNP 129, eightHapMap exomes, nor indbSNP thousandsgenome309/4211/1262/3203/13

11、41/6214/1384/5212/1III:17Mean Depth: 65.10Predicted to be damagingTGM6基因L517W突变位置及Sanger测序验证TGM6基因在另外一个家系（LY）D327G的突变孤独症（自闭症）：严重影响儿童健康神经发育障碍疾病 孤独症谱系障碍（Autism Spectrum Disorders） 1943年美国儿童精神病学家Kanner首次报道二、以孤独症为例阐述高通量测序在复杂遗传性疾病检测中的应用与进展 核心症状：社会交往障碍、狭隘兴趣和重复刻板行为（DSM-V）。 起病年龄：儿童发育早期（4.4万/年l终身社会负担：350万美元(

12、美国)和200万英镑(英国) 重度患者造成终身残疾，轻度患者成年后可能出现情绪障碍和反社会行为ll美国弗吉尼亚理工大学枪击案(ASD)美国桑迪胡可小学枪击案赵承熙亚当兰扎临床异质性高、表型复杂，伴多种发育和精神症状等Co-occurringconditionsDevelopmentalIntellectualdisabilityLanguagedisordersADHDProportionCo-occurringconditionsGeneticsyndromesSleepdisordersPsychiatricProportion5%45%5080%Variable2844%1438%Anx

13、iety4256%1270%TicdisordersDepressionMotorabnormality79%Obsessive-compulsivedisorder724%GeneralmedicalEpilepsyPsychoticdisorders1217%16%1628%45%830%970%38%SubstanceusedisordersOppositionaldefiantdisorderEatingdisordersGIproblemLai et al. Lancet2014Immunedysregulation 无客观诊断标准、无有效治疗，早诊断、早预警、早干预至关重要718/

14、5/15国际对ASD的研究重视程度越来越高孤独症是全球性的公共健康问题! 患病率急剧上升l 美国：1.47% (CDC, 2014)2007年12月18日，联合国确立每年的4月2日为世界孤独症日。这是继“世界爱滋病日”之后联合国确定的第2个疾病日l 英国：1.13-1.57% (Simon BJP. 2009)l 韩国：2.6% (Kim et al. AJP. 2011)l 全球：1% (Elsabbagh Aut Res. 2012)What causes autism?Lai et al. Lancet2014 全球患者数6700万 儿童患孤独症人数超过儿童癌症、糖尿病、艾滋病三者的总和

15、孤独症的病因被Science杂志列为当前人类125个问题之一我国的现状：孤独症的病因和病理机制不明l 1982年开始报道孤独症（南京医科大学陶国泰）l 缺乏广泛和系统的流行病学调查n病因复杂，遗传因素的作用超过90%l 基础研究稳步提高，部分领域逐渐与国际接轨群体患病率同胞患病率异卵双同病致率同卵双同病致率l 我国预计有约220万患儿l 我国儿童精神残疾之首l 抢救价值最大，早期干预效果好n 其他因素：6.73-5%3-10%60-80%l 表观遗传：MeCP2等l 环境因素：孕期压力、飓风、噪音、父母亲生育年龄、神经生化毒素、感染和免疫、围产期病变、孕期用药以及早产等全基因组相关研究(GWA

16、S)Genome wide association study孤独症与两个染色体区域中常见变异相关全基因组关联研究发现1p13.2与孤独症显著相关l CDH9 和CDH10 基因之间的6 个SNPs 达到基因组显著性水平l SEM5A基因附近3个SNPs达到基因组显著性水平IlluminaChipsAnalysisMethodsCohortsAnalysisDesignSubjects TriosSKLMGtrios GWASFamilyBased 370K825270-TDTLogisticregressionSKLMGccGWASCase-control 370K/610K 1120AGR

17、ESFARIAGPMeta-analysis FamilyBased 550KMeta-analysis FamilyBased 1MMeta-analysis FamilyBased 1M11772067975285698TDTTDT5p14.15p15.2Laurenetal.NATURE2009&WangKetal.NATURE20093X2i5a et al. MTolDPTsychiat，2014818/5/15Common variants at 1p13.2 were replicated in three European cohortsRiskhaplotypesinvolv

18、edAMPD1,CSDE1,NRASandTRIM33genes1p13.2区域的常见变异同中国孤独症儿童发病相关hap2hap1hap31p13.2Xia et al. Mol Psychiatr 2014Xia et al. Mol Psychiatr 20143个单体型累及的SNPs影响脑组织mRNA表达水平，并且CSDE1，NRAS和TRIMM33在孤独症和正常对照脑尸解脑中表达水平存在显著差异。Contribution of de novo coding mutations to autism spectrum disorder多个变异影响脑mRNA表达(eQTLs)Caucasia

19、n (n=109)DSCAM, CHD2,ADNP,KDM6B, MED13L,NCKAP1,ANKRD11, DIP2A,TNRC6B,WDFY3, PHF2,WAC, KDM5B,RIMS1, FOXP1,GIGYF1, KMT2E,TCF7L2ProbesSource Type III SSMSFPANK2, ARID1B,ARID1B, CHD8,DYRK1A, GRIN2B,KATNAL2, POGZ,SCN2A,SNPs rs926938-rs8453-rs10489525 with AMPD1-NRAS-CSDE1NRASrs8453rs84531.00740.79950.503

20、70.39973.944.890.0223*0.0093*CSDE1.1TBR1CSDE1.1rs104895250.4323.29510.95510.2161.64750.47762.533.30.0843*0.0407*0.0993*CSDE1.2CSDE1.3rs8453rs8453ASCSSC2.36SNPs in the second haplotype with TRIM33TRIM33 rs7511633 0.44980.22490.22492.852.852.970.0625*0.0625*0.056*孤独症和正常脑差异表达TRIM33 rs66610530.4498Front

21、al cortexTRIM33rs111028000.46730.2337Autism(n=16)Control(n=16)TRIM33 rs1102807Est 0.4S7e2.10.23E61stSe. 30.05p43*NRASCSDE1.1BCAS29.915 0.0729.692 0.0608.670 0.0379.064 0.0378.243 0.0199.7120.0790.0463 *9.8518.7988.9588.2970.0650.0400.0410.0200.0570*0.0155 *0.0431 *0.0423 *TRIM33.1TRIM33.3Iossifov et

22、 al., Nature 2014Rubeis et al., Nature 2014夏昆课题组. Xia et al. Mol Psychiat，2014新发突变与罕见遗传变异Introduction of ASDTorre-Ubietaetal.NatureMedcine201620-30%5-10%3-5%5-10%Krummetal.NatureGenetics2015Gaugler et al. Nat Genet. 2014918/5/15高达50%的孤独症患者可以通过全基因组测序检测到致病变异JiangYHetal.AmJHumGenet.2013高通量测序发现部分孤独症双患家庭

23、携带相同的致病突变，部分双患家庭携带不同的致病突变，且表型出差异的临床表型Ryan K C Yuen et al. Nature Medicine 2015高通量测序可以有效发现孤独症致病基因候选捕获测序鉴定基因（孤独症为例）Molecular Inversion Probes (MIPs)Cost effective method for candidate resequencingADNPADSLCDKL5CHD1CTNNB1 DYNC1H1 GRIN2A MBD5CTTNBP2 DYRK1A GRIN2B MECP2PAX5PHIPSBF1SHANK3 TAF13SLC6A1 TBL1X

24、R1 TSC1SMARCC2 TBR1 TSC2TRIP12ZC3H4SCN1ASCN2AZMYND11ARID1B CHD2CHD8CNTNAP2 DDX3XBCL11A COL4A3BPDIP2ACUL3DDHD2 FOXP1GIGYF1 IRF2BPL NOTCH1 PPP2R5D SETD2FMR1HIVEP3 MED13L POGZIQGAP3 NFIAPPM1D SETBP1 SRGAP2 TCF7L2 UBR3They report sequencing of 5,205 samples from families with ASD identified 18 newcandid

25、ate ASD-risk genes. In 294 of 2,620 (11.2%) of ASD cases, a molecular basiscould be determined and 7.2% of these carried copy number variations and/orASH1LAUTS2ST3GAL6 TNRC18 VCPSTXBP1 TNRC6B WACGIGYF2 KATNAL2 NTNG1PROX2PTENSETD5189 genes included: De novo and rare LGD mutation with high effect size

26、chromosomal abnormalities.Ryan K C Yuen et al. Nature Neuroscience 2017CACNA1C CSMD1 DSCAM GRB10LAMC3NUAK1SH夏A昆NK课1题S组Y N.GWAPa1n gT RTIOet al. NYaTtHCDoC1m mun, 2017SCN2A和CHD8新发突变频率最高中国人群与欧美人群孤独症新发突变差异夏昆课题组. Wang T et al. Nat Commun, 2017夏昆课题组. Wang T et al. Nat Commun, 20171018/5/15整合新发突变和新发拷贝数变异结

27、果提示新的风险基因三、基于高通量测序检测拷贝数变异、结构变异及其在遗传性疾病检测中的应用夏昆课题组. Wang T et al. Nat Commun, 2017传统方法1：染色体核型分析1973年夏家辉率先在我国开展了“染体病的诊断与产前诊断”。1973年夏家辉率先在国内建了1971年Seabright发现的类染体G显带技术，在国际上创了75度烤法；相继建了Q带、C带、N带、LX、SCE技术和550-1000条带染体分辨技术。 病例07号： ，14岁，因体矮，1973年8 12 就诊。 染体检查：45, XO诊断为特纳综合征病例20号：7岁, 1974年722就诊, 平产。染体检查：47,

28、XX, +21诊断为21三体先天愚型1970年以前的染色体分析技术G显带技术与核型分析（1973年）1118/5/15传统方法2：基于比较基因组杂交芯片的方法 分型成千上万SNPs 发现基因拷数变异 基因拷贝数变异(CopyNumber Vriations)是指在人类基因组中广泛存在的，从1000bp碱基对到数百万bp范围内的缺失、插入、重复和复杂多位点的变异。 拷贝数变异”(CNVs)和“单核苷酸多态性”(SNPs)是人类表型变异的两个重要潜在来源。 Redon et al. Nature 200636/1800例患者携带染色体异常：2%拷贝数变异在人类基因组中广泛存在PIDSexKaryo

29、typesInheritanceBeadChipResultsl 270个个体;DELETIONORDUPLICATIONM8422male46,XY,12q?del(16)(q12.1-qter)denovonal 发现1,447个拷贝数变异B18274/M11409B30118/M16070B30123/M16084male46,XY,del(1)(p22.1-21.1)47,XXYdenovodenovodenovochr1:93416265-105648801(12.23M)malenafemale46,XX,?6p+(6q24.3-q27DUP)chr6:148602550-1704

30、69934(21.87M)chr18:61,038,861-78,015,180(16.976M)l 占人类基因组12%B55090/M26818RINGCHROMOSOMEB48029/M23053MARKERCHROMOSOMEM8145femalemale46,XX,?1846,XY,r(22)denovo Redon et al.Nature 2006denovochr22:50,856,222-51,304,565(4.48M,SHANK3)malemale47,XY,+mar47,XY,+mardenovodenovochr15:19157192-26194101(7M)idic(

31、15)chr15:19767013-30690437(10.9M)idic(15)chr15:20049770-30500698(10.5M)idic(15)B27571/M15042B30121/M16079B42485/M20070B44951/M21839male47,XY,+mar47,XY,+mar47,XX,+mardenovodenovodenovomalenafemalechr18:82,931-15,400,035(15.3M)BALANCEDCHROMOSOMALREARRANGEMENTSurprisingly！ Copy Number Variations affect

32、s 12 percent of the genome!M8736malemale46,XY,t(10;11)(q26;q23)46,XY,t(8;11)(q13;q21)unknownunknownresequencingmappingbreakpointsresequencingmappingbreakpoints much more than suspected !B48035/M23070B41040/M19604B30201/MD3696B48106/M23252B50310/M23688B23425/M8745B61206malemalemalemalemalemale46,XY,t

33、(3;12)(p13;q13)46,XY,t(4;8)(p16.3;p23.2)46,XY,inv(10)(q11.2q23)46,XY,t(8;16)(q24.3;q22)46,XY,inv(11)(p11.2q23)46,XY,t(6;10)(q13;q22)maternalpaternalmaternalpaternalpaternalpaternalresequencingmappingbreakpointsresequencingmappingbreakpointsresequencingmappingbreakpointsresequencingmappingbreakpoints

34、resequencingmappingbreakpointsresequencingmappingbreakpoints高通量测序特别是全基因组测序可以有效检测拷贝数变异、结构变异32 de novo or rare CNVs (1M) (6.2%)CNVstatusrecurrentRegionLength (bp)IIDInheritancecandidateGeneBandde novoN56 genes (including OLFM3)chr1:93416265-105648801chr5:80564-87232191p22.1-21.112,232,5378,642,65621,8

35、67,38515,273,9287,036,91010,923,42510,450,9295,913,1255,894,1011,391,3994,320,9691,150,040DelM11409M8820de novode novode novode novode novode novode novode novode novode novode novode novode novode novoN5p15.33-15.2Del55 genes (including SLC9A3)126 genes (including ARID1B)Nchr6:148602550-170469934 6

36、q24.3-q27DupDelM16084M9118N117 genes (including RP1L1/XKR6)chr8:791912-160658398p23.3-p22Y(5)Y(5)Y(5)Y(5)Y(5)Y(2)Nchr15:19157192-26194101chr15:19767013-30690437chr15:20049770-30500698chr15:20306549-26219673chr15:20314760-26208861chr15:26762141-28153539chr15:66041595-70362563chr16:32090048-33240087ch

37、r20:55665989-62426157chr22:46871209-4949859015q11.2-q13.315q11.2-q13.3DupDupDupDupDupDelM8145142 gene (including UBE3A, GABRB3)162 gene (including UBE3A, GABRB3)155 gene (including UBE3A, GABRB3)119 gene (including UBE3A, GABRB3)M15042M16079M10117M16147M15147M16229M830215q11.2-q13.315q11.2-q13.115q1

38、1.2-q13.1109 gene (including UBE3A, GABRB3)6 genes (including APBA2)15q13.1-13.215q2334 (including GANP32A, GRAMD2)DelN16p11.2DupDupDel6 genesN20q13.31-13.33 6,760,16922q13.31-13.33 2,627,381M9118117 genesNM1608740 genes (including SHANK3)6 genes (including NLGN4X)Y(2)Y(2)chrX:3944205-7480499Xp22.33

39、-22.31Xp22.32-22.313,536,2953,695,876DelDelM8590de novode novo10 genes (including NLGN4X)chrX:4482028-8177903M15199inherited unknownGuo H et al. Sci Rep, 2017.1218/5/15结构变异检测的基本原理拷贝检测的基本原理Five approaches to detectStructural variation sequenceCNVs from NGS short reads.A. Paired-end mapping (PEM)strat

40、egy detects CNVs throughsignatures. There are fourgeneral sequence-basedanalytical approaches used todetect structural variation.Theoretically, read-pair (RP),split-read and assembly methodscan be used to discover variantsfrom all classes of structuralvariant (SV), but each hasdifferent biases depen

41、ding on theunderlying sequence content ofthe variants and the dataproperties of the sequence reads.However, read-depth approachescan be used to detect only losses( d e l e t i o n s ) a n d g a i n s(duplications), and cannotdiscriminate between tandem andinterspersed duplications.discordantly mappe

42、d reads.Adiscordant mapping is producedif the distance between two endsofa read pair is significantlydifferent from the average insertsize. B. Split read (SR)-basedmethods use incompletelymapped read from each readpair to identify small CNVs. C.Read depth (RD)-basedapproach detects CNV bycounting th

43、e number of readsmapped to each genomic region.In the figure, reads are mappedto three exome regions. D.Assembly (AS)-based approachdetects CNVs by mappingcontigs to the reference genome.E. Combinatorial approachcombines RD and PEMinformation to detect CNVs.Alkan, C., Coe, B. P. & Eichler, E. E.Geno

44、me structural variation discoveryand genotyping. Nature reviews.Genetics12, 36376 (2011).Zhao M, Wang Q, Wang Q, et al. Computational tools for copy number variation (CNV)detection using next-generation sequencing data: features and perspectivesJ. BMCBioinformatics, 2013, 14(Suppl 11): S1.通过全基因组测序在中

45、国孤独症样品中检测到新发的拷贝数变异和结构变异全基因组测序检测孤独症新发的结构变异Unpublished dataWilliam et al. AJHG 2016全基因组测序发现父亲遗传的结构变异同孤独症高度相关William, et al Science 20181318/5/15遗传变异等位基因频率和性状/表型的关系Manolio et al. 2009 Nat Genet孤独症遗传病因研究策略核型分析 致病基因拷数分析 (CNVs) 易感基因临床亚型病理机制基因型-表型关联研究全基因组关联分析(GWAS)测序：全基因组、外显组、靶向Luis et al. Nat Med,2016孤独症基

46、因型-表型关联研究的临床转化2.48+6.6+4+(罕变异)+3050(常变异)%=5070%早期诊断孤独症临床亚型早期（产前）诊断早期预警（新生儿筛查）A model: excessive UBE3A dosagemight lead to increased ubiquitylationof the ALDH1A family members anddecreased RA biosynthesis resulting inreduced RA activity, which mightmechanistically underlie this subtypeof human ASD.发现

47、自闭症潜在治疗靶点!降低孤独生率早期干预，预后改善个体化治疗Xu et al. Cell Res 20171418/5/15第三代测序技 以PacBio公司的SMRT、Oxford NanoporeTechnologies纳孔单分测序。四、第三代测序技术在遗传性疾病检测中的应用与发展最特点：单分测序，测序过程需PCR。优势：读很，达10kb以上PacBio SMRT也应用边合成边测序，以SMRT芯片为测序载体。三代测序技术更有效发现CNV或结构变异Cell 20181518/5/15Identification of repeat-expansion mutations in SAMD12Na

48、ture Genetics, 2018Two repeat configurations of abnormal repeat expansions in SAMD12五、高通量测序在产前诊断中的应用与发展染色体非整倍体NIPT常规产前诊断的不足：血清学筛查：假阳性率高达5%，漏筛率高达20-40%羊水穿刺等存在创伤、感染及流产风险在国内率先研发达到临床应用标准的染色体非整倍体NIPT无创产前诊断（NIPT）的优势：无 流产、感染等风险高 灵敏度ESI高引论文高 特异性周 期短疾病灵敏度特异性阳性预测值阴性预测值Trisomy 21100% (40/40) 100% (372/372)100%

49、 (14/14) 100% (398/398)100% (4/4) 99.75% (407/408)100% (40/40) 100% (372/372)Trisomy 18Trisomy 13Trisomy 9XO100% (14/14) 100% (398/398)80% (4/5)*100% (1/1)83.3% (5/6)100% (1/1)100% (407/407)100% (411/411)100% (405/405)100% (411/411)Lo等采用新一代测序技术检测母血浆中游离DNA，诊断胎儿21三体、18三体、13三体型综合征等非整倍体疾病。100% (1/1)100%

50、 (411/411)100% (5/5) 99.75% (406/407)XXX100% (1/1)100% (411/411)1618/5/15重要论文国际同行评价非整倍体NIPT获全球首个临床应用许可证血清学筛查该研究被欧洲人类遗传学会和人类NIPT（n=481,453）生殖与胚胎学会当前欧洲医学辅助生殖与遗传学问题与共识、国际产前诊断协会发布的染色体异常筛查委员会立场声明引用，并病种优 绝于 对特异性灵敏度特异性灵敏度PPV1.00%65.00%T21 99.97%99.91%94.80%277家省市产前诊断中心推广应用 1.00% 50.00%作为无创产前检测临床应用的代表。全国T18 99.98%99.92%89.81% T21、T18 和 T13 检测特异性 99.98%，灵敏度 99.94%，各项指标处国际领先水平NA* NA*T13 99.98%99.99%49.63% 阻止了7716例严重遗传病患儿的出生，为国家减少直接经济负担约83.2亿元cSMART技术引起国际同行高度关注候选策略用于产前诊断环化单分子扩增重测序技术(cSMART)被美国临床化学学会(AACC) 誉为“分子诊断的革命性突破”美通社、路透社等上百家媒体重点报道。实现胎儿单个碱