Chapter5灰分及几种重要矿物质元素含量的测定

1、Chapter 5 灰分及几种重要矿物质元素的测定1Section 1 灰分的测定一、概述 1. 灰分：食品高温灼烧时，有机成分挥发逸散，残留物主要是无机成分（无机盐和氧化物），称为灰分。2 2. 灰分不完全或不确切地代表无机物的总量。 从这个观点出发，通常把食品经高温灼烧后的残留物称为粗灰分（或总灰分）。3 3. 灰分的分类 水溶性灰分溶解度 水不溶性灰分 酸不溶性灰分44灰分测定的意义:（1）判断食品受污染的程度。（2）评价食品的加工精度和食品品质。5二、总灰分的测定（一） 原理样品经炭化后放入高温炉内灼烧，残留物称重后即可计算出样品中总灰分的含量。（二）灰化条件的选择1. 灰化容器：常用

2、素瓷坩埚。2. 以灼烧后得到灰分量的多少来决定取样量。铂坩埚瓷坩埚坩埚钳673. 灰化温度：一般为500 550。（1）温度太高，将引起K、Na、Cl等元素的挥发损失，磷酸盐、硅酸盐也会熔融，将碳粒包藏起来，使元素无法氧化。（2）温度太低，则灰化速度慢，时间长，不易灰化完全，也不利于除去食物吸收的CO2。4. 灰化时间：一般不规定灰化时间，而以灼烧至无碳粒存在，并达到恒重为止。8（三）操作方法入干燥器冷却30 min不恒重恒重结果计算马福炉、瓷坩埚的准备灰化样品称样品灰化2 h取出91. 马福炉、瓷坩埚的准备 （1）马福炉的准备 （2）瓷坩埚的准备：选取合适大小的坩埚用HCl煮1 2 h，洗净

3、凉干编号，置于马福炉中灼烧2 h，移至炉口冷却到200左右后，移入干燥器中冷却至室温，准确称量，重复上述步骤直至恒重。102. 样品的预处理：可用测定水分之后的样品。（1）水分含量较少的样品，粉碎均匀后可直接称取、炭化；水分含量较多的样品，需先于烘箱中干燥至一定程度后再炭化。 （2）液体样品需先在水浴上蒸干后再炭化。（3）富含脂肪的样品需先提取脂肪后再测灰分。113. 炭化 炭化时，半盖坩埚盖，小心加热使样品在通气情况下逐渐炭化，直至无黑烟产生。 注意：热源强度，以防温度高，试样中水分急剧蒸发使样品飞扬； 对含糖多、含蛋白多、 易发泡膨胀的样品，可在样品上加数滴辛醇或纯植物油，再进行炭化 ，防

4、止高温下发泡溢出；减少碳粒被包裹。124. 灰化 炭化后，把坩埚移入已达规定温度的马福炉口，稍停片刻，再慢慢移入炉膛内，以下操作同求坩埚恒重时一样，至恒重。13（五）Calculation100 %灰分 =m1空坩埚质量，g m2样品 + 空坩埚质量，gm3残灰 + 空坩埚质量，gB 空白试验残灰重，g14（六）Announcements1. 坩埚放入马福炉中时，要在炉口停留片刻，使坩埚预热，防止温度剧变而破裂。2. 灼烧后的坩埚应冷却到200以下再移入干燥器中。防止温度剧变而破裂；防止因热的对流作用而造成的残灰飞散。15（六）Announcements3. 从干燥器中取出坩埚时，因内部成真空

5、，开盖恢复常压时应让空气缓缓进入，以防残灰飞散。4. 液体样品需先在水浴上蒸干后再炭化，以防炭化时液体沸腾易造成溅失。165. 加速灰化的方法 有些样品难于灰化，如含磷较多的谷物及其制品，灰化过程中易形成呈熔融状态的KH2PO4、NaH2PO4包住C粒，使灰化很难达到恒重。对这类样品，可采用下述方法加速灰化：171. 样品经初步灼烧，取出冷却，从灰化容器边缘慢慢加入少量无离子水，使水溶性盐类溶解，被包住的C粒暴露，蒸干后再灼烧至恒重。2. 样品经初步灼烧，加入几滴HNO3、H2O2、H2SO4 ，利用氧化作用加速C粒灰化，蒸干后再灼烧至恒重。183. 灼烧时加入(NH4)2CO3等疏松剂。 (

6、NH4)2CO3灼烧时分解为气体，使灰分呈松散状态，促进灰化。4. 灼烧时加入 MgAc2、Mg(NO3)2等助灰剂。这类镁盐随灰化而分解，与过剩的磷酸结合，残灰不熔融，呈松散状态，避免碳粒被包裹，可缩短灰化时间，但会产生MgO，增重，应做空白试验。19Section 2 几种重要矿物元素的测定一、概述（一）矿物质元素的分类1. 从营养角度分为必需元素、非必需元素和有毒元素。20 有毒元素：目前尚未能证实对人体有生理功能，或者正常情况下人体只需要极少的数量或者人体可以耐受极少的数量，剂量稍高即可呈现毒性作用的元素，如Hg、Cd、Pb、As等，其在体内不易排出，有蓄积性，半衰期都很长。212.

7、从人体对其需求量分为常量元素（含量0.01%，如Ca、Mg、K、Na等）和微量元素（含量0.01%，如Fe、Zn、Co、I等）。 缺Fe会得缺铁性贫血；Fe过多会得“血色病”。缺Zn会出现味觉减退，厌食，发育不良等； Zn过多会得胃肠炎。22（二）矿物质元素的来源Animal foodMeats：Na、K、Fe、P含量较高，Cu、Co、Zn含量较少，以可溶性氯化物、磷酸盐形式存在，或与蛋白相结合。 Milk：主要含Ca，也含有少量的Na、Mg、P等。Eggs：含人体所需的各类矿物质。Plant foodFruit：K含量高，大部分与有机物结合，常以草酸盐、磷酸盐的形式存在。 Beans：矿物质

8、含量最丰富，K、P、Fe、Mn、Zn等含量均较高，其中P主要以磷酸盐的形式存在。Cereals：矿物质含量较少，主要存在于种子外皮。23二、钙的测定 EDTA （乙二胺四乙酸二钠）滴定法（GB/T 5009.92-2003）钙是构成机体骨骼、牙齿的主要成分。含钙较多的食品：乳及乳制品、豆及豆制品、排骨、虾皮等。其中，乳及乳制品不但含量丰富，而且吸收率高。24钙的吸收率取决于维生素D的摄入量及受太阳紫外线的照射量，同时也受膳食中钙含量及年龄的影响。蛋白质、氨基酸、乳糖、维生素有利于钙的吸收；脂肪、镁含量过多不利于钙的吸收；草酸（菠菜、韭菜、苋菜等蔬菜中含草酸量较高）、植酸或脂肪酸的阴离子能与钙生

9、成不溶性沉淀，影响钙的吸收。25中国营养学会制定钙每日摄入量为800 mg，但全国人均不足。长期缺钙：可导致儿童生长发育缓慢，骨软化、骨骼变形，严重缺乏者可导致佝偻病；中老年人易患骨质疏松症；易患龋齿，影响牙齿质量；钙还参与凝血过程和维持毛细血管的正常渗透压，并影响神经肌肉的兴奋性，缺钙时可引起手足抽搐。26过量钙的摄入可能增加肾结石的危险性。目前，钙营养强化剂有如下三代产品：第一代，主要以无机盐为主，主要形式为磷酸钙和碳酸钙。第二代，主要以有机盐为主，如乳酸钙、醋酸钙、葡萄糖酸钙、柠檬酸钙等有机钙盐。第三代，具有生物活性结构的有机酸钙，如L - 苏糖酸钙、 L - 天冬氨酸钙及甘氨酸钙。27

10、（一） 原理在pH 13 14的含钙溶液中，同时有氰化钾和柠檬酸等掩蔽剂消除干扰离子的影响，首先钙红指示剂与溶液中钙络合成酒红色，滴入EDTA，形成更稳定的EDTA - Ca络合物，钙红指示剂变成蓝色游离状态，终点时溶液呈纯蓝色，根据滴入的EDTA量和它的滴定度即可算出样液中钙的含量。28（二） 操作步骤1. 试样制备：精确称取适量试样于烧杯中，加适量硝酸 - 高氯酸（4：1）混合酸消化液，上盖表面皿，置于沙浴上加热消化至无色透明为止，加几毫升水，加热以除去多余的硝酸。待烧杯中液体接近2 3mL时，取下冷却。用氧化镧溶液冲洗烧杯并将洗液移于10 mL刻度试管中，定容至刻度，备用。292. 取相

11、同量的硝酸 - 高氯酸（4:1）混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。3. 标定EDTA：吸取0.5 mL钙标准溶液，以EDTA滴定，标定EDTA的浓度，根据滴定结果计算出每毫升EDTA相当于钙的质量（mg），即为滴定度（T）。304. 试样及空白滴定：分别吸取适量试样消化液及空白于试管中，加1滴10 g/L氰化钠溶液和0.1 mL 0.05 mol/L柠檬酸钠溶液，用滴定管加1.5 mL 1.25 mol/L氢氧化钾溶液，加3滴钙红指示剂，立即以稀释10倍的EDTA溶液滴定至指示剂由紫红色变蓝为止。31（三） 计算x = m T（V - V0）f100 x ：试样中钙含量，mg/100

12、g；T：EDTA滴定度，mg/mL；V ：滴定试样时所用EDTA的量，mL ；V0：滴定空白时所用EDTA的量，mL；f：试样稀释倍数；m：试样质量，g。32（四）说明 试样制备过程应特别注意防止各种污染。所用设备如电磨、绞肉机、均浆器、打碎机等必须是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品。鲜样用自来水冲洗干净后，还要用去离子水充分洗净。干粉类试样取样后立即装容器密封保存，防止空气中的灰尘和水分污染。33三、铁的测定 邻菲罗啉法铁是人体必需的微量元素，是人体内血红蛋白和肌红蛋白的组成成分，参与了血液中氧的运输作用，又能促进脂肪氧化。中国营养学会推荐成年男子12 mg/d，女子18 mg/

13、d。铁缺乏会引起低色素性贫血和血浆水平低下等病症，铁过量会引起血红症等疾病。34肉、蛋、肝脏和果蔬中均含有丰富的铁。食品在贮存过程中常由于污染了大量铁而使之产生金属味，色泽加深并导致食品中脂肪氧化和维生素D分解，造成食品品质降低，影响食品风味，所以食品中铁的测定不但具有卫生意义而且具有营养学意义。35（一）原理邻菲罗啉亦称邻二氮菲，在酸性条件下能与Fe2+作用生成橙红色络合离子，在510 nm波长下有最大吸收，其颜色强度与铁离子含量成正比。36（二）实验步骤 测量波长的选择：用吸管吸取铁标准溶液，注入比色管中，加入盐酸羟胺溶液（？），摇匀，加入邻二氮菲溶液，溶液（？），以水稀释至刻度。采用试剂

14、溶液为参比溶液，在440 560 nm间，每隔10 nm测量一次吸光度（在最大吸收波长处，每隔2 nm），选择测量的适宜波长。37加盐酸羟胺的目的：铁常以Fe2+和Fe3+的混合形式存在，Fe3+能与邻菲罗啉生成淡蓝色配合物，而Fe2+与邻菲罗啉生成稳定的桔红色配合物， 络合更为完全，所以在加入显色剂之前，应在酸性溶液中加入盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+，消除强氧化剂的影响，再进行铁总量的测定。添加NaAc溶液的目的：调整反应液pH值至酸性。382. 显色剂用量的选择：在6支比色管中各加入铁标准溶液和盐酸羟胺溶液，摇匀。分别加入0.1, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0及4.0 mL 0

15、.15%邻菲罗啉溶液，5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。采用试剂溶液为参比溶液，测吸光度。以邻菲罗啉溶液体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度 - 试剂用量曲线，从而确定最佳显色剂用量。 393. 铁含量的测定（1）标准曲线的制作：分别往6支比色管中加入0.0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 mL 100 g/mL铁标准溶液，再加入盐酸羟胺，邻菲罗啉和NaAc，以水稀释至刻度，摇匀。以试剂空白为参比，在512 nm处测吸光度A。（2）试样测定：准确吸取适量样品三份，按标准曲线的操作步骤，测定吸光度。40（三）实验结果与分析1. 测量波长的选择波长(nm)48

16、0490492494496498吸光度 A0.34780.36450.36860.37680.37680.3788波长(nm)500502504506508510吸光度 A0.38090.38720.39790.38620.38720.4001波长(nm)512514516518520530吸光度 A0.40670.40340.40010.39790.38820.3188412. 显色剂用量的测定：（=512 nm）邻菲罗啉的体积(mL)0.10 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 吸光度 A 0.07010.29160.43890.4450.44250.4342423. 食品中

17、铁含量的测定（1）标准曲线的制备铁标液体积(mL) 00.2 0.4 0.6 0.8 1.0 铁浓度(g/mL) 00.4 0.8 1.2 1.6 2.0 吸光度 A 00.07060.17850.23810.38620.4191据上面数据，作得标准曲线为y = 0.2216x - 0.0061，R2 = 0.98。43（2）试样的测定 把y = 0.0851, 0.1244代入标准曲线方程 y = 0.2216x - 0.0061，得到x = 0.4116, 0.5889，即样品中铁的含量为0.4116 g/mL, 0.5889 g/mL。未知样标号12样品液的体积(mL)1.0 1.5 吸

18、光度A0.08510.1244样品中铁的含量(g / mL)0.41160.588944 结论：通过实验数据可知，最适宜波长为512 nm；邻菲罗啉(0.15%)的适宜用量为2 mL；最终由标准曲线得样品中铁的含量为0.5 g/mL。45（四）说明强氧化剂、氰化物、亚硝酸盐、焦磷酸盐、偏聚磷酸盐及某些重金属离子会干扰测定。经加酸煮沸可将氰化物及亚硝酸盐除去，并使焦磷酸盐、偏聚磷酸盐转化为正磷酸盐以减轻干扰。3. 水样有底色，可用不加邻菲罗啉的试液作参比，对水样的底色进行校正。464. 邻菲罗啉能与其中某些金属离子形成有色络合物而干扰测定，但在乙酸 - 乙酸铵缓冲溶液中，不大于铁含量10倍的铜、

19、锌、钴、铬及小于2 mg/L的镍，不干扰测定。当含量再高时，可加入过量显色剂予以消除。汞、镉、银等能与邻菲罗啉形成沉淀，含量低时，可加入过量邻菲罗啉来消除；含量高时，可将沉淀过滤除去。47四、碘的测定 氯仿萃取比色法碘是人体必需的微量元素之一，是人体内甲状腺球蛋白、甲状腺素的重要组成成分。甲状腺素能能够调节体内新陈代谢，促进身体的生长发育，是人体正常健康生长必不可少的激素之一。48人体对碘的日需要量为100 150 g。身体缺碘时，会发生甲状腺肿大，甲状腺素的合成减少甚至缺乏，可使人产生呆小症。食品中碘含量最丰富的是海产品，如海带、紫菜、海参等。49（一）原理样品在碱性条件下灰化，碘被有机物还

20、原成I-，I-与碱金属离子结合成碘化物，碘化物在酸性条件下与重铬酸钾作用，定量析出碘。当用氯仿萃取时，碘溶于氯仿中呈粉红色，当碘含量低时，颜色深浅与碘含量成正比，故可以比色测定。Cr2O72- + 6 I- + 14 HI 2 Cr3+ + 10 I2 + 7 H2O50（二）实验步骤1. 样品处理：准确称取样品于坩埚中，加入KOH溶液（？），烘干，电炉上碳化，然后移入高温炉中，在460 500下灰化至呈白色灰烬。取出冷却后加水，加热溶解，过滤，用热水分次洗涤坩埚和滤纸，洗液并入容量瓶中，以水定容至刻度。512. 标准曲线绘制：准确吸取10 g/mL碘标准溶液0.0, 2.0, 4.0, 6.

21、0, 8.0, 10.0 mL分别置于分液漏斗中，加水至总体积为40 mL，加入浓H2SO4，重铬酸钾溶液，摇匀后静置30 min，加入氯仿，振摇1 min，静置分层后通过棉花将氯仿层过滤至比色皿中，在510 nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。523. 样品测定：根据样品含碘量高低，吸取数毫升样液置于分液漏斗中，以下步骤按标准曲线制作进行，测定样液吸光度，在标准曲线上查出相应的碘含量（g）。53（三）计算碘含量（g/100g）=100mVm1V0m1：在标准曲线上查得的测定用样液中的碘量，g；V0 ：样液总体积，mL；m：样品质量，g；V：测定时吸取样液的体积，mL。54（四）说明1. 灰化

22、样品时，加入KOH的作用是使碘形成难挥发的碘化钾，防止碘在高温灰化时挥发损失。2. 样品灰化后一定要用热水分数次洗涤并过滤，避免碘的损失。3. 本法操作简便，显色稳定，重现性好。55六、铅的测定 双硫腙比色法（一）原理 在加入掩蔽剂后，调节pH为8.5 9.0，铅离子可与双硫腙形成可溶于三氯甲烷的红色双硫腙铅，根据三氯甲烷呈现颜色与标准比色，510 mm处测定。56（二）操作步骤 吸收适量样液于分液漏斗中加适量柠檬酸铵、盐酸羟胺、酚红指示剂用浓氨水调pH为8.5 9.0加适量氰化钾 摇匀加适量双硫腙氯仿应用液摇动后分层将氯仿层放入干净的比色管中510nm测定吸光度 从标准曲线上查出相应铅含量。

23、57（三）说明1. KCN是剧毒药品，操作时不能用嘴吸，使用后要洗手，且不能与酸接触以防产生氰化氢气体而中毒。向浓KCN溶液中加入NaOH和硫酸亚铁使它生成氰氢化钾，可降低KCN的毒性。58（三）说明2. 采用双硫腙法测Pb，干扰离子有Fe3+、Sn4+、Cu2+、Cd2+、Zn2+等。加入盐酸羟胺使 Fe3+Fe2+，可避免因Fe3+ + 3 CN- Fe(CN)3高铁氰化物，氧化双硫腙。3. 加柠檬酸铵的目的是阻止碱性条件下金属离子与碱生成金属离子的氢氧化物。59（三）说明4. 本法适用于测定天然水和废水中微量铅。测定铅浓度在0.01 0.30 mg/L之间。铅浓度高于0.30mg/L，可对样品作适当稀释后再进行测定。60七、总砷的测定 银盐法砷广泛存在于自然界，几乎在人类所有食品中都有，各种食品及饮水中允许含量，各国都有规定。三氧化二砷