免疫组化解读

1、如何解读乳腺癌免疫组化中的项目？发表时间：2010-09-07发表者：肖晖（访问人次：2025）乳腺癌术后病理中除描述有肿瘤具体分类名称、肿瘤大小、各切缘是否切除干净、淋 巴结转移部位和数目以及血管淋巴管内和其他组织中有无侵润外，还有一些重要的可以提示 预后的免疫指标，通过分析这些指标可以指导治疗和估计预后。以下是各医院检查中可能出现的常用免疫指标以及对它们的解读，仅供参考：ER：雌激素受体，阳性提示预后比阴性患者要好，加号越多越好。PR：孕激素受体，阳性提示预后比阴性患者要好。正常乳腺上皮细胞内存在ER、PR。当细胞发生癌变时，ER和PR出现部分和全部缺 失。如果细胞仍保留ER和（或）PR，

2、则该乳腺癌细胞的生长和增殖仍然受内分泌的调控， 称为激素依赖性乳腺癌；如果ER和（或）PR缺失，则该乳腺癌细胞的生长和增殖不再受 内分泌的调控，称为非激素依赖性乳腺癌。两者同时阳性预后最好，如一个阳性一个阴性中， 雌激素阳性要好于孕激素阳性。两者都是阴性预后不好。阳性者可以术后或术前使用内分泌治疗。Her-2（CerbB-2）：人类表皮生长因子受体2,是一种原癌基因。它的过度表达即出现加 号表明患者预后不好。同时也提示患者易于出现腋窝淋巴结转移和上述两种激素受体可能缺 乏。在正常乳腺组织中呈低表达，在乳腺癌组织中表达率可增高，其表达与乳腺癌分级、淋 巴结转移和临床分期呈正相关，表达率越高，预后

3、可能也就越差。但Fish检测两个加号以 上者有进行生物靶向治疗的可能。即使用曲妥珠单抗（赫赛汀）。以上三个都是阴性患者，医学上目前被叫做三阴性乳腺癌，预后相对较差，缺乏药 物治疗。E-Cadherin： E-钙粘附蛋白是钙粘附蛋白分子家族中跨膜蛋白亚型的一种，集中表达 在粘着连接，对维持上皮细胞的完整性、极性、形态和组织结构起重要作用。它的高表达表 明预后良好。Ki-67index：是反应细胞增殖的一种增殖抗原，它的表达与乳腺癌发生、发展有关，是 一个不良预后因素。数值越高预后越不好。P53：是一种肿瘤抑制基因，它的突变预示预后不良。P53突变率高的乳腺癌细胞增殖 活力强、分化差、恶性度高、侵

4、袭性强和淋巴结转移率高。CK5/6：是一种细胞角蛋白，组织学分级越高及肿瘤分期越高其表达率越高，总的讲阳性预后差。EGFR：表皮生长因子受体，组织学分级越高及肿瘤分期越高其表达率越高，总的讲也 是阳性提示临床预后差。VEGF：血管内皮生长因子，高表达提示预后差。TOP-II： DNA拓扑异构酶II，高表达提示肿瘤增殖和恶性度较高。PCNA：增殖细胞核抗原，阳性预后不好。P170：是一种多药耐药基因，它的过度表达不利于治疗。nm23:是一种与恶性肿瘤转移相关的基因，基因表达水平降低为乳腺癌淋巴转移的高危因素。Her-1 :和前面的Her-2类似，阳性不好。DNA倍体：非整倍体预示肿瘤发生。CD4

5、4V6 :是一种蛋白，高表达提示预后较差。Ck14、Ck17和CK7：与前面的Ck5/6有类似参考标准。Bcl-2 :是一种抑凋亡基因，它的阳性表达提示肿瘤分级程度高，淋巴结转移少。PS2：在预测内分泌治疗反应方面，PS2比ER测定可能更有用，PS2的表达是乳腺癌 内分泌治疗反应的最好指标。P63： P63基因本身是一个抑癌基因，P63在乳腺癌的发生、发展过程中起着重要的作 用；检测可为乳腺癌的早期诊断、及时治疗及预后判断提供必要的理论依据。Calponin：在乳腺正常组、增生组、不典型增生组中，几乎所有的肌上皮细胞表达P63、 a-SMA和Calponin，而所有的腺上皮细胞3种抗体均为阴性

6、；有助于判断浸润癌、原位癌 及不典型增生。SMA(smooth muscle actin):平滑肌肌动蛋白是可靠的标记抗体。从乳腺正常组织、 良性病变到原位癌，早期浸润和浸润性癌，它的消失是一逐渐发展的过程。Cyclin D1： Cyclin D1的高表达可能在人乳腺癌的发生、发展中起重要作用。在乳腺癌 中高表达的临床意义是：Cyclin D1的表达与肿瘤大小、TNM分期及腋淋巴结转移相关。COX-2(cyclooxygenase-2)：乳腺癌组织中存在COX-2的表达。COX-2可能是临床评 价病人预后、识别术后复发的高危险性病人很有实用价值的指标。34pE12 :是一种细胞角蛋白，它的表达

7、与乳腺癌的肿瘤恶性生物学指标相关，乳腺癌 组织中34pE12阴性表达提示预后不佳，可用于乳腺癌恶性程度和预后的判断。P120膜：在乳腺癌组织中呈异常表达，并与E-cadherin表达相关，在乳腺癌发生、发展 中可能起着重要作用；P120膜与浸润性小叶癌的发生和发展更为密切。ER、PR：正常乳腺上皮细胞内存在ER、PR。当细胞发生癌变时，ER和PR 出现部分和全部缺失。如果细胞仍保留 ER和(或)PR，则该乳腺癌细胞的 生长和增殖仍然受内分泌的调控，称为激素依赖性乳腺癌；如果ER和(或) PR缺失，则该乳腺癌细胞的生长和增殖不再受内分泌的调控，称为非激素 依赖性乳腺癌。C-erbB2癌基因：在正

8、常乳腺组织中呈低表达，在乳腺癌组织中表达率 可增高，其表达与乳腺癌分级、淋巴结转移和临床分期呈正相关，表达率 越高，预后可能也就越差。P53基因：p53突变率高的乳腺癌细胞增殖活力强、分化差、恶性度高、 侵袭性强和淋巴结转移率高。COX-2(cyclooxygenase-2):乳腺癌组织中存在 COX-2 的表达。COX-2 可能是临床评价病人预后、识别术后复发的高危险性病人很有实用价值的 指标。Ki-67 :与乳腺癌尤其是淋巴结转移阴性患者的预后相关，有助于确定 是否采用辅助性化学治疗。E-cadherin :黏附分子，可作为乳腺癌的判断预后指标。PS2 :在预测内分泌治疗反应方面，PS2比

9、ER测定可能更有用，PS2的 表达是乳腺癌内分泌治疗反应的最好指标。p63： p63基因本身是一个抑癌基因，p63在乳腺癌的发生、发展过程 中起着重要的作用；检测可为乳腺癌的早期诊断、及时治疗及预后判断提 供必要的理论依据。Calponin:在乳腺正常组、增生组、不典型增生组中，几乎所有的肌上 皮细胞表达P 63、a-SMA和Calponin,而所有的腺上皮细胞3种抗体均为 阴性；有助于判断浸润癌、原位癌及不典型增生。SMA ( smooth muscle actin )：平滑肌肌动蛋白是可靠的标记抗体。从乳腺正常组织、良性病变到原位癌，早期浸润和浸润性癌，ME的消失是一 逐渐发展的过程。Cy

10、clin D1 : Cyclin D1的高表达可能在人乳腺癌的发生、发展中起重 要作用。在乳腺癌中高表达的临床意义是：Cyclin D1的表达与肿瘤大小、 TNM分期及腋淋巴结转移相关。“三阴乳腺癌”特指雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及人表皮生长因子受 体2 (HER-2)均阴性的乳腺癌患者。按分子分型，乳腺癌分为：luminal型、 HER-2 ( + )型和 Basal-like 型。Basal-like 型分子表达为 ER (-) /PR (-) /HER-2 (-)，相当于三阴乳腺癌，特征为基底上皮分子标志物高表达CK5/6 或17，EGFR)以及ER或ER相关基因及HER-2

11、或HER-2相关基因低表达。 对基底细胞样癌目前没有公认的定义，但对基底细胞样癌基因表达的定义有如下 几种：ER (-) /HER2 (-)，CK5/6 ( + )和/或 EGFR ( + )。CK5/6( + )，caveolin1 ( + )，CAIX ( + )，p63 ( + )或 CD117+。CK5/6 ( + ) 和/或CK14 ( + )。CK5/14 ( + )。本型乳腺癌5年生存率不到15%，多 见于绝经前年轻患者，内脏转移、脑转移几率较高，病理组织学分级较差，多为 3级，细胞增殖比例较高，且多伴p53突变，c-kit、p53、EGFR表达多为阳性， 基底细胞标志物CK5/

12、6、CK17也多为阳性。肿瘤侵袭性强，易发生局部复发及 远处转移，与基底细胞样乳腺癌和BRCA1基因突变相关性乳腺癌有较多相似特 征。三阴乳腺癌的预后与肿瘤大小和淋巴结状况关系不大，复发迅速，1-3年是 复发高峰，5年内是死亡高峰，脑转移发生率高，迅速出现远处转移而导致死亡。 “三阴乳腺癌”内分泌治疗和曲妥珠单抗靶向治疗无效，治疗上依靠化疗为主。与 其他类型乳腺癌相比，三阴性乳腺癌对化疗、放疗敏感性较高，但如果只是常规 的标准治疗，其预后依然很差，无复发生存和总生存较低。目前还没有针对三阴 性乳腺癌的治疗指南，其治疗一般按预后差乳腺癌治疗常规进行，术后辅助化疗 选择含蒽环类紫杉类方案。新辅助化

13、疗中在接受含紫杉类和蒽环类的新辅助化疗 后，可获得较高的病理完全缓解率。伯类药物用于新辅助化疗正在研究中。转移性三阴乳腺癌病情发展迅速，姑息性化疗的研究有以下几方面：微管稳定剂 Paclitaxel、Docetaxel、nab-paclitaxel、ixabepilone；卡伯/顺伯；抗血管生成Bevacizumab、Sunitinib； EGFR 抑制剂 Cetuximab、Erlotinib 等。在新药研究 中，依沙匹隆被证实与卡培他滨联合应用于对蒽环类及紫杉类耐药的晚期乳腺癌 及三阴乳腺癌较单用卡培他滨疗效为好。“三阴乳腺癌”内分泌治疗和曲妥珠单 抗靶向治疗无效，但部分三阴乳腺癌高表达E

14、GFR、c-Kit、CK5/6、P-cadherin， p53,这类患者有望通过针对相关的靶向治疗而获益。目前国际上正在进行EGFR的单克隆抗体西妥昔单抗，EGFR的酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼、埃罗替 尼在三阴乳腺癌治疗中的作用的研究。在许多存在BRCA1缺失或变异的三阴乳 腺癌患者中，由于BRCA1在DNA修复mRNA转录及细胞周期校对中起重要作 用，BRCA1基因缺失者发展成为乳腺癌者风险高达82%，BRCA1基因突变者 发展成为乳腺癌的风险为5%，对此的相关研究表明存在BRCA1缺失或变异的 患者对破坏DNA化学结构的药物（如烷化剂、铂类、丝裂霉素）有效，而对作 用于微管蛋白合成的药物（如

15、紫杉醇、长春碱类）效果较差。三阴乳腺癌患者经 过保乳手术及放疗后并没有出现比非三阴乳腺癌患者更高的局部复发率，即经放 疗后三阴乳腺癌的局部复发率与非三阴乳腺癌相接近。三阴乳腺癌理论上对 DNA毒性药物有效，也因此也对放疗有效。乳腺癌免疫组化指标的临床意义发表时间：2010-08-02发表者：金广超（访问人次：1159）ER、PR：正常乳腺上皮细胞内存在ER、PR。当细胞发生癌变时，ER和PR出现部分和全 部缺失。如果细胞仍保留ER和（或）PR，则该乳腺癌细胞的生长和增殖仍然受内分泌的调 控，称为激素依赖性乳腺癌；如果ER和（或）PR缺失，则该乳腺癌细胞的生长和增殖不 再受内分泌的调控，称为非激

16、素依赖性乳腺癌。C-erbB2癌基因：在正常乳腺组织中呈低表达，在乳腺癌组织中表达率可增高，其表达与 乳腺癌分级、淋巴结转移和临床分期呈正相关，表达率越高，预后可能也就越差。河南省人 民医院普通外科李文涛P53基因：p53突变率高的乳腺癌细胞增殖活力强、分化差、恶性度高、侵袭性强和淋巴 结转移率高。p53过度表达提示对第三代芳香化酶抑制剂疗效不佳。p63： p63基因本身是一个抑癌基因，p63在乳腺癌的发生、发展过程中起着重要的作用； 检测可为乳腺癌的早期诊断、及时治疗及预后判断提供必要的理论依据。p27： p27抑癌基因，研究表明,p27是乳腺癌的一个独立的预后标志,p27低表达与TNM分

17、期晚、淋巴结转移、局部复发、远处转移相关，而且p27低表达与生存期短、预后差显著相 关。在今年的ASCO会议上,Porter等采用组织芯片技术进行的研究表明,在接受AC方案化 疗的乳腺癌患者中,p27不表达或低表达均提示在OS和DFS上预后不佳。COX-2（cyclooxygenase-2）：乳腺癌组织中存在COX-2的表达。COX-2可能是临床评价病 人预后、识别术后复发的高危险性病人很有实用价值的指标。Ki-67:与乳腺癌尤其是淋巴结转移阴性患者的预后相关，有助于确定是否采用辅助性化 学治疗。E-cadherin： E-cadherin是一类建立细胞间紧密连接、维持细胞极性、保持组织结构完

18、整的 钙依赖性跨膜糖蛋白。E-cadherin主要介导同型细胞的粘附功能，E-cadherin表达下降或功 能缺失使癌细胞与邻近细胞间的黏附作用降低，导致肿瘤细胞的活动能力和范围增加，从而增加癌细胞的转移和浸润能力，可作为乳腺癌的判断预后指标。PS2:在预测内分泌治疗反应方面，PS2比ER测定可能更有用，PS2的表达是乳腺癌内分泌治疗反应的最好指标。Calponin:在乳腺正常组、增生组、不典型增生组中,几乎所有的肌上皮细胞表达p63、a-SMA和Calponin，而所有的腺上皮细胞3种抗体均为阴性；有助于判断浸润癌、原位癌及不典型增生。CK : CK-L,CK8/18,CK7,CK20,CK

19、3邛E12这四种是细胞因子（cytokine）中的细胞角蛋 白（cytokeratin.CK）,EMA（Epithelial membrane antigen）是上皮膜抗原,CEA（carcinoembryonic antigen）是癌胚抗原.这些指标通常联合起来用于检查例如来源于上皮细胞的肿瘤如消化道 肿瘤（食管癌，胃癌等），泌尿系肿瘤（前列腺癌，肾癌等），乳腺癌等妇科肿瘤.由于这些指标可以 检出的肿瘤很多，特异性相对不高,所以还要结合其他检查包括:病史，查体以及活检病理等综 合手段来诊断，不能单一靠你说的这些指标来确诊某种肿瘤.但你说给的检查结果有很多阳性, 提示有肿瘤的存在，需要进一步检

20、查。SMA（smooth muscle actin）:平滑肌肌动蛋白是可靠的标记抗体。从乳腺正常组织、良 性病变到原位癌，早期浸润和浸润性癌，ME的消失是一逐渐发展的过程。EMA：上皮膜抗原（EMA）、EMA为一组高分子量为主的糖蛋白，组织分布特点是一般 限于上皮细胞的腔缘表面膜，细胞基底面及侧面胞膜无EMA分布。高分化腺癌主要呈膜型 分布，低分化腺癌或未分化癌主要以胞浆型分布EMA 一般不见于间叶性肿瘤 做EMA是 较好的上皮源性肿瘤标志，也可以作为胃癌淋巴结微转移的重要指标之一。Laminin：层粘连蛋白主要存在于基膜（basal lamina）结构中，是基膜所特有的非胶原糖蛋 白，相对分

21、子质量为820kDa,含13-15%的糖，有三个亚单位，即重链（a链，400kDa）和01（2 15kDa）、02（205kDa）两条轻链。结构上呈现不对称的十字形，由一条长臂和三条相似的短臂 构成。这四个臂均有棒状节段和球状的末端域。01和02短臂上有两个球形结构域，a链上 的短臂有三个球形结构域，其中有一个结构域同W型胶原结合，第二个结构域同肝素结合， 还有同细胞表面受体结合的结构域。正是这些独立的结合位点使LN作为一个桥梁分子，介 导细胞同基膜结合。所以LN的主要功能就是作为基膜的主要结构成分对基膜的组装起关键 作用，在细胞表面形成网络结构并将细胞固定在基膜上。LN还有许多其他的作用，如

22、在细胞 发育过程中刺激细胞粘着、细胞运动。LN还能够刺激胚胎中神经轴的生长，并促进成年动物 的神经损伤后重生长和再生。如同纤粘连蛋白，细胞外的LN能够影响细胞的生长、迁移和 分化。LN在原生殖细胞的迁移中起关键作用。LN也是一种大型的糖蛋白，与W型胶原一 起构成基膜，是胚胎发育中出现最早的细胞外基质成分。LN分子由一条重链（a）和二条 轻链（0、Y）借二硫键交联而成，外形呈十字形，三条短臂各由三条肽链的N端序列构成。 每一短臂包括二个球区及二个短杆区，长臂也由杆区及球区构成（图，结构模型）。LN分 子中至少存在8个与细胞结合的位点。例如，在长臂靠近球区的。链上有IKVAV五肽序列 可与神经细胞

23、结合，并促进神经生.长。鼠 LNa1链上的RGD序列，可与av03整合素结合。 现已发现7种LN分子，8种M（a1,a2,a3,pi,p2,p3,y1,y2）,与FN不同的是，这8种 亚单位分别由8个结构基因编码。LN是含糖量很高（占15-28% ）的糖蛋白，具有50条左 右N连接的糖链，是迄今所知糖链结构最复杂的糖蛋白。而且LN的多种受体是识别与结 合其糖链结构的。Cyclin D1： Cyclin D1的高表达可能在人乳腺癌的发生、发展中起重要作用。在乳腺癌中 高表达的临床意义是：Cyclin D1的表达与肿瘤大小、TNM分期及腋淋巴结转移相关。EGFR :上皮生长因子受体（Epiderm

24、dl grouth factor receptor,EGFR） EGFR 和 C-erdB- 2一样，同属I型生长因子受体家旅。是一种酪氨酸激酶受体，主要分布于细胞膜，在正常 的情况下，EGF是一种潜在的有丝分裂因子，当其与靶细胞受体结合时，就能够刺激细胞 增殖。肿瘤周围的细胞受到肿瘤细胞分泌因子刺激开始表达EGFR，而EGFR的表达使“正 常”的周围细胞逐渐向恶性表型转化。nm23： nm23又称为抗转移癌基因，是一种抑癌基因，产物是由152个氨基酸组成的蛋 白质，与二磷酸核苷激酶（NDPK）的氨基酸序列具有高度同源性。人类nm23基因有2个 亚型：nm23H1和nm23H2，两者有88%同

25、源性，nm23H1与乳腺癌的预后关系更密切。nm 23蛋白具有NDPK功能，通过影响微管聚合而调节细胞运动，并通过影响G蛋白的信号传 递而发挥负向调节作用，从而抑制肿瘤转移。但其作用并不依耐于NDPK的活性。有实验 结果表明，与转移潜能有关的是nm23NDPK的表达水平而不是NDPK的活性。nm23是独 立预后指标，其表达与年龄、肿瘤大小、ER、PR和C-erbB-2无关，与淋巴结转移状况、 组织学分型、分级及临床分期均有显著关系，nm23高表达者的预后明显好于低表达者。n m23表达降低的乳腺癌分化较低，ER表达水平低，并常常出现淋巴结转移，预后不良。在 乳腺癌进展过程中，nm23的表 达水

26、平降低。通过检测nm23可以把腋淋巴结阳性病人中可 能发生远处转移和腋淋巴结阴性病人中有潜在高转移倾向的病例筛选出来，进行相应的预防 性治疗，从而提高治疗效果。VEGF :血管内皮细胞生长因子（VEGF）血管形成在肿瘤生长、浸润、转移中起关键作 用，它受到一系列促进和抑制因子的调节，其中最重要的促进因子之一是肿瘤细胞在生长过 程中分泌的VEGF，它的编码基因位于6P21.3，由8个外显子构成，由于mRNA不同的剪 切形式，形成5种不同的VEGF，分别含有121、145、165、189、206个氨基酸，其中以V EGF165最重要，在各种细胞中表达占优势，VEGF121和VEGF189在大部分表

27、达VEGF的 组织和细胞中均能检测到，VEGF145和VEGF206非常少见，其中VEGF206只在人胎肝c DNA库中可以检测到。VEGF通过二硫键结合形成二聚体后才有活性，它的受体为酪氨酸 蛋白激酶型膜受体，具有高度特异性。当VEGF与受体结合后，可以刺激血管内皮细胞增 殖，促进血管形成，并增加血管通透性，这样肿瘤细胞一方面可以获得充分的营养而迅速增 殖，另一方面也容易通过血管内皮细胞进入血流从而发生远处转移。VEGF主要由肿瘤细胞 产生，小部分来自细胞间质，它是独立预后指标，与年龄、绝经状态无关，MR、PR呈负 相关，高表达者易转移复发，预后不良，且内分泌治疗和化疗的效果差，建议对VEG

28、F高 表达者联合应用抗血管生成治疗，如利用VEGF单抗阻断与受体结合，重组VEGF与VEG F竞争受体，将VEGF与小分子毒性物质结合，利用反义核酸技术抑制VEGF表达等等，VEGF单克隆抗体阿瓦斯汀、伊利替康。实验表明，循环中的VEGF是预后指标，高表达者易发生转移复发，且该指标可用于指导治 疗。在今年的ASCO会议上,Ghosh等报告,VEGF在乳腺癌组织中的表达明显高于基质，而且 与一些预后不良因素相关,高表达患者在20年生存上提示预后不良。Ryan等对399例乳腺 癌患者的检测分析显示,VEGF表达与新的肿瘤标志物生存素(survivin )的表达呈正相关,survi vin表达增加提

29、示乳腺癌患者预后不良。Traina报告了一项来曲唑+VEGF单克隆抗体贝伐单 抗治疗激素受体阳性转移性乳腺癌患者的研究，在此研究中，通过检测组织中的VEGF来指导 治疗并评价与疗效的相关性。BRCA1：基底细胞样乳腺癌是预后不佳的一类高级别乳腺癌，它们的典型表现是ER，P R和HER-2阴性表达。发病率大约占总乳腺癌患者的15-20%，且发病与BRCA1基因突变 有很大的关联性。Bcl-2：抑凋亡基因包括Bcl-2、Bcl-x1、Bcl-w、mcl-1等;促凋亡基因包括Bcl-xs、Bax、 Bad、Bak、Hrk和Bim等。这两类物质相互结合、彼此抑制，往往由其数量的相对多少决定 凋亡发生与

30、否。在Bcl-2家族中Bcl-2蛋白是最早被发现,分离,目前为止研究得较为透彻的家 族成员。研究表明，它定位于线粒体膜、内质网膜和核膜上，具有离子通道(ion channel )和 停靠蛋白(docking protein)的双重功能，在介导细胞凋亡的途径中起关键作用Bcl-2蛋白通过 调控内质网Ca2 +参与的核内外物质转运及膜通透性转换(PT)来阻止细胞色素C从线粒体中 释放,从而阻止了其与Apaf-1、procaspase-9的相互作用，最终抑制Caspase-9、Caspase-3引发 的细胞凋亡级联反应过程。总之作为一种抗凋亡基因Bcl-2可保护细胞免于病毒、氧化剂等 刺激诱导的细胞凋亡。目前研究认为Bcl-2基因及其相关蛋白