糖苷演示文稿3

1、四、苷分子中苷元和糖、糖和糖之间 连接位置的确定（一）苷元和糖之间连接位置的确定 1、通过化学降解或酶解所得产物2、通过NMR谱-尤13C-NMR： 判断端基碳原子-苷化位移规律（GS） 苷元羟基的成苷碳原子（碳） 与其相邻的碳原子（碳）的信号发生位移， ，1 而其它距苷键较远的碳原子的信号几乎不变； 同时苷分子上的糖部分，其端基碳原子的信号与游离单糖端基碳信号比较，也发生了位移（苷化位移规律-GS）苷元羟基性质不同，位移方向不同醇类羟基： 苷元碳低场移(4-10ppm) 碳高场移(-0.94.6ppm)2酚类羟基： 苷元碳高场移 碳低场移比较苷和苷元碳谱-找出苷元与糖连接处33、近年2D-N

2、MR谱中HMBC谱已广泛应用可确定糖和苷元的连接位置（二）糖与糖之间连接位置的确定 化学法及光谱NMR法41、化学法：甲基化甲醇解 5苷的甲基化反应常用的方法四种： 经典两种Haworth法：试剂，较弱、需多次反 应、Purdie法：试剂，不能用于还原糖 半微量现代法两种 kuhn改良法：试剂，反应较缓慢 Hakomari法（箱守法）：试剂， 6 室温连续、反应迅速完全、无需 特殊装置。最常用。2、NMR法：应用碳谱的苷化位移规律如:苷中两单糖的连接位置,可将该糖的碳谱数据与单糖比较-内端糖连糖的碳原子会向低场移47,其相邻两碳略高移14应用HMBC谱也十分有效而常用.7五、苷中糖和糖之间连接

3、顺序的确定 -部分水解法和波谱解析法（一）部分水解法1、缓和酸水解 试剂-低浓度无机强酸或中强度的 有机酸82、全甲基化甲醇解3、乙酰解（二）波谱分析1、MS法 EI-MS中：全乙酰化、全三甲基硅 醚化物等的MS谱中，有各种特征 性的糖基离子峰，全乙酰化的单糖 及低聚糖的特征性的碎片离子峰， 可证明糖链及末端糖。9 FD-MS，或FAB-MS谱中，有各种脱去不同程度糖基的碎片离子峰，证明糖与糖的连接顺序。例如：人参皂苷Rb2(P67)102、NMR法 13C-NMR 碳原子的自旋-驰豫时间（T1）的 大小。 苷中糖的NT1随糖链距离的增加而 增加11六、 苷键构型的确定（一）利用酶水解 麦芽糖

4、酶 -苷键 苦杏仁苷酶 -苷键（二）利用Klyne经验公式进行计算计算公式：(表3-3糖甲苷分子比旋数值） 12实例：豆甾醇-D-葡萄糖的苷键构型豆甾醇-D-葡萄糖的D (旋光度)=-47.56 M=574 MD苷元=D =-50.9813MD =MD苷-MD苷元=-273.03-(-210.04)= -62.99查表可知:-D-葡萄糖甲苷的 MD =+308.6-D-葡萄糖甲苷的 MD =-66.4-62.99与-66.4接近可确定其苷键为构型14（三）利用NMR谱确定苷键构型1、1H-NMR（PMR）法：组成苷的糖上端基质子的偶合常数判断苷键的构型。可直接对苷进行测定糖上端基质子与其它质子相比较,较低场如葡萄糖苷(糖为优势构象)的透视式和部分纽曼式中152、13C-NMR法（CMR） 利用、J 值推测苷键构型 糖与苷元连接后，糖中端基碳原子 的值明显增大，其它变化不大； 某些-和-构型的甲苷中， 端基糖碳原子值常相差很大(下图)16表3-4几个-和-甲基吡喃糖端基碳的值（溶剂D2O）-大多相差4 构 型 甲基吡喃糖苷D-木糖D-葡萄糖L-阿拉伯糖 100.6100.6105.1 105.1104.6101.117利用C谱的J 值推测苷键构型 (表3-5) 几种糖甲苷和构型的JC1