华支睾吸虫分泌排泄抗原在血清学诊断中的意义

1、华支睾吸虫分泌-分泌抗原在血清学诊断中的意义崔香淑，金元哲，李顺玉【关键词】华支睾吸虫；,分泌-分泌抗原；,酶连免疫吸附法；,诊断摘要：目的评价华支睾吸虫分泌-分泌抗原在华支睾吸虫病血清学诊断中的代价，应用ELISA技能对华支睾吸虫的成虫粗抗原和分泌-分泌抗原的敏感性和特异性举行比力。要领制备华支睾吸虫的粗抗原和分泌-分泌抗原，以ELISA要领对华支睾吸虫熏染患者509人、麝猫后睾吸虫熏染者47人、卫氏并殖吸虫熏染者20人、日本血吸虫熏染者14人以及康健人血清163人，检测血清特异性IgG。效果比力华支睾吸虫分泌-分泌抗原的诊断的敏感性高于粗抗原，分泌-分泌抗原的特异性反响显着高于粗抗原。结论

2、分泌-分泌抗原用于诊断熏染华支睾吸虫病有较高的敏感性和特异性,是一种有用的诊断抗原。关键词：华支睾吸虫；分泌-分泌抗原；酶连免疫吸附法；诊断TheSignifianefExretry-seretryAntigenflnrhissinensisinSerlgialDiagnsisAbstrat：bjetiveThepresentstudyasundertakentevaluatethediagnstivaluefELISAusingexretry-seretryantigen(ESA)insteadfrudeantigen(A)flnrhissinensis.ethdsThediagnstise

3、nsitivityandspeifiityfrudeantigenandexretry-seretryantigenfserebservedbyELISA.Serafhuaninfetedithlnrhissinensis(509ases),pisthrhisviverrini(47ases),Paragniusesterani(20ases)Shistsajapniu(14ases)andseruf163healthystudentsereusedfrELISA.ResultsThediagnstisensitivityfELISAusingexretry-seretryantigenas9

4、2.5%,hihashigherthanthatfELISAusingrudelnrhissinensisantigen(88.2%).Inaddithin,thespeifiityfexretry-seretryantigenasfund93.1%hilethatfrudeantigenas87.8%.nlusinlnrhissinensisESAasfundtbeabetterserdiagnstiantigenthanAfrELISA.Keyrds：lnrhissinensis;Exretry-seretryantigen;ELISA;Diagnsis华支睾吸虫又称肝吸虫,是一种严峻危害

5、人体康健的人兽共患寄生虫玻重要漫衍于东亚和华人社区,预计有2500万熏染,此中海内有1000万熏染者1。华支睾吸虫病的诊断固然做大便查抄可以确诊,但是因虫卵小,轻易漏诊,并应留意与其他寄生虫的虫卵相区分。因此,应用免疫学诊断要领检测肝吸虫抗体是紧张的补贴诊断仪据。已经用于华支睾吸虫的查抄要拥有皮内试验、补体结合试验、血清凝集试验、对流免疫电泳及酶联免疫吸附(ELISA)。此中ELISA要领是敏感性和特异性较高的一种常用的检测本领。如今,最常用的ELISA诊断抗原是粗抗原,它具有较高的敏感性和特异性,但和其他吸虫有交织反响2。比来,外洋已有陈诉华支睾吸虫的分泌-分泌抗原比粗抗原具有更高的敏感性和

6、特异性3。本实行使用华支睾吸虫的粗抗原和分泌分泌抗原检测患者血清抗体,评价了分泌-分泌抗原在诊断中的有用性。1质料与要领1.1华支睾吸虫粗抗原及分泌-分泌抗原的制备1.2待检血清华支睾吸虫熏染血清509份取自黑龙江省肇源县。这些熏染者均有恒久食用生鱼的汗青，并粪检阳性。163例康健者血清取自非盛行区无病症且粪检阴性者作为阴性比较。别的相干吸虫患者血清作交织反响实行:麝猫后睾吸虫患者47例，日本血吸虫患者14例，卫氏并殖吸虫患者20例。全部吸虫患者均经寄生虫病原学检测确诊。2效果效果见表13。用粗抗原检测抗体的ELISA法检测各组血清,阴性比较组的均匀吸光值较低，为0.0660.058,且个别间

7、差异较小,华支睾吸虫患者血清的均匀吸光值为0.3530.115,麝猫后睾吸虫患者血清为0.2610.135,日本血吸虫患者血清为0.0930.124,卫氏并殖吸虫患者与肝片形吸虫患者血清的均匀吸光值稍高于0.1。而用分泌-分泌抗原检测抗体时,比较组血清样本的吸光值和粗抗原检测的吸光值在相似的程度上,华支睾吸虫患者血清的均匀吸光值升高到0.4040.129,而其他吸虫患者血清的吸光值均有所落落。509例华支睾吸虫患者血清，449例在粗抗原检测抗体中为阳性,敏感性为88.2%；471例在分泌-分泌抗原检测时为阳性,敏感性为92.5%,统计学上有明显性差异P0.05。在粗抗原和分泌-分泌抗原的ELI

8、SA检测中,比较组血清和肝片吸虫患者血清均末见交织反响,但麝猫后睾吸虫患者血清在两种抗原检测中均有较高的交织反响,日本血吸虫患者及卫氏并殖吸虫患者用粗抗原作检测交织反响,别离为7.1%1/14与25%5/20,而用分泌-分泌抗原作检测,均末见交织反响。分泌-分泌抗原检测抗体的ELISA法特异性明显高于用粗抗原检测抗体的ELISA法特异性别离为93.1%和87.8%。表1华支睾吸虫粗抗原和分泌-分泌抗原吸光度的比力略与比较组比力，*P0.05，*P0.01表2华支睾吸虫粗抗原和分泌-分泌抗原敏感性的比力略与粗抗原体比力，*P0.05表3华支睾吸虫粗抗原和分泌-分泌抗原特异性的比力略与比较组比力，

9、#P0.05，*P0.013讨论ELISA法已是最普及地用于华支睾吸虫的免疫学诊断。ELISA法所用抗原多为成虫可溶性卵白抗原,按照浩繁学者的研究和应用,其敏感性可达83.1%100%,但与日本血吸虫,肺吸虫有10%摆布的交织反响4。为了进步ELISA测定的特异性,差异抗原已用于华支睾吸虫的诊断。有关华支睾吸虫特异性抗原包罗全虫抗原、表皮膜抗原、代谢抗原、虫卵抗原及去膜虫体抗原等。此中已证明代谢抗原的血清敏感性较高,其抗原中大概含有高活性的组分5。本实行证明,用华支睾吸虫粗抗原和分泌-分泌抗原作诊断抗原，以ELISA法诊断人体华支睾吸虫病及其他寄生虫病，其诊断的敏感性和特异性均分泌-分泌抗原优

10、于粗抗原。华支睾吸虫的分泌-代谢抗原的抗原条带为7-8,12.5,17及26-28kDa,而粗抗原还可以不雅察到35,43,70kDa,此中7和8kDa是重要身分6,分泌-分泌抗原已被证明为急性熏染期的有用诊断抗原7。华支睾吸虫7-8kDa大概是7和8kDa的混淆物，在免疫构造化学染色中，它们会合漫衍于体表及精子囊,并已证明这些条带进步诊断的成果。分泌-分泌抗原的另一个身分是12.5和17kDa,此中17kDa卵白质条带已被证明为半胱氨酸卵白酶8。这条带卵白质抗原性并不强，但与其他吸虫有较普及的交织反响，因此从分泌-分泌抗原中能去除此身分将进步诊断的特异性。分泌-分泌抗原的第3种身分是26和2

11、8kDa条带。这两种条带是一种卵白质范例，已证明为谷胱甘肽-S转移酶。这两种条带具有抗原性,与其他寄生虫有较低的交织反响，已被对待为候补诊断抗原9。华支睾吸虫的分泌-分泌抗原用于ELISA检测中，可进步诊断的敏感性和特异性。分泌-分泌抗原的敏感性的进步大概与7-8和26-28kDa条带的高含量有关。粗抗原除了这两种抗原条带以外,还含有其他卵白质条带,因此这些有用抗原成份很大概被稀释,导致敏感性的低落。已有报道华支睾吸虫粗抗原中35和70kDa抗原卵白与其他蠕虫有交织反响10。分泌-分泌抗原含有较高的7-8和26-28kDa抗原条带,但含有少量的35或70kDa卵白质条带，因此可以进步诊断的特异

12、性。ELISA检测特异性抗体已普及应用于寄生虫病查抄,包罗华支睾吸虫病，而分泌-分泌抗原的应用将进步诊断的敏感性和特异性,但是得到充实的分泌-分泌抗原现实上有必然的难度。在以后的研究中,确定分泌-分泌抗原的有用身分，研制重组卵白将会补充这些不敷。参考文献：1吴德,余新炳,吴宗道.华支睾吸虫病的盛行外表J.热带医学杂志，2002，23:277.2HngST.hangesfanti-lnrhissinensisIgGantibdyinseruafterpraziquanteltreatentinhuanlnrhiasisJ.KreanJParasitl,2001,16：1.3KiSI.Alnrhi

13、ssinensis-speifiantigenthatdetetsativehuanlnrhiasisJ.KreanJParasitl，36:37.4RiHJ.lnrhiasisinKreaJ.KreanJParasitl.28Suppl：63.5余海斯,周礼神.华支睾吸虫成虫四种抗原的免疫学特性比力J.中华熏抱病杂志，1989，74：212.6hungYB,Lee,YangHJ,etal.haraterizatinfpartiallypurified8kDaantigeniprtEinflnrhissinensisJ.KreanJParasitl，40：83.7KiSI.AlnrhissinensisspeifiantigenthatdetetsativehuanlnrhiasisJ.KreanJParasitl，36:37.8hungYB,KngY,YunDH,etal.PersistingantibdyreatininparagniiasisafterpraziquenteltreatentiselitedainlybyeggantigensJ.KreanJParasitl，38:75.9Kang