口腔生态学期末复习

1、口腔生态系统的影响因素物理化学因素温度 大多属于嗜温微生物氧张力 差别大，造成口腔细菌种类复杂，主要是微需氧菌、兼性厌氧菌、厌氧菌PH值 外源性物质细菌发酵牙菌斑和唾液缓冲系统营养物质的作用 内源性营养唾液及龈沟液中成分外源性营养食物中糖、氨基酸等注：龈上牙菌斑、舌背部、颊上皮生态系内/外源性营养龈下牙菌斑生态系内源性营养宿主因素宿主不可调因素抗体 唾液中主要抗体为SIgA;龈沟液中抗体的主要种类为IgG唾液蛋白质 唾液粘蛋白、溶菌酶、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、富组蛋白年龄激素水平压力遗传因素宿主可调因素 饮食习惯口腔卫生 细菌因素细菌的黏附细菌间的作用菌斑的形成牙面上获得性薄膜的覆盖 菌斑形成

2、的基础细菌附着 蛋白质-蛋白质作用机制-1,6糖苷键的水溶性葡聚糖作为菌细胞胞外能源贮存库和引物，诱导合成不溶水葡聚糖以促进变链菌的黏附聚集与共聚集 植物凝集素糖作用机制 血链菌和黏放菌的特异性聚集 细菌的搭桥作用 内氏放线菌血链菌某些菌株龋齿罗氏菌 脂磷壁酸 葡糖基转移酶-脂磷壁酸-葡萄糖复合体各菌属、种的繁殖 菌斑成熟 成熟菌斑的标志是栅栏状结构，约出现在菌斑形成后56天，可见谷穗样结构 细菌从菌斑脱附着、传播或定植到其他部位牙菌斑的分类龈上菌斑平滑牙面菌斑 优势菌为链球菌点隙裂沟菌斑 变链菌更多；优势菌群转向乳杆菌龈下菌斑附着性龈下菌斑 G+球菌或杆菌居多非附着性龈下菌斑 主要细菌为G-

3、厌氧菌及能动菌属由牙菌斑形成简述生态连续当获得性薄膜覆盖牙面后，漂浮在口腔内的细菌随即陆续附着其上，最早定植在获得性薄膜上的是先锋菌，如血链菌；先锋菌初始定植之后出现快速生长态势，链球菌生长成链并开始与牙面垂直，导致牙表面环境的改变，进而允许新的不同种属的细菌进入发育着的菌斑，如放线菌、韦荣菌；当纤毛菌定植并取代了原先栖息在菌斑深层的链球菌，并与牙面垂直排列呈栅栏状结构，随时菌斑内氧含量减少，氧化还原电势降低，而有利于厌氧菌的生长；栅栏结构的出现标志菌斑的成熟，成熟菌斑内无论细菌的数目、组成比例均趋于稳定的极期群落状态。菌斑的基本结构基底层 无细胞的均质结构，获得性薄膜构成 中间层 丝状菌彼此

4、平行且与牙面垂直；中间堆有大亮的球菌和短杆菌表层 G+G-球菌和短杆菌，脱落的上皮，食物残屑，衰亡的细胞唾液对口腔菌群的影响唾液蛋白质的影响 黏蛋白对细菌的生长有选择性非免疫性凝集素凝集细菌，影响细菌的黏附非特异性抑制因素溶菌酶降解G+细菌细胞壁的主要结构肽糖乳铁蛋白结合铁离子，抑菌乳过氧化物酶与硫氰酸根生成次氰酸盐，抑制细菌糖酵解所需用酶富组蛋白抗真菌和抑制细菌作用特异性免疫因子免疫球蛋白，如SIgA黏附作用蛋白质-蛋白质作用机制黏性放线菌 菌毛-富脯蛋白、富酪蛋白供给细菌生长所需要的内外源性营养物质调节菌斑PH值碳酸盐、磷酸盐牙周病中牙龈胶原的变化胶原含量减少酸溶性胶原下降，盐溶性胶原无明

5、显变化机制：胶原破坏增加胶原产生受到抑制胶原类型变化型胶原的含量明显上升型胶原出现三聚体 正常胶原 1()22()型胶原的含量下降机制：不同胶原对胶原酶的敏感性不同参与胶原破坏的因素胶原酶细菌来源的胶原酶甘氨酸残基，胶原降解为小片段宿主来源的胶原酶一个作用点，分为1/4和3/4两个片段挥发性巯基复合物硫化氢；甲基硫醇牙周病时增多，是引起口臭的主要原因；抑制脯氨酸转运，降低胶原合成增加胶原对酶降解的敏感度细菌内毒素涎腺及唾液的功能分泌功能内分泌功能 腮腺素外分泌功能 下颌下腺60% 腮腺20%25% 舌下腺、小涎腺消化和营养功能协助咀嚼和吞咽直接参与消化作用维持味觉功能 提供营养维持口腔软硬组织

6、的代谢功能保护功能润滑作用清除作用维持黏膜的完整修复软组织维持牙齿矿化调节口腔菌群平衡维持口腔缓冲能力唾液蛋白质的作用保持水分润滑作用维持味觉形成软组织薄膜形成硬组织获得性膜消化作用修复软组织保护牙体硬组织调节菌斑PH值抑制微生物诊断作用口腔疾病：分泌量成分改变（涎腺疾病）全身性疾病：流率和成分（舍格伦综合症、糖尿病、乙型肝炎）药物检测测定激素、毒物水平（类固醇类）唾液黏蛋白的分类结构组成分子量疏水结构与HA亲和力意义MG11000KD有强结合牙面，参与获得性膜的形成，覆盖黏膜MG2250KD无弱细菌黏附聚集，调节菌群龈沟液的生理作用和功能生理作用：通过GCF流冲龈沟内的外来物质；具有抗微生物

7、的非特异性或特异性成分；在牙龈防御机制中，其所含补体系统可促进抗体的活化；含有可以促进上皮附着于牙面的血浆蛋白；能提供龈下细菌丰富的营养成分；提供牙石矿化物质。临床意义：作为牙周病变判定指数碱性磷酸酶-葡萄糖苷酸酶天门冬氨酸基转移酶前列腺素 生物矿化的种类与机制机制：在生物体内，钙磷等无机离子不断积累达一定饱和度，在多种生物因子的调控下通过化学反应产生难溶性盐，和有机基质中的生物大分子结合，形成机体的矿化组织形成晶核晶核生长聚集固相转化种类：生理性矿化病理性矿化再矿化牙釉质和牙本质生物矿化的比较牙釉质的生物矿化牙本质的生物矿化机制牙本质晶体诱导釉质机制的釉质结晶；釉质机制的蛋白成分降解，水和有

8、机质排除成牙本质细胞合成胶原蛋白形成前期牙本质；以此为支架形成矿物晶体沉积步骤成釉细胞分泌釉原蛋白和非釉原蛋白HA晶体形成成釉细胞后退留出间隙釉柱形成釉原蛋白减少成牙本质细胞分泌胶原蛋白合成磷蛋白磷蛋白和胶原蛋白结合或降解磷酸钙与磷蛋白结合形成HA晶体外显子、内含子的概念及其与mRNA的关系内含子（intron）：即插入序列，位于基因内部，能被转录，但在转录后，与之相应的那部分转录产物在拼接中被去掉。外显子（exon）：基因中与成熟的mRNA相对应的DNA片段，包括蛋白质编码部分、5和3末端不翻译的前导序列和尾随序列。中心法则物种的遗传信息及表型（即物种的多样化）是由DNA决定的以DNA为模板

9、，“复制”多套mRNA用于蛋白质的合成以mRNA序列为氨基酸装配蓝图，合成特定蛋白质PCR的应用PCR技术的最大特点是从微量DNA样本中大量扩增靶DNA片段分离已知基因检测微量基因遗传性疾病、肿瘤的诊断遗传性乳光牙本质致病基因的情况DSPP，即牙本质涎磷蛋白基因，位于人类染色体4q21区域内，由五个外显子组成，外显子14编码牙本质涎蛋白（DSP），外显子5编码牙本质涎蛋白的羧基部分和整个牙本质磷蛋白（DPP）；DSPP基因中，多基因位点突变导致DSP、DPP合成障碍，进而导致牙本质发育不全。口腔的非特异性免疫系统组织屏障物理屏障 口腔黏膜化学屏障 唾液、龈沟液无机盐（硫氰酸盐、硝酸盐、亚硝酸盐

10、）有机物（如糖蛋白、乳铁蛋白）天然抗体（IgM）生物屏障作用 口腔固有菌丛固有免疫细胞 细胞：粒细胞、肥大细胞、单核-巨噬细胞、朗格汉斯细胞、自然杀伤细胞固有免疫分子SIgA的功能黏膜免疫保护性被膜（与黏蛋白结合）减少微生物的黏附（抗原决定簇）增强溶菌酶和乳铁蛋白的杀菌作用抗原调节和免疫排斥调节黏膜抗原的摄取免疫排斥调节IgE的产生口腔耐受IgA介导的抗原分泌口腔黏膜防御的功能黏膜的完整性 物理屏障复杂的免疫防御机制 防御素、细胞因子黏膜上皮细胞的生理脱落 更新周期1014天相对不游走的常住免疫活性细胞 肥大细胞、朗格汉斯细胞、树突状细胞、淋巴细胞固有菌丛 生物屏障口腔免疫应答特点口腔是一个有

11、菌的环境 固有菌丛的机会致病性口腔健康与口腔黏膜的完整性密切相关 物理屏障口腔分泌液的局部免疫功能 冲洗、稀释、杀菌病变主要以局部为主，但亦可有全身表现或为全身疾病的局部表现既使病变局限的保护性反应，又造成根尖周和牙周组织损伤口腔特异性抗原物质的分类自然抗原 微生物 自身抗原 肿瘤抗原 同种异体抗原 异种抗原人工抗原甲醛甲酚、樟脑酚等刺激性较强的口腔药物龋病与免疫的关系非特异性免疫因子有机成分 黏蛋白、溶菌酶、乳过氧化氢酶、乳铁蛋白、富组蛋白无机成分 碳酸盐、磷酸盐、氟离子缓冲作用（中和牙面上细菌代谢产生的酸性物质）清除细菌及其代谢产物减少牙面的理化反应性特异性免疫因子SIgA水平低，患龋易感

12、性和患龋率增加患龋时SIgA浓度增加，龋病活动期增加显著龋病发生时，血清抗变链菌IgG和IgM升高治疗后血清IgG和IgM降低，SIgA浓度上升免疫防龋的概念和分类定义：运用人工接种的方法，使机体产生或获得特异性免疫能力，达到防龋的目的。分类：人工自动免疫产生免疫时间长；交叉免疫亚单位疫苗多肽疫苗抗特异型抗体疫苗基因工程重组疫苗核酸疫苗人工被动免疫短时间内可获得大量抗体；免疫不持久；免疫排斥异种免疫单克隆抗体鸡卵黄抗体（IgY）转基因植物抗体简述T细胞在口腔疾病中的作用消除抗原成分，预防诊治口腔疾病，切断隔离局部感染，避免引起全身感染和威胁生命免疫应答是病变局限，但同时造成局部组织的损伤，破坏

13、了正常的结构（如牙周胶原的丧失，牙槽骨吸收，结缔组织重塑）致敏T细胞介导参与超敏反应，致组织损伤，生理功能紊乱T-cell组成比例失调，功能紊乱导致自身抗体的产生，引起自身免疫性疾病T-cell可发挥抗肿瘤免疫效应T-cell过度损伤导致免疫缺陷性疾病骨源性细胞的分类及来源成骨细胞 间充质细胞骨衬里细胞 间充质细胞骨细胞 间充质细胞破骨细胞 造血系统的单核细胞成骨细胞分化基质成分的名称胶原蛋白：型胶原非胶原蛋白：骨钙素、骨涎蛋白、骨桥蛋白、蛋白多糖、激素和生长因子受体破骨细胞的鉴定抗酒石酸磷酸酶染色阳性细胞表面降钙素受体阳性可在骨表面形成骨吸收陷窝成骨细胞在骨改建中的作用（成骨细胞和破骨细胞间

14、的关系）参与破骨细胞在骨表面的附着和调节促进骨吸收因子的受体在成骨细胞表面表达，成骨细胞收到骨代谢调节因子作用后：胞体变圆，从矿化的骨表面移开分泌蛋白酶，消化骨表面类骨质合成的骨涎蛋白和骨桥蛋白含有Ary-Gly-Asp氨基酸序列，与破骨细胞中玻连蛋白受体结合，提供附着位点合成破骨细胞骨吸收刺激因子前列腺素血小板衍生的生长因子参与破骨细胞分化成熟的调节TGF-在骨形成和骨吸收过程中的作用骨沉积及骨吸收偶联过程的关键细胞激肽之一，涉及到牙周组织的迅速改建促进基质蛋白（胶原、纤维黏连素）蛋白酶抑制剂的生成减少基质金属蛋白酶的合成导致成骨细胞的分化和增殖抑制破骨细胞的形成和骨吸收力在骨改建中的作用机

15、械力引起牙周组织及细胞生物学行为的改变应变量过大或过小均会导致骨代谢处于负增长机械力引起细胞骨架的改变机械力引起骨组织中基因表达的改变原代培养细胞的特点可见细胞分裂，但不旺盛与体内原组织在形态结构和功能活动上相似细胞群是异质的细胞相互依存性强，独立生存性弱多呈二倍体核型培养细胞的体外生长环境无污染环境保持细胞生存环境无任何污染、代谢物及时清除等是维持细胞生存的基本条件。基质贴壁依赖性玻璃基质；塑料；饲养细胞（滋养细胞）；生物性基质处理培养表面；金属气体环境和氢离子浓度O2正常培养液仅为培养瓶容量的1/10CO2 PH7.27.4液相环境平衡盐溶液；天然培养基；合成培养基温度维持36.50.5

16、渗透压290310mOsm/kg细胞培养的无菌操作培养前准备所用器具和培养用液进行严格的消毒灭菌所用器具和培养用液悉数放置入操作场所，避免往返拿取培养室的消毒每日以0.2%的苯扎溴铵拖洗地板一次，紫外灯照射30分钟超净工作台使用前后以7.5%的酒精擦洗，紫外灯照射30分钟污物缸、试管架等酒精擦洗后，紫外灯照射消毒洗手和着装操作前75%的酒精消毒手与前臂无菌服、口罩、帽子每次实验后进行清洗消毒培养过程的无菌操作酒精灯、酒精棉球的准备所有操作如开启封闭瓶口、安装吸管帽、移液器头都应放在火焰就近的地方轻轻灼烧已使用与未使用的物品需分开放置不同液体吸取需要用不同的吸管不要过早地打开消毒物的包装用过的吸管应将管口朝下取材的基本注意事项：取材部位要准确无菌操作，避免污染尽快培养减少对细胞的损伤（锐器剪切分离；避免撕扯）避免组织干燥（剪切时浸泡于培养液中）对组织来源进行鉴别（制备组织雪域电镜标本，对供体情况进行记录）传代培养的过程悬浮细胞：可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用离心法后加入新培养基后再吹打分散进行传代贴壁细胞：倒去瓶中的旧培养液除去悬浮在细胞表面的碎片胰蛋白酶消化使细胞脱壁加入胰蛋白酶抑制物，防止过度消化加入血清的培养液，反复吹打制成悬液。分装，补充新鲜培养基标记，37 CO2培养箱培养。 观察细胞冻存和复苏的基本原则慢冻快融细胞冻存液的使用二甲亚砜或甘油组织工程