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文档简介

1、1.2.2目的基因的导入、检测与鉴定(二、目的基因的检测与鉴定)(3月9日)答案二、课后作业1.【解析】 选。基因工程的基本工具是限制酶、连接酶和载体,前两者统称为工具酶; 在实际操作中 , 载体上插入目的基因形成重组载体,然后导入受体细胞。符合题意的只有B项2.2+【解析】选将目的基因导入细菌细胞中常用的方法是Ca 处理法,基因必须保持结构的完整性才能得以表达,而抗氨苄青霉素基因结构完整, 能够表达而使细菌具有对氨苄青霉素的抗性,在含有氨苄青霉素的培养基上能存活的是导入了质粒A 或导入了重组质粒的细菌; 于将人的生长激素基因导入质粒的四环素抗性基因上, 破坏了四环素抗性基因的完整性, 入了重

2、组质粒的细菌也没有对四环素的抗性, 在含有四环素的培养基上不能存活, 能存活的是质粒 A,故C正确;目的基因成功表达的标志是产生人的生长激素。3.【解析】 选。基因的核苷酸序列、基因的功能、基因的转录产物均可作为从基因库中获取目的基因的依据。4.【解析】选是一种体外迅速扩增片段的技术 ;农杆菌转化法是将目的基因导入物细胞最常用的方法; 用同一种限制酶分别切割载体和目的基因的目的是能够产生相同的黏性末端,便于两者连接; 利用载体上标记基因的相关特性就可检测出目的基因已导入受体细胞, 但不能确定目的基因是否得以表达。5.【解析选反应的实质是模拟体内复制, 因此需要稳定的缓冲液环境, 正确反应需要模

3、板,正确;PCR反应需要一对引物, 正确 ;PCR 反应需要以四种脱氧核苷酸为原料,正确;PCR反应需要聚合酶催化延伸过程,正确;PCR反应过程中通过高温使变性解链 ,不需要 解旋酶, 错误;PCR反应不需要限制性核酸内切酶, 错误;PCR反应过程中需要控制的关键因素是温度,因此需要温控设备,正确。6.【解析】 选 。从图示看 ,a中含有胸腺嘧啶, 故其基本骨架是磷酸和脱氧核糖交替连接而成;DNA 连接酶缝合目的基因和载体质粒之间的缝隙,使两者之间形成磷酸二酯键;若要获已知序列的目的基因,可从基因文库中寻找;若要获得相同的黏性末端,可以用不同种的限制性核酸内切酶处理,如识别 的限制性核酸内切酶

4、和识别的限制性核酸内切酶分别处理目的基因和载体质粒就可以形成相同的黏性末端。7.【解析选题图中过程A为构建基因表达载体, 需要用到限制酶和连接酶,不需要 聚合酶,选项 A错误;CaCl 2 处理只是提高农杆菌细胞的细胞壁的通透性, 选项 B错误;抗植物病毒基因整合到番茄细胞的染色体上, 不一定能表达 , 选项 C错误; 转基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通过接种特定病毒, 观察番茄是否被感染的实验进行鉴定, 选项D正确。8.【解析】 选 。标记基因是用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因,本题中将某目的基因和发光蛋白基因共同接入基因表达载体, 在将该载体转入某生物受体细胞后, 若受体细胞检测到发

5、出可见光,则说明该目的基因实现成功转入,C 项正确。9.【解析】 选。检测受体细胞中是否有目的基因, 可以利用分子杂交技术 ,正确;基因工程中不需要检测受体细胞中是否有致病基因, 错误; 检测目的基因是否转录出了可以利用分子杂交技术, 正确; 检测目的基因是否翻译成蛋白质,可以利用抗原-抗体杂交技术,正确。10【解析】选图甲中的质粒用Bam切割后 ,获得一个片段,其只含有2 个游离的磷酸基团,选项 A错误; 在构建重组质粒时,不能使用Bam切割外源因为用 Bam切割会破坏目的基因的结构,但可以用 Pst 和Hind切割质粒和外源选项B错误;用Pst和Hind切割会得到2 个片段, 再加入 连接

6、酶, 切开的质粒由于黏性末端不同,不会自身连接,从而保证重组质粒只能得到一种, 即含有目的基因和标记基因neo 的重组质粒 ,保证了重组 序列的唯一性, 选项 C正确; 由于用 Pst 切割质粒后, 其中的氨苄青霉素抗性基因已被破坏 ,所以导入目的基因的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基中生长, 选 项 D误。11解析选B 。基因探针是具有特定序列的单链作用是能检测是否含有目的基因,运了分子杂交技术;基因探针含有目的基因的片段放射性同位素标记。12.解析选 D 。基因表达的产物是蛋白质,因此,只有在受体细胞中检测或提取到了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达,、C项只能说明完成了目

7、的基因的导入B项只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过程。13解析 :选 A。A 正确,图中表示基因工程操作的流程图,过程为逆转录过程,需逆转录酶。B错误,过程为从文库中获取目的基因,不需要解旋酶。C错误,过程(导入目基因)使用的感受态细胞通过CaCl2 溶液处理获得。D错误,过程为目的基因的检测,可以利用 分子杂交技术进行鉴定。14.【解析】 本题主要考查了基因工程的相关知识。人体基因A 有内含子,将获得的基因A 导入大肠杆菌中,经过转录得到含有内含子的mRA因为大肠杆菌没有真核生物所具有的切除内含子对应的序列的机制。 内含子部对应的 mRN序列阻断了蛋白A的合成。若用家蚕作为表达基

8、因A的受体,选用昆虫病毒作为载体,不选用噬菌体作载体的原是噬菌体的宿主细胞是细菌,噬菌体不能侵染家蚕。容易培养等。要检测基因A是否翻译出蛋白最准确的方法是利用蛋白A的抗体,因抗体具有特性,一种抗体只能与特定的蛋白质结合,可根据蛋白A抗体的杂交情况来判断是否合成了蛋白。艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验中将一种生物个体的 DNA中,并表达合成了相应的蛋白质。(1) 基因 A 有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的 序列不能被切除,无法表达出蛋白 A (2) 噬菌体 噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕 (3) 快,容易培养 (4) 蛋白 A 的抗体 (5)DNA 可以从一种生物个体转移到另一种生物个体15.【解析】本题主要考查目的基因的获取方法、基因表达载体的构建方法、目的基因导入植物细胞的方法。在基因工程中, 获取目的基因主要有两大途径, 既可在核苷酸序列已知的情况下人工合成,也可用限制酶对生物材料的切割,再选取。cDNA 文库是由反转录获得的 , 其中只含有叶细胞已转录(或已表达 )的基因,而基组文库中含有该植物的全部基因。在基因表达载体中, 启动子是聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因达载体的受体细

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