中检所抗生素合作项目剖析

1、中检所抗生素合作项目剖析注射用阿莫西林克拉维酸钾 -symmetry 背景: 药典2005版难重现的方法要求:1主成分峰与相邻杂质的别离,2阿莫西林闭环二聚体的别离条件: Symmetry Shield RP18流动相A 为的磷酸二氢钾溶液，流动相B为的磷酸二氢钾溶液- 乙腈(20:80)，流速为每分钟，线性梯度洗脱；检测波长为254nm。 注射用阿莫西林钠 - Symmetry Shield RP18 要求：阿莫西林峰和相邻杂质峰的别离度应大于流动相A为磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钾溶液，用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至-乙腈99：1；流动相B为磷酸盐缓冲液-乙腈80：20检测波长为254n

2、m，流速为每分钟 Shield RP18 4.6*150mm 5um 时间分钟 流动相A 流动相B0 92 825 0 10040 0 10041 92 855 92 8注射用阿莫西林钠 - Xbridge Shield RP18流动相A为磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钾溶液，用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至-乙腈99：1；流动相B为磷酸盐缓冲液-乙腈80：20；检测波长为254nm，流速为每分钟Xbridge Shield RP18 4.6*150mm 5um 时间分钟 流动相A 流动相B0 92 825 0 10040 0 10041 92 855 92 8吉他霉素的分析吉他霉素又称柱晶白霉

3、素Leucomycin，含有多个组分，其根本构造由16元环大环内酯macrolide、碳霉素carbomycin和碳霉氨糖L-arcanose造成，各组分间的差异仅为16元环大环内酯环上3位的酰基和碳霉氨糖局部4位的酰基R2不同。酰基基团越大，极性越小；反之，那么极性越大，-COCH3的极性大于-COCH2CH(CH3)2。吉他霉素组分-XBridge Shield RP18 以醋酸铵溶液-甲醇-乙腈40:55:5为流动相；柱温60；检测波长为231nm流速:1ml/minXBridge Shield RP18 4.6*250mm 5um吉他霉素-Symmetry C18 NH4OAc:MeO

4、H:ACN=30:65:5柱温60检测波长为231nm流速:1ml/min色谱柱:Symmetry C18 4.6*150mm 5um 实验结果色谱柱编号保留时间峰名称面积面积归一化含量理论板数分离度拖尾因子13.002V3.787.673000e+00323.263UK12.194.055420e+0031.528213e+00033.633U3883670.795.083768e+0031.813646e+00044.096A95.607.045500e+0032.327734e+00054.572A87312181.496.931824e+0032.302866e+0009.285713

5、e-00165.141A74.797.564622e+0032.501327e+0001.008531e+00075.808A62.216.179543e+0032.511063e+0008.484718e-00186.657A542.747.354279e+0032.810159e+0009.194027e-00197.605A417.246.611101e+0032.777504e+0009.891186e-001108.869A18.187.235574e+0033.203421e+0009.223205e-0011110.230A32.667.915245e+0033.112274e+

6、0001.053348e+0001211.967UK22576000.521.306059e+0043.963449e+0007.647092e-0011312.518A136.529.585852e+0031.188065e+0001.078718e+0001414.542UK36320181.299.506094e+0033.663883e+0001.039613e+000麦白霉素 麦白霉素Meleumycin为麦迪霉素A1Mydecamycin A1及吉他霉素A6Kitasamycin A6柱晶白霉素Leucomycin两个组分为主的混合物，含麦迪霉素A1不得低于 麦迪霉素A1 R1=C

7、OCH2CH3 R2=H R3=COCH2CH3吉他霉素A6： R1=H R2=COCH2CH3 R3=H 挑战:化合物偏碱性-色谱柱寿命和方法的稳定性麦白霉素- XBridge C18 XBridge C18 150 4.6 mm，5m XBridge C18 150 4.6 mm，5m流动相甲酸铵溶液用三乙胺调节pH值7.3*-乙腈62:38检测波长:232nm ,柱温30；*调整到碱性条件方法会更简化红霉素1.红霉素分子由3局部组成：德糖胺克拉定糖和红霉素内脂,经别离得到红霉素A、B、C等组分。2.红霉素抗菌活性最强，是主要的药用成分。红霉素C为主要杂质，毒性比红霉素A大2倍活性为红霉素

8、的20。挑战: 红霉素属碱性化合物，在该色谱条件下峰形拖尾现象严重。红霉素及其杂质紫外吸收较弱 红霉素分析比较色谱柱：Hypersil BDS 2504.6 mm，5m 流动相:以0.2 mol/L磷酸铵缓冲液取磷酸二氢铵，加水50ml溶解，用三乙胺调节pH值至四甲基氢氧化铵溶液取25%四甲基氢氧化铵，加水100ml，用磷酸调节pH值至，再加水稀释至200ml乙腈水5203045检测波长为215nm 红霉素-XBridge Shield RP18 色谱柱:XBridge Shield RP18 150(mm)4.6(mm)，5m 流动相：磷酸氢二铵缓冲液取磷酸氢二铵，加水1000ml溶解， pH值为乙腈65 : 35，柱温：35 C，检测波长：215nm头孢克洛胶囊-药典规定方法以0.78%磷酸二氢钠溶液(取磷酸二氢钠，加水溶解并稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至4.0)为流动相A，以0.78%磷酸二氢钠溶液(pH4.0)-乙腈(5545)为流动相B，流速为每分钟，检测波长为220nm，线性梯度洗脱：时间分钟流动相A流动相B0 95 530 75 25 450 100500 1005195 56195 5 要点:相关杂质的别离头孢克洛胶囊-XbridgeC18头孢克洛胶囊-UPLC方法色谱柱:Ac