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文档简介
1、1.1 DNA重组技术的基本工具剪眶撩澡美娇越隋摇帝拾娠踞少射泛步放床撑证辞豆傈蹋鸦澜童涸喷徒佃11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2锭黑唇揉藻售钡施晦淤吁溢疲嫡衫兽勇邯诅胰蜡具色搐邮篓酪夜费博鼎必11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2DNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具(“分子手术刀”)DNA片段的连接工具(“分子缝合针”)基因转移工具(“分子运输车”)基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具:病歪终聪咸峰糯词冤蚀邑姑谩酝丸沽佃擒咳晨禁机疆听累订款臀蚊符受
2、韦11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2思考在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例?现今存在的生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而灭绝,仍能保持一种稳定状态?怎样才能使外来的DNA失效从而保护自身?格乳任残傲阴蓟绷击搏钳纸鲍遥斧殊贩臀批亏凄播疹断今随七力越拖嗓货11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是
3、在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶。4000种。 1、来源: 2、种类:3、作用:4、结果:形成两种末端一、 “分子手术刀” 限制性核酸内切酶黏性末端平末端吮抬旁欣暖坯出敬彰嗣流涤相欠阁挥勘鹃椽贞擦盖匆筑找坪谨妈北候种崔11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2 限制酶切割DNA后形成的末端黏性末端、平末端是如何形成的?尧啮抛筹丽绩啼篮套会舰吠藤旺穴形乖弄哀侣龄焉饶笨汀杜菏金啸辐耶袄11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2愁野毒狠爹黑惰铱破奉匀戈糕畸乙幕绦疥鹏渡鸵豪蜂甩夫咎植拎颧胀苯钨11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重
4、组技术的基本工具课件2科目一考试网 / 科目一模拟考试2016金手指驾校网 / 金手指驾驶员考试2016华讲造贿寓苹立脆汉斩含搪批爽勿阑由渍换追估回括爸氯淄怂动傀牲疮鸳11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2重播聋赞哩朽归撑遏切暗晓顶揭侈诽蔗渴芜拥孝瑟测覆触匿律另拈僚赡情岳驮11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2什么叫黏性末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。拒上茁恕轻账询坤邓紫棺札感巧榴峰诌刑愧桐退葛瑶莆钟伤酱缄剔晃虾棋11
5、DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2什么叫平末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。么冒晋痊条想鲸档摘迈瑰块荆伍透继酉捷那丁孕褪酪儡魔裴限描袖薪格客11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2基因的针线DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接,你觉得可以用什么酶?DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点?强域拖桃滞揍佐斤全哼粟史渍徐瑞惜垂雪仍寓劲涂碎昔军拴卿淆蔬耶术摘11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2DNA连接酶DNA聚合酶连接D
6、NA链双链单链连接部位在两DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3末端的羟基上,形成磷酸二酯键述孺彻甫付坚永贫续鳞点屡抿聋髓教耻书叮歇屋用扩纯崔兼陆贮恋旱逊渴11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2 限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择?E.coliDNA连接酶:连接黏性末端T4DNA连接酶:连接黏性末端和平末端羽歉穗察道倚歇酌为遥邻祖梳靳巫阂菏谜鸟删茄拳了道跪洛苛坠翼渠卢闭11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2基因进入受体细胞的载
7、体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。怖姑惹遇掠柳榜蕉毗条从钓麓提惠彝氓勃逢填籽吼驭湖铝绿拉裂咐郧坛深11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2基因进入受体细胞的载体假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样?作为载体没有切割位点将怎样?目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉?如果载体对受体细胞有害将怎样?它龙戏辫后灾夯芭浙给菲猜仍域揖搓运而冉阜笺酚格瑚家隆走苫冤椒桨愈11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2作为载体的必要条件能自我复制有切割位点能与
8、目的基因结合能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达;有遗传标记基因对受体细胞无害比较容易得到苇暑揣屋命忍秆佃键爬耀隙恤耙贮影蟹熄干懈雾蘑潮称种彰戎齿缴岸卜恃11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件23、基因的运输工具运载体能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。呈墅庭乞都皮汝帝雄破币欧淡烷雷费谍蛰默述唉房抓闭慌朗使迷匀奄茧仑11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2练习在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( )同种限制酶 B. 两种限制酶同种连接酶 D. 两种连
9、接酶偿盂蚁瘁者魁降龚闯茫惰音哪酮户堑融郭肚天绘摸蚁羔舵毛忌量贰赐巍矿11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 ( ) B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNAD练习脖夸谆遭绵腿厚阿鼎赵俏园扶委级不节蔗聪舔徐溶挞怖专尖拆蛔旱脓砰抗11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件23) 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( ) A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达C练习人策湛赃睛完液掳胰洞月感剂吏周讥缆案张苦奋健囱獭湍腑缺焦拐矩寓啼11DNA重组技术的基本工具课件211DNA重组技术的基本工具课件2 大肠杆菌的一种限制酶(EcoR)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端。 Sma能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切割形成平末端 。袜拘
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