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文档简介
1、 实验十七 柱色谱 一、目的与要求：1、了解柱色谱的基本原理及其一般的操作技术。2、学习用吸附柱色谱法分离色素混合物。 二、基本原理： 柱色谱可分为分配柱色谱和吸附柱色谱，本实验采用吸附柱色谱分离混合色素。 柱内装有固定相（氧化铝），将少量样品溶液放在顶部，然后让流动相（洗脱剂）通过柱，移动的液相带着混合物的组分下移。 各组份在两相间连续不断地发生吸附、脱附、再吸附、再脱附的过程，由于不同的物质与固定相的吸附能力不同，各组分将以不同的速率沿柱下移。 极性大的化合物吸附性强，吸附力较小的化合物比吸附力较大的化合物下移得快些。不同的组分移动不同的距离而形成了互相分离的层带。 三、实验步骤及注意事项
2、： （观看录像） 1、装柱（干法）： 先将少量脱脂棉装入柱的底部，轻轻压紧，然后把氧化铝慢慢地倒入柱内，并不断地用吸尔球敲打柱身，让氧化铝填充均匀，适度紧密，装柱约为2/3体积。 2、加样： 把柱固定于抽滤瓶上后，先用95%乙醇润湿氧化铝，当乙醇液面下降到与上层棉花面相平时，迅速滴入0.5mL（约10滴）甲基橙-亚甲基蓝溶液。 3、洗脱、收集与显谱： 当液面下降到与上层棉花面相平时，用乙醇冲洗，并打开真空泵减压抽至蓝色的亚甲基蓝全部被洗脱流下抽滤瓶后，待乙醇液接近棉花面时，关闭减压活塞，把滤液倒置一锥形瓶收集。并更换蒸馏水继续抽洗，并加入12滴5%氢氧化钠，把甲基橙也全部洗脱抽下，并用另一锥形
3、瓶收集。注意：柱色谱实验做完后，氧化铝回收 实验十八 薄层色谱 一、目的与要求：1、了解薄层色谱的基本原理及其一般的操作技术。2、学习用吸附薄层色谱法分离染料混合物。 二、基本原理 薄层色谱可分为分配色谱和吸附色谱本实验采用（固液）吸附色谱。 固体吸附剂是在玻璃板上铺成均匀的薄层，用毛细管将样品点在板的一端，把板放在合适的流动相（展开剂）里，流动相带着混合物组分以不同的速率沿板移动，即组分被吸附剂不断地吸附，又被流动相不断地解吸而向前移动。 由于吸附剂对不同组分有不同的吸附能力，流动相也有不同的解吸能力，因此，在流动相向前移动的过程中，不同的组分移动不同的距离而形成了互相分离的斑点。 三、实验步骤及注意事项： （观看录像） 1、铺板： 2、点样： 在离薄板底边约1cm处，用铅笔轻轻地划一条线，并划上A，B两点，用毛细管蘸取样品点于点上（A为苏丹溶液，B为苏丹-偶氮苯混合液），风干，样点扩散直径不得超过23mm。 3、展开与显谱： 先将以环己烷：乙酸乙酯=6：1为展开剂倒入方形染色缸中，加盖饱和5min，使缸内充满展开剂蒸气。 然后迅速将薄板点样一端浸入展开剂中，但样品点不可浸入，封盖。 约跑30min后，展开剂的前沿跑到薄板的3/4时，将薄板取出，并用铅笔划出前沿，晾干。确定斑点中心，测量，计算三个Rf值。薄层色谱计算三个Rf值 注意事项：1、因比色管中溶液为易挥发的苯，在点完样
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