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文档简介
1、关于实验三网织红细胞计数血沉测定第一张,PPT共十七页,创作于2022年6月一、网织红细胞计数目的 掌握网织红细胞(Ret)试管法计数的原理及操作方法。原理 网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体及核糖核酸等嗜碱性物质,经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后,呈蓝色网状或点状结构,可与成熟红细胞相区别。第二张,PPT共十七页,创作于2022年6月器材 显微镜、试管、吸管、玻片、推片、香柏油、擦镜纸、擦镜液试剂 新亚甲蓝标本 新鲜全血第三张,PPT共十七页,创作于2022年6月操作步骤1.加染液 将Ret染液2滴加至小试管中,做好标记。2.加血 在已加入染液的小试管内注入新鲜全血2滴,立即混匀。3.染色
2、 室温下染色10-15min。4.涂片制备 取染色血1小滴推制成薄血涂片,自然干燥5.观察 低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好、背景清晰的部位进行计数。6.计数 常规法:在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞。7.计算 Ret百分数=(1000个RBC中的Ret数/1000)100%8.结果报告 网织红细胞百分数:X.X%第四张,PPT共十七页,创作于2022年6月血涂片制备推片载玻片血液将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B 1 2 3第五张,PPT共十七页,创作于2022年6月参
3、考区间成人、儿童:0.5%-1.5%新 生 儿:2.0%-6.0%第六张,PPT共十七页,创作于2022年6月注意事项1.试剂准备 推荐使用新亚甲蓝染液,试剂应定期配制,用前过滤。2.染色 染液与血液比以1:1为宜,染色时间不能过短。试剂用后及时盖好盖子,以免挥发。3.标本 应及时染色,及时测定。4.计数 选择红细胞分布均匀,网织红细胞着色好的、背景清晰的部位计数。应兼顾血片边缘和尾部。第七张,PPT共十七页,创作于2022年6月目的 掌握魏氏法测定血沉的原理及方法。原理 将一定量的枸橼酸钠抗凝全血置于魏氏血沉管中,直立于血沉架上,由于红细胞比重大于血浆,克服血浆阻力而下沉,1h后读取上层血浆
4、高度的毫米数,即为红细胞沉降率。器材 魏氏管、血沉架、洗耳球。(血沉管)试剂 109mmol/L枸橼酸钠溶液。标本 外周血。二、血液沉降率测定(魏氏法)第八张,PPT共十七页,创作于2022年6月1.采血 采静脉血1.6ml加入含0.4ml 109mmol/L枸橼酸钠溶液抗凝剂的采血管中(即采血量到采血管2ml刻度线处) ,混匀。2.吸血 混匀血吸入血沉管内至刻度“0”处,拭去管外残余血。3.立血沉管 将血沉管直立于血沉架上。4.读数 1h末准确读取红细胞下沉后露出的血浆高度。5.报告方式 XX mm/h操作步骤第九张,PPT共十七页,创作于2022年6月参考值 50岁:男性 15mm/h 女
5、性 20mm/h 50岁:男性 20mm/h 女性 30mm/h 85岁:男性 30mm/h 女性 42mm/h 儿童: 10mm/h二、血液沉降率测定(魏氏法)第十张,PPT共十七页,创作于2022年6月注意事项 1.严格控制采血量,使抗凝剂与血液比例为1:4。 2.血沉管应垂直放置,不得倾斜。 3.测量时,血沉架应避免直接光照、移动和振动。 4.本实验最适宜温度为1825,并要求在采血后 2h内完成。 5.红细胞沉降率在1h沉降过程中,并不是均衡等速度的沉降,绝不可以只观察30min沉降率,将结果乘以2作为1h血沉结果。第十一张,PPT共十七页,创作于2022年6月二、血液沉降率测定(自动
6、血沉仪法)第十二张,PPT共十七页,创作于2022年6月白细胞计数一、目的 掌握显微镜白细胞计数的方法。二、原理 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升血液中的白细胞数。第十三张,PPT共十七页,创作于2022年6月三、器材 显微镜、改良计数板、血盖片、试管、微量 吸管、加样枪、乳胶吸头、纱布四、试剂 白细胞稀释液五、标本 EDTA盐抗凝血第十四张,PPT共十七页,创作于2022年6月六、操作1. 加稀释液 用加样枪吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2. 加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l,
7、擦去管外余血,轻轻加至白细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管23次,混匀。3. 充池 混匀后用微量吸管将细胞悬液冲入计数池,室温下平放35分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。4. 计数 用低倍镜依次计数四角4个大方格内的白细胞数。5. 计算 白细胞/L=N/41020106=N/20109/L6. 报告方式 X.X109/L。第十五张,PPT共十七页,创作于2022年6月七、注意事项 1. 充池前应将白细胞悬液充分混匀。 2.在充池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。 3. 白细胞在计数池中若分布不均,各大方格间细胞计数不得相差8个以上,应重新计数。 4. 白细胞数量过多
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