2022年专题三植物的组织培养技术-知识点总结

1、专题三 植物的组织培育技术 脱分化和再分化；菊花的组织培育 2 养分：常用的培育基是 MS固体培育基,其中含有的大量元素是 N、P、S、K、1. 细胞分化指在生物个体发育过程中,相同细胞的后代在外形、 结构和生理功能 Ca、Mg,微量元素是 Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I 、Co,它们供应了植物细胞所上显现稳固性差异的过程； 细胞分化使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地 化,有利于提高各种生理功能的效率；2. 具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成完整个体的潜必需的无机盐； 有机物有甘氨酸、 烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等；蔗糖供应碳源,维护细胞渗透压； 甘氨酸、维生素等物

2、质主要是为了满意离体植物细胞在正常代 谢途径受到肯定影响后所产生的特别养分需求；微生物培育基以有机养分为主,能,叫做植物细胞的全能性； 但在生物体的生长发育过程中并未表现出来,这是MS培育基就需供应大量无机养分；由于在特定的时间和空间条件下,通过基因的挑选性表达, 形成了不同组织和器 3 激素：植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的官；3. 离体的植物组织或细胞, 在相宜条件下培育了一段时间以后, 会通过细胞分裂,关键性激素；使用次序试验结果生长素细胞分裂素比值与结果形成愈伤组织, 这种由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但

3、不分化比值高时促根分化,抑芽形成物细胞的脱分化（去分化） ；愈伤组织连续进行培育,又可以重新分化成根或芽 等器官,这个过程叫做再分化；4. 愈伤组织的细胞排列疏松而无规章,是一种高度液泡化的呈无定外形态的薄 壁细胞；先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化比值低时促芽分化,抑根形成同时使用分化频率提高比值适中促进愈伤组织生长4环境条件：菊花的组织培育,一般将pH 掌握在左右,温度掌握在1822,并且每日用日光灯照耀12h. 5. 植物组织培育技术广泛应用在实现优良品种的快速繁衍、培育无病毒作物、 制6. 菊花组织培育的操作流程包括：配制MS固体培育基外植体的消毒接种作人工种子、培育作物新品种以及

4、细胞产物的工厂化生产等方面；培育移栽栽培5. 影响植物组织培育的条件有材料、养分、激素及环境条件；7. 制备 MS固体培育基的步骤是：配置各种母液配制培育基灭菌；先将各种 1 材料：植物材料的挑选直接关系到试验的成败；菊花组织培育一般挑选未开 成分按配方比例配制成浓缩液（培育基母液）；然后在容器中加入琼脂（加热融花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料；一般来说, 简单进行无性繁衍的植物简单 化）,依次加入蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,并用蒸进行组织培育； 选取生长旺盛嫩枝进行组培的缘由是嫩枝生理状态好,简单诱导 馏水定容到 1000 毫升,调剂 PH,分装到锥形瓶中,用高压蒸汽灭

5、菌法进行无菌处理；原生质,核位于细胞的中心（单核居中期）；随着细胞不断长大,细胞核由中心8. 外植体是指用于离体培育的植物器官或组织片段；取生长旺盛的嫩枝用流水 移向细胞一侧（单核靠边期） ,并分裂成 1 个生殖细胞核和 1 个花粉管细胞核,冲洗加少许洗衣粉刷洗在流水下冲洗 20min 左右无菌吸水纸吸干表面水 进而形成两个细胞, 一个是生殖细胞, 一个是养分细胞； 生殖细胞将再分裂一次,分体积分数为 70%的酒精中摇动 23 次,连续 67s,无菌水中清洗用无菌 形成两个精子（基因组成完全相同）；吸水纸吸干表面水分质量分数为 %的氯化汞溶液中 12min无菌水中至少清 4. 通过花药培育产生

6、单倍体植株有两种途径,一种是花粉通过胚状体阶段发育为洗 3 次,漂洗消毒液； 应留意对外植体进行表面消毒时,就要考虑药剂的消毒效 植物,另一种是花粉在诱导培育基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株；果,又要考虑植物的耐受才能；这两种途径不同主要取决于培育基中激素的种类及其浓度配比；9. 接种过程中插入外植体时外形学上端朝上,每个锥形瓶接种78 个外植体,5. 胚状体是植物体细胞组织培育过程中, 诱导产生的外形与受精卵发育成的胚类整个过程要求无菌操作；似的结构,有胚芽、胚根、胚轴等完整结构,就像一粒种子；10. 放在无菌箱中培育, 定期进行消毒, 保持相宜的温度 （1822）和光照（12h）6

7、. 影响花药培育的主要因素是材料的挑选与培育基的组成；应当选月季的初花11移栽前先打开培育瓶的封口膜,让其在培育间生长几日, 然后用流水清洗根 期（花粉早期的花药比后期更简单产生花粉植株；挑选单核靠边期（花药培育成部培育基, 将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍宝岩等环境中生活一段时间壮苗,最 功率最高）；挑选完全未开放的花蕾（有利于材料的消毒）；后进行露天栽培；7. 挑选花药时,用醋酸洋红法使细胞核中的染色体着色,通过镜检来挑选单核靠12. 外植体在培育过程中可能会被污染,缘由有外植体消毒不完全；培育基灭菌 边期的花粉；如不易着色,需采纳焙花青-铬矾法将花粉细胞核染成蓝黑色；不完全；接种中被杂菌污染

8、；锥形瓶密封性差等；8. 灭菌后的花蕾, 要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立刻将花药接种到培育基月季的花药培育 上；在剥离花药时, 要尽量不损耗花药 （否就接种后简单从受伤部位长出愈伤组1. 被子植物的雄蕊包含花丝、 花药两部分； 花药为囊状结构, 内部含有很多花粉；织）,同时仍要完全去除花丝,由于与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞；的形成；2. 被子植物花粉的发育要经受小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段；9. 每瓶接种花药 710 个, 温度掌握在 25左右 , 幼小植株形成后赐予光照,培3. 在小孢子四分体时期, 4 个单倍体细胞连在一起,进入单核期时,四分体的4养 2030 天后, 花药开裂长出愈伤组织或形成胚状体；此时要将愈伤组织准时转个单倍体细胞