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文档简介

1、第2节 动物细胞工程一 动物细胞培养 新课程标准核心素养1.阐明动物细胞培养的条件和过程。2.阐述干细胞在生物医学工程中广泛的应用价值。1.科学思维构建动物细胞培养的流程图,认同动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.社会责任理性客观地分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险。动物细胞工程动物细胞工程常用的技术包括_、 _、_等,其中_是动物细胞工程的基础。动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞培养提出问题:动物细胞培养需要哪些条件? 动物细胞培养的基本操作过程是什么?动物细胞融合从社会中来 在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常

2、有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?科学家对皮肤干细胞进行培养,获得适合临床上使用的人造皮肤;一、动物细胞培养概念 动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成_,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和_的技术。单个细胞增殖二、动物细胞培养的条件1营养(1)糖类、_、无机盐、维生素等(2)_:补充培养液中尚未研究清楚的成分氨基酸血清、血浆2.无菌、无毒的环境(3)更换_,及时清除代谢废物(1)培养液和_都灭菌处理(2)在_环境下进行操作培养工具无菌培养液3.温度、PH和渗透压(2)

3、pH:多数动物细胞生存的适宜PH为_(1)温度:哺乳动物多以_为宜36.50.5 7.27.44.气体环境(1)_:维持培养液的PH(2)_:细胞代谢所必需的,供细胞进行有氧呼吸。CO2O25.小结无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境糖类、氨基酸、无机盐、维生素营养条件其他条件动物细胞培养所需的基本条件三、动物细胞培养的过程取动物组织因成块组织,细胞与细胞靠在一起,限制了细胞的生长和繁殖。用机械方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法,将组织分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中进行原代培养原代培养:指动物组织经处理后的初次培养。一般取自幼龄动物的器官或组织,因为这些组织或

4、器官的生命力旺盛,分裂能力强。放入CO2培养箱中培养(适宜环境)传代培养:分瓶后的细胞培养。传代培养时,悬浮生长的细胞直接用_法收集;贴壁生长的细胞要先用_等处理,再用_法收集。离心胰蛋白酶离心传代培养分瓶培养1.体外培养的动物细胞类型:(1)悬浮生长:悬浮在_中生长繁殖。密度过大时,由于_积累和培养液中_,细胞分裂受阻。(2)细胞贴壁:多数细胞贴附在_上生长。瓶壁培养液有害代谢物营养物质缺乏2.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面_时,细胞_的现象称为细胞的接触抑制。相互接触停止分裂生长区分两种“培养”的关键是看用_处理的对象。3.原代培养和传代培养区分胰蛋白酶第一次:用胰蛋白酶对剪碎的_进行

5、处理,使其分散成_后进行培养,为原代培养。第二次:细胞培养过程中出现_,用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离下来,然后,将其分散到多个培养瓶中继续培养,为传代培养。动物组织单个细胞接触抑制思考与讨论1.幼龄动物的细胞和老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?提示:细胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物的细胞则相反。所以,一般来说,幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养。同样,分化程度越低的细胞,增殖能力越强,所以更容易培养。2.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同和不同?提示:可以从培养的原理,所需的营养条件、环境

6、条件以及培养的过程等方面进行分析比较。植物组织培养动物细胞培养原理培养前处理取材培养基的物理性质培养基的成分特有成分植物细胞的全能性细胞增殖离体用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开离体植物器官、组织、细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官固体液体(又称培养液)有机营养成分无机营养成分植物激素糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质及一些天然成分如血清植物激素血清植物组织培养和动物细胞培养的比较提示:用胰蛋白酶分解细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜PH约2,当PH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜PH为7.27.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,所以用胃

7、蛋白酶不行。3.进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?提示:癌细胞细胞膜上糖蛋白减少,细胞的黏着性降低,在适宜的条件下可以无限增殖,因此培养的癌细胞无接触抑制现象,在培养瓶中能够生长成多层。5.根据癌细胞的特点,思考一下培养的癌细胞有没有接触抑制现象。 4.动物细胞培养过程中有接触抑制现象,这一现象说明了细胞膜具有什么功能?细胞膜接受信息后,细胞停止分裂又说明了什么?提示:细胞培养过程中的接触抑制说明了细胞膜能进行细胞间的信息交流。细胞膜接受信息后,细胞停止分裂,说明了细胞膜接受的信息能够传递到细胞核 。四、干细胞的培养及其应用 来源或存在功

8、能及应用胚胎干细胞(ES细胞)成体干细胞诱导多能干细胞(iPS细胞)(阅读课本,完成表格)早期胚胎能够分化成为动物体内的任何细胞,并进一步形成组织、器官甚至生物个体成体组织或器官,包括骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的潜能体外诱导体细胞产生能分化成为具有特定功能的细胞,用于治疗疾病。避免免疫排斥反应。动物细胞培养动物细胞培养的概念和原理干细胞培养及其应用营养条件;无菌、无毒的环境;温度、pH和渗透压;气体环境原理:细胞的增殖在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术干细胞的分布干细胞的类型干细胞的应用胚胎干细胞( ES细胞)成体干细胞动物细胞培养的条件动物细胞培养的过程取动物组织单个细胞细胞悬液原代培养传代培养早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中主要应用在医学上【课堂小结】一.如图是动物细胞培养的过程图,请据图完成下列问题:1.过程处理方法有:_。2.过程为_3.培养的动物细胞有两类:悬浮在_中生长增殖;_生长增殖。4.过程为_培养,进行过程

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