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文档简介
1、第一章.生殖生理在正常的发育过程中,雄鼠出生后23-25天睾丸开始下降,30-35 口龄进入阴囊,45-60天产生精子,60 口龄以后就可交配。雌鼠一般在70-75 龄阴道开II,同品种品 系开II时间不同,有的50 口龄即开口,达80日龄即可交配。过早交配,增加雌鼠负担, 对子代发育不利。大鼠最适交配日龄为雄鼠90 口龄,雌鼠80日龄。12性周期大鼠的发情不受季节温度的影响,具有多发性、周期性的变化规律。大鼠性周期为4-5天。 在此周期内,生殖系统发生一系列组织学的变化,可作阴道涂片检查。根据阴道上皮细胞 的变化,典型的4 口性周期分为发情前期、发情期、发情后期和静止期。表二:大鼠性周期阶
2、段阴道涂片发情前期阴道分泌物中大部分是膨大椭圆形扁平上皮细胞。此期约持续17-21小时,当口下午出现排卵前促性腺激素高峰, 从傍晚到深夜,此期结束。发情期膨大的上皮细胞核消失,成为鳞状脱落(角化上皮细胞并聚集在一起形成堆 状,镜下好象许多落叶堆叠在一起。在情前期过渡到发情时(即深夜)发生排卵,此时大鼠 的发情行为达高峰,此期约持续9-15小时。发情后期阴道分泌物中大部分是白细胞,混有少量角化上皮细胞,此期约持续10-14小时。静止期阴道分泌物中大部分是白细胞,偶尔可见较小的有核扁平上皮细胞。此期约持续60-70小时。大鼠排卵通常在发情后8-10小时,发情多在夜间。排卵通常是自发的,但强壮的雄
3、鼠能强迫雌鼠在非发情期接受交配,促进排卵怀孕。黄体的形成及其发育是在发情后期,这 时卵子己进入输卵管内。在发情静止期,卵泡又开始发育。13生殖能力雌鼠产仔的多少,取决于品种、胎次、饲养管理的好坏和雌鼠的年龄、体质。一般情况下, 适龄雌鼠第1-5胎产仔多,第6胎以后逐渐减少。每胎可产仔8-13只,最多可达产仔20 只,如SD大鼠。饲料的营养成分对大鼠的生殖能力也有一定影响。当饲料内缺乏维生素E时,大鼠即 丧失生殖能力,特别是雄鼠,可终身丧失,如补喂维生素E,雌鼠可以恢复其生殖能力。温度对大鼠的生殖能力也有影响,当饲养室内持续高温(30 C以上)可降低雄鼠的 交配能力。1.4 .交配雌性大鼠只在发
4、情期的数小时内允许雄鼠交配。雌鼠被雄鼠反复追逐之后才接受交配。交配 后,雌鼠的阴道I】形成一种特殊的膛栓即阴栓。阴栓是雄鼠的精液、雌鼠的阴道分泌物与 阴道上皮细胞的混合物遇空气后迅速变硬形成的。阴栓一般在交配后12-24小时左右自动脱 落。所以,常把检查阴栓的有无作为判断是否交配的重要标志。妊娠和分娩大鼠的妊娠期因品种不同略有差异,一般为19-21天。孕鼠受惊吓往往造成流产或早产。大 鼠的分娩昼夜均有发生,但以夜间居多。孕鼠临产前一般表现不安状态,常常不停地整理产 窝,随着子宫收缩将仔鼠娩出。分娩结束后约12-24小时母鼠出现产后发情,此时若与雄鼠 交配,多能受孕。1.6 .哺乳和离乳通常,根
5、据雌鼠体质确定带仔的多少,一般8-10 Ro对带仔不足8只的,可将其它产窝多 余的仔鼠移入窝内代乳,代乳效果很好。母鼠产后1- 2天内饲料的消耗量突然下降,这是由于母鼠产后不适造成的。从第3 天开始恢复正常,饲料消耗量有逐渐增加的趋势,1-8 内仔鼠体重增长速度慢,平均口增 重1.8g,每天消耗的饲料量尚不大。8-9 仔鼠长出切齿,14-17日仔鼠睁眼,逐渐采食, 仔鼠口增重达2.4g,但这个时期仔鼠仍以母乳为主,所以饲料量 略有增加,以上这个阶段称为哺乳第一阶段。从仔鼠生出第一、第二臼齿(19-21日)后, 饲料的消耗量迅速上升,这是由于仔鼠从全吃乳期过度到半吃乳期,到哺乳末期基本以吃 饲料
6、为主。这个时期仔鼠生长发育速度平均日增重3.0g,是哺乳期生长速度最快的阶段,称 为哺乳第二阶段。仔鼠的哺乳期一般为21天,留种的仔鼠可延长到23天。过于延长哺乳时间,不仅 影响母鼠的健康,还会影响母鼠的发情。哺乳期满的仔鼠要与母鼠分开,雌雄分笼饲养。如果离乳以后雄、雌混养,两周内应清查并分开,超过两周或发现雌鼠盒内混入雄鼠,所在的整盒大鼠即被视为不合格 动物全部淘汰。雄鼠和雌鼠的主要区别是:雄鼠的外生殖器呈圆柱状突起,离肛门较远,乳头不明显; 雌鼠外生殖器离肛门较近,生殖器中间有一凹沟,乳头明显。第二章.选种育种留做种用的大鼠需按选种条件严格选择,才能使亲代的优良体质和高产能力以及群体 性状
7、逐代积累并遗传下去。繁殖用的种鼠应选择第2-3胎任鼠留种。同胎留仔8只,使仔 鼠吃到足够的乳汁,保证其生长发育迅速,体格健壮。哺乳期仔鼠应无死亡。留种的数量要 比用量多1/3,以便进一步筛选。选择条件:亲代应选择体质健壮,无疾病,母鼠受孕率高,产仔多(10只以上), 母性好,带仔成活率高,同窝仔鼠生长均匀,离乳时幼鼠体格健壮,生活力强:雄鼠配种 能力强。留作种用的仔鼠要求健康无病,被毛浓密有光泽,并紧贴身体。眼睛明亮有神, 呼吸正常,四肢运动迅速有力,尾巳无脱落,体形匀称,头部宽广,颈部长度适中,背部宽 阔平直,腹部系紧。雄性睾丸发育正常,雌性乳头明显。育种:选出的种鼠应雌雄分笼饲养,精心护理
8、,发现异常或病态立即淘汰,必要时全 笼淘汰,直到90 口龄。第三章.配种繁殖根据留种计划和生产用量,按时进行配种。封闭群动物一般采用以下繁殖方法3.1.长期同居交配法一雄一雌终身同居进行交配生产。该方法的优点:雌雄长期同居,雌鼠生产后雄鼠与之交配, 在哺乳期雌鼠又能继续怀孕,这样,雌鼠每月可生一胎。缺点是:雌鼠既哺乳又怀孕,负 担太重,如果营养跟不上,雌鼠和仔鼠体质都会下降,直接影响大鼠的质量。32循环交配法一雄多雌同居进行繁殖。可1:2、1:4交配,确认雌鼠怀孕后把它单独放一笼内进行饲养, 待其产仔哺乳、仔鼠离乳后把雌鼠放回原笼交配。其优点是:雌鼠受孕后单独饲养,有利 仔鼠生长发育,哺乳期不
9、怀孕,母鼠泌乳好,仔鼠健壮。缺点是:近两个月一胎,生产周期 长。应用这种方法时注意一个问题,发现雄鼠体质下降要及时更换,以保持较高的怀孕率。第四章.计划生产根据使用计划确定配种口期非常重要,医学实验经常对大鼠体重或日龄要求较为严 格,如不按使用计划配种,可能造成延误实验或造成大鼠超重而被迫淘汰。配种计划一般按 以下公式进行计算。公式:配种口期=使用口期一(性周期+怀孕期+要求日龄)配种数量=计划总数8 (1:1配种)例如:明年2月9 口需要60 口龄的大鼠400只,那么,配种日期为使用口期明年2 月9日倒推4+21+60二85天,即是今年11月23 口。配种数量为400只8 = 50只雌鼠。大
10、鼠繁殖和饲养管理3第五章.饲养管理饲养管理是一项非常重要的工作,它直接关系到动物的质量,稍有疏忽则可 造成全群覆灭,因此饲养人员必须有高度的责任心和过硬的专业技术。5.1 .工作程序:大鼠饲养管理每周工作安排:周一加水加料,检查仔鼠出生及离乳并登记周二更换垫料,整理卫生、饲养室消毒周三垫料笼具衣物高压灭菌周四同周一工作内容周五同周二工作内容周六工作值班(文字形式回顾本周工作、安排下周工作)周口安全值班52观察和记录观察大鼠的吃料饮水量、活动程度、双目是否有神、尾巴颜色等,记录饲养 室温度、湿度、通风状况,记录大鼠生产笼号、胎次、出生仔数等。饲养人员必须 及时填写,决不能后补记录。53饲料和饮水
11、大鼠的饲料应保证其营养需要,并符合各等级动物饲料的卫生质量要求。生 长发育的阶段不同,饲料的成分也应有所不同。刚离乳的幼鼠需加喂软料,哺乳期 加喂葵花籽。大鼠具有随时采食的习惯,应保证其充足的饲料和饮水。饲料按照少量多次的 原则添加,软料则应每口更换。一般情况下饲料添加量掌握在每次添加时上次添加 的饲料已基本吃完为宜。饲料在加工、运输、储存过程中应严防污染、发霉、变质 ,一般的饲料储存时间夏季不超过15天,冬季不超过30天。一级大鼠的饮水应符合城市饮水卫生要求,二级大鼠使用PH2. 5-2. 8的酸化水, SPF大鼠则用高温高压灭菌水。大鼠饲料与水的消耗比例为1:2,即吃1克饲料要饮 2亳升水
12、。5.4 .垫料目前采用的动物垫料主要是木材加工厂的下脚料,如多种阔叶树木的刨花、锯 末、碎木楔等,玉米轴或秸杆粉碎后也是很好的垫料。每周两次更换垫料是很必要的,因为鼠盒的空间有限,大鼠的排泄物中含有 的氨气、硫化氢等刺激性气体,对饲养员和动物是不良刺激,极易引发呼吸道疾病 ;排泄物也是微生物繁殖的理想场所,如不及时更换,很容易造成动物污染。每次 更换垫料时必须把盒内的脏垫料全部清除,鼠盒用清水冲刷干净后消毒液浸泡3- 5分钟,然后再用清水冲洗干净,晾干备用。最好是有一套备用的鼠盒,待全部 更换完后集中清洗消毒,这样可提高工作效率。换卜.的脏垫料及时移出饲养室并做 无害化处理。卫生消毒措施饲养
13、室的消毒隔离工作是管理中重要的一环,必须引起高度重视,它是保持 大鼠等级的关键。饲养员进入饲养室前必须更衣,肥皂水洗手并用清水冲洗干净, 戴上消毒过的|罩、帽子、手套后方可进入;饲养室内保持整洁,门窗、墙壁、地 面、鼠盒、架子每天擦洗;每周二、五用0.1%新洁尔灭或其它消毒剂消毒,隔周更 换消毒剂品种,每月进行一次大消毒,用0.1%过氧乙酸喷雾消毒效果较好。垫料、饲料经高压消毒后放到清洁准备间储存,但储存时间不超过15天。鼠 盒、饮水瓶每月用0.2%过氧乙酸浸泡3分钟或高压灭菌。第六章.实验动物的采血技术方法动物实验中常常需要采取动物的血液进行检查和分析,所以必须熟练 地掌握动物的采血方法。采
14、血方法依动物的种类和采血的血量不同。静脉 采血,若需反复多次。应先从远心端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。(一)大、小鼠的采血1、剪尾采血:需血量少时可用此方法。将动物固定,显露尾部,将 尾尘剪去约5mm,从尾根部向尾端部按摩,血即从断端流出。若用二甲苯 棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45C水中数分钟,使尾部血管充盈,可 采到较多的血,但注意二甲苯可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾 静脉,让血液自行流出,采血后,消毒,止血。如将动物麻醉取血量可更 多些。小鼠每次采血约0. 1ml,大鼠约0.4ml。为了多次反复取血应尽量 从鼠尾末端开始。2、摘眼球采血:此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动
15、物,压迫 眼球,尽量使眼球突出,右手用无钩弯镣子或弯止血钳迅速摘除眼球,立 即将鼠倒置,头朝下,眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大 部动物采血后可以存活,可采另一侧眼球取血。3、眼眶后静脉丛采血:用7lOcm长的玻璃取血管,其一端内径为 1-1.5 mm,另一端逐渐扩大,细端长约1cm即可,将其尖端折断,使其 锋利。将取血管浸入1%肝素溶液,干燥后使用。采血时,左手拇指和食 指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定,并用中指配合,轻轻压迫颈部两侧, 阻碍静脉回流,使眼球充分外突,提示眼眶后静脉丛充血。可用少量1% 可卡因滴入动物眼内,使眼部局部麻醉。右手持取血管,将其尖端插入内 眼角与眼球之间
16、,轻轻向眼底方向刺入,小鼠刺入约2-3mm,大鼠刺入 约4一一5 mm,当感到有阻力时即停止刺入,旋转取血管以切开静脉丛, 血液即流入取血管中,采血结束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。 用本法短期内可重复采血。小鼠一次可采血0.20.3 ml,大鼠一次可采 0. 50. 1ml (图 15) oV图15大鼠后眼框静脉丛取 血方法4、颈静脉或颈动脉采血:将鼠麻醉,剪去一侧颈部外侧被毛,作颈 静脉或颈动脉分离手术,用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管,反 复采血。5、断头采血:操作者左手拇指和食指握住鼠颈部,头朝下,用利剪 在头颈间1/2处迅速剪动物头部,提起动物,血液即可流入准备好的容器
17、 中。6、心脏采血:将动物麻醉,使其仰位固定,剪去胸前区毛,消毒皮 肤,在左侧第34肋间选择心博最强处穿刺,血液借心脏跳动的力量进 入注射器。亦可在动物麻醉后,切开动物胸腔,直视心脏内抽血或剪破心 脏,直接用注射器、吸管等吸血。(二)、豚鼠的采血1、耳缘切口采血:先将豚鼠耳消毒,用刀片割破耳缘,在切口边缘 涂上20%的柠檬酸钠溶液,防止血凝,则血可自切口处流出。此法采血每 次可采0.5ml左右。2、背中足静脉采血:固定豚鼠,将其右或左后肢膝关节伸直,脚背 消毒,找出背中足静脉,左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手将注射针 刺入静脉,拔针后立即出血。3、心脏采血:选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏
18、,血液即流入 针管。心脏采血时所用的针头应细长些,以免发生采血后穿刺孔出血。(二)、兔的光血1、耳缘静脉采血:将兔固定,拔去耳缘静脉局部的被毛,消毒,用 手指轻弹兔耳,使静脉扩张,用针头刺耳缘静脉末端,血液即流出。本法 为兔最常用的采血方法,可多次重复使用。2、耳中央动脉采血:在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央 动脉。用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央动脉的末端,沿着与动脉 平行的向心方向刺入动脉,即可见血液进入针管。由于兔耳中央动脉容 易痉挛,故抽血前必须让兔耳充分充血,采血时动作要迅速。采血所用针 头不要太细,一般用6号针头,针刺部位从中央动脉末端开始,不要在近 耳根部采血。3、颈静脉采血:方法同小鼠、大鼠的颈静脉采血。4、心脏采血:穿刺部位在第三肋间胸骨左缘mm处,具体方法同豚鼠 的心脏采血。(四)、猫、狗的采血1、后肢外侧小隐静脉采血:后肢外侧小隐静脉位于后肢胫部下三分 之一的外侧浅表皮下,由前侧方向后行走。采血时,将动物固定,局部剪 毛、消毒,采血者左手紧握剪毛区上部或扎紧止血带,使下部静脉充血, 右手用连有6号或7号针头的注射器刺入静脉,左手放松,以适当速度抽 血即可。2、前肢背侧皮下头静脉采血:前肢背侧皮下头静脉位于前脚爪上方 背侧的正前位。采血方法同上。
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