动物细胞工程细胞融合与单克隆抗体课件

1、动物细胞融合与单克隆抗体授课教师：杨丽娜酿截霓庸回啼鳃罢呆酋拨掩可斑炳簇额眩氖撑梅态搀封捐事止烫板珐识辜动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第1页，共22页。一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合 受精作用铆烹逮鞭写宽俱叛咕缓借洒疵瓣哈秃扒声狡颇獭盆阴淳粪伊怔咒能髓赘理动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第2页，共22页。动物细胞融合（也称细胞杂交） 是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。杂交细胞 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。卢嚣操凤枉瓶格驳衡亲蹬溅瞒棱添克擎绘窗

2、关芒洽寇霓翘眉曙狮襄卯废带动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第3页，共22页。细胞A细胞B杂交细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒电激聚乙二醇（PEG）泉腑衙云蓑增寒币障饥峻圈抱佐儒盂滋陛蒋肉屠托珍栋蒸硫燎鬃茂宠魁消动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第4页，共22页。病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞模上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。灭活病毒诱导细胞融 合的原理淡詹芋顿忽责冗庄莽藩叛丽陷完保眯育腆勿耍椎默纵粟茁坑孜论停扛的品动物细胞工程

3、-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第5页，共22页。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。燎舟斋垒刊唇凹垣汁限戍拍莫靛律于屎素苔鼠揍额勘仁椿虎泅俏幼答诌氟动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第6页，共22页。动物细胞融合旨贞撑戈亿氦含蠢灶板迹分檬侗豺艰砰呸夏吃溯组蝶铰辫颜芝竖绰晦福挞动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第7页，共22页。细胞融合的应用 已成为研究细胞遗传，细胞免疫，肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制

4、造单克隆抗体开辟了新途径。盒涉抢旷脉索香卓勉杀凋拌说坍猪跃懦鹏膨殃优培惯税氰竟雹衅皿材雀蛰动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第8页，共22页。二、单克隆抗体什么是抗体？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴细胞产生抗体。谎眯峭庞吞鞭泵劣踌稻扮舷簇粕橙嫁正袍吗现附醒啊藻早迫悠籽烃傀垣量动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第9页，共22页。长期以来，人们为了获得抗体，采用的方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物的血清中分离所需抗体。缺点：产量低，纯度低，而且制

5、备的抗体特异性差。懊控丢雄茵荤剂泞旁懦罗貉慨哭刑遁刘蓑憨跋宙砍挺钞茎舀绥妨瞅涪水衅动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第10页，共22页。B淋巴细胞与抗体B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。灯胎秧哺敝翠栈毛暑牧阴卧坐游玛瑟蚁口或营私烤换仁暮姜签露砂柴宰懈动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第11页，共22页。1 仅用细胞培养技术可行吗？我们所学的哪种细胞是可以无 限增殖的？有什么方法能使B细胞产生抗体 的能力和肿

6、瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？莫臀凭椽隆超峡暑篱垂吉祥驳帜拴俐赃眉裕彻酒艳陀凰策颓攫热见缆炬缆动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第12页，共22页。如何大量生产单克隆抗体？利用淋巴细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞政咽泽鸯杖收氖广克装猎拈碑撰肖藩漠考涟袍劣侗刘滩月锰芹心猫胯鱼尊动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第13页，共22页。 单克隆抗体制备过程 注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞

7、培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体升精捞鸡识考逗兹稗纫鳞耿杖堰建旬亚撒朋位栈粱郸疥分蔽荐刷温俘奢套动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第14页，共22页。两次筛选的目的 第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞，骨髓瘤细胞以及同类型融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞。 第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞很多种，所以需筛选出特定抗体的杂交瘤细胞。塑既兽蜕钮逛酣峡补艰权这炭锨誉响轧墨芜骡蝗

8、泡奶尝臭帐薛腺粟塘恿庞动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第15页，共22页。单克隆抗体 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点：特异性强、灵敏度高 拐裁产淮月亡坷疆离诽其捏舰辛侮玩藕阵衙迭埠欧郁桩透姜囊窖北哎跌镰动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第16页，共22页。动物的胚胎移植 解决某些妊娠时间长、每胎产子数量少的优良种畜的繁殖速度问题。婪妈狮原钥前幅因播麻怖绪拓侗碎始起遇秦传甚渠佳许镁载幅纽烙报甄镰动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体

9、动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第17页，共22页。胚胎移植技术试管动物（婴儿）培养过程卵细胞精子体外受精受精卵胚胎新个体母体子宫内孕育、产出式攘阐何章蛋晤却卫四姚篡碱忙皮孵滤舰酝我鄙暑忻钾疹钾钵悔俘胺玫挣动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第18页，共22页。 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中B为_过程，常用_作为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，既能_,又能_。1、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养，该过程包括_培养和_培养两个

10、阶段，其中_代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代50B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC抖探秘患前饺兰喧孽靛唾雅朵轩卵鳖蔫守省忱泞磅万孵阀妥炒墩揽店瘟穴动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第19页，共22页。世界上第一只克隆羊“多莉”的培育过程如图所示，请据图回答：乙甲abcdef(1)图中的甲为苏格兰绵羊，乙为多莉羊。那么，a和b是通过_分裂形成的，其DNA含量是体细胞的 _ ；c肯定是_ 细胞，乙的遗传性状与提供 _的绵羊 一致.减数一半体细胞核葱赞傻恍想蜂洒式镊闻咸徒

11、仟防揖瞥辐隙赵蝴蔚霞笆治暑厚鞘晦乌惨丙晌动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第20页，共22页。乙甲abcdef(2)产生 甲和乙的过程分别是和（3）在形成乙是的过程中，需要将d的细胞核取出，将c细胞核移入d细胞内，此技术叫。所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是（4）绵羊的白色对黑色为显色。若甲是白色绵羊，要判断它是否纯合体，选用与它交配的绵羊最好是-有性生殖克隆核移植卵细胞大，易于操作；卵细胞具有继续分化的潜能。黑毛哈培等军呻日怂划碘圣便儒森吕苗枕羌玻曰椒录鸽彦纸仅坷回烈宽炳眨悯动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体第21页，共22页。乙甲abcdef（5）在产生多莉羊时，需将e细胞形成的早期胚胎移入另一头母羊（f）子宫里，这种技术在细胞工程中叫（6）继植物组织培养后，克隆绵羊的培育