免疫学教学课件第16章基于抗原抗体反应的免疫学试验技术

1、第十六章基于抗原-抗体反应的免疫学试验技术第1页，共50页。抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应。抗原抗体反应既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发生；也可在体外作为免疫学实验结果的出现。第2页，共50页。第3页，共50页。在体内，可表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免疫病理损伤；在体外，依相应抗原物理性状（颗粒状或可溶性）以及反应的条件（电解质、补体等）不同，可出现凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应。第4页，共50页。一、抗原-抗体反应的一般规律 抗原-抗体反应的特异性； 抗原-抗体反应的比例与结合物的可见性； 抗原-抗体反应的可逆性； 抗原-抗体反应的

2、阶段性；第一节 抗体-抗原反应概论第5页，共50页。抗原-抗体反应的特异性第6页，共50页。第7页，共50页。第8页，共50页。抗原-抗体反应的比例与结合物的可见性；第9页，共50页。第10页，共50页。网格学说：大多数天然抗原是多价，抗体大多为两价，在一定浓度范围内，当抗原和抗体分子比例合适时，可相互连接成为巨大网格状聚集体，形成肉眼可见的沉淀物。但当抗原或抗体过量时，由于其结合价不能相互饱和，就只能形成较小的沉淀物或可溶性抗原-抗体复合物。第11页，共50页。第12页，共50页。抗原-抗体反应的可逆性抗原和抗体的结合是可逆的。两者的结合的稳定性取决于分子间包括氢键、静电引力、范德华力和疏水

3、键等多种共价作用。第13页，共50页。第14页，共50页。第15页，共50页。第16页，共50页。抗原-抗体反应的阶段性第17页，共50页。第18页，共50页。二、抗原-抗体反应的影响因素与制定原则第19页，共50页。第20页，共50页。第21页，共50页。第22页，共50页。三、抗原-抗体反应的应用医学领域；农业领域；基础生命科学领域；第23页，共50页。第二节 抗原-抗体反应类型第24页，共50页。一、凝集反应第25页，共50页。第26页，共50页。第27页，共50页。第28页，共50页。2、间接凝集反应第29页，共50页。第30页，共50页。第31页，共50页。3、间接凝集抑制试验可溶性

4、抗原与相应的抗体充分结合后，再加入抗原致敏的免疫微球，此时因抗体已被可溶性抗原结合占用，不能再与免疫微球上的抗原结合而产生凝集现象。第32页，共50页。第33页，共50页。第34页，共50页。4、SPA：金黄色葡萄球菌蛋白A第35页，共50页。第36页，共50页。5、第37页，共50页。抗球蛋白试验第38页，共50页。第39页，共50页。第40页，共50页。 沉淀性反应是指可溶性抗原与相应抗体在合适的电解质的条件下，发生特异结合并形成可见的免疫复合物沉淀。参与反应的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。 单向免疫扩散； 双向免疫扩散； 火箭免疫电泳； 对流免疫电泳； 免疫电泳；二、沉淀性反应第41页

5、，共50页。1、直接补体结合试验；2、间接补体试验；三、补体参与的反应1、病毒中和试验；2、毒素中和试验；四、中和反应第42页，共50页。用荧光素、放射性核素或酶等示踪物质标记的抗体（或抗原）进行抗原-抗体反应，标记物与抗体（或抗原）的化学联结不会改变抗体（或抗原）的免疫学特性，同时标记物的特性依然存在，使检测灵敏度大大提高，可以对微量物质进行定性、定量或定位检测。五、免疫标记技术第43页，共50页。免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物，与抗体或抗原联结，相应的抗原或抗体作用后，此时加入酶作用的底物，通过酶的催化作用，使无色的底物水解、氧化或还原反应，形成有色的可见物质，表面酶存在，进一步证明了相应抗原和抗体的反应。（一）、免疫酶技术第44页，共50页。第45页，共50页。第46页，共50页。第47页，共50页。免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色