同济医院检验科ISO15189体系文件02抗单链脱氧核糖核酸抗体(SS-DNA)测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ702第2版标题：抗单链脱氧核糖核酸抗体(SS-DNA)测定第7章 第02号第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的：检测血清标本中的SS-DNA抗体。2. 适用范围：检验科免疫室。3. 项目名称：抗单链脱氧核糖核酸抗体(SS-DNA)测定。4. 方法：酶免疫分析法。5. 检测原理：SS-DNA抗核抗体是一种抗“自身脱氧核糖核酸和核蛋白”的抗核抗体。采用EIA原理检测。6. 试剂6.1 品牌：购自上海玉兰生物技术研究所。6.2 包装规格：48人份。6.3 内含物：6.3.1 包被板 12孔X4条;6.3

2、.2 阳性对照 1支;6.3.3 阴性对照 1支;6.3.4. 标本稀释液 1瓶;6.3.5 酶结合物 1瓶;6.3.6 底物液A 1瓶;6.3.7. 底物液B 1瓶;6.3.8 浓缩洗涤液(使用蒸馏水稀释至400ml) 1瓶;6.3.9 终止液 1瓶;7 仪器品牌、型号: BIO RAD UV-3550酶标仪，测定波长为450nm；参考波长为630nm；8 操作步骤：8.1 打印工作单:8.1.1 打开电脑及打印机电源，8.1.2 双击齐效检验系统，登陆工号与密码；8.1.3 双击报告处理，单击标本申请信息打开标本申请明细信息查询，打开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。8.1.4 在检验

3、项目处选择SSDNA执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。8.2 排列待测标本:根据工作单上的库位号从标本架中找出相应标本，并按工作单上的 顺序排列在样本架上。8.3 按以下步骤开始操作:8.3.1 将试剂盒放在室温30分钟以上，使之与室温平衡。8.3.2 将已包被的酶标孔中，每孔加2滴（100l）标本稀释液，血清标本用生理盐水稀释10倍后再取10l已稀释的标本，加入到100l标本稀释液中，另设阳、阴对照，每孔（50l）（不用稀释），略微振荡，放入37恒温箱中反应30分钟。8.3.3 将浓缩洗涤液稀释40倍（蒸馏水配），洗板4次，然后拍干。8.3.4 每孔加入酶标抗体1滴置37反应20分钟。

4、8.3.5 洗涤6次拍干。8.3.6 每孔加入显色剂A，B各1滴，反应510分钟，观察结果。（如果室温低于15则需放在37反应5分钟）。8.4 结果判断：加入终止液1滴，在450nm读数，OD0.2为阳性，OD0.2为阴性。8.5 发送报告：详见免疫报告发送程序。9 参考范围：正常人阴性。10 病人准备、标本要求：标本为血清时最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。其它体液标本无特殊要求。11 临床意义：快速测定系统性红斑狼仓SLE等结缔组织病患者血清中SS一DNA抗体，具有特异性高，快速、敏感、操作简单，结果清晰，可替代传统的LE细胞镜检法。12 注意事项：12.1 洗涤要彻底，否则要出现假阳性。12.2 10分钟后出现兰色者作为阳性。12.3 一次未能用完的酶标板需装入自封袋中并放入干燥剂，再放入冰箱保存。12.4 建议水浴箱中反应，最好用即时