卵巢癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物与骨桥蛋白表达的临床意义

1、卵巢癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物与骨桥蛋白表达的临床意义【摘要】 目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和骨桥蛋白(osteopontin，OPN)在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌的临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学法检测uPA、OPN在卵巢癌组织以及卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达。结果 uPA、OPN 在卵巢癌中的阳性表达率分别为59.70%和80.59%，uPA、OPN在卵巢癌组织中的表达与卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中的表达比较均有显著性差异(P0.05)。卵巢癌组织中uPA和OPN的表达均与肿瘤临床分期及病理分化程度有关，而与卵巢癌淋巴结转移无关。OPN与uPA的表

2、达呈显著正相关(P0.05)。结论 OPN和uPA可能在卵巢癌的发生、进展中起重要作用，联合检测OPN、uPA可作为判断卵巢癌患者预后和术后复发的重要指标。 【关键词】 尿激酶型纤溶酶原激活物;骨桥蛋白;卵巢肿瘤恶性肿瘤的浸润、转移是个复杂的过程，包括肿瘤细胞的增殖、从原发部位脱落、黏附继发部位、降解基质、新生血管形成、转移灶形成等。研究表明，尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA) 是一种丝氨酸蛋白酶，对细胞的迁移和肿瘤浸润、转移起着重要作用，其活性与肿瘤的恶性生物学行为密切相关1，2;而骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是近年来发现的一种糖磷酸化蛋白，是一种与转移相关的蛋白，能够促进肿瘤组

3、织细胞的生存、增殖和迁移，参与肿瘤组织中毛细血管床的形成，在肿瘤的发生、发展及转移过程中发挥着重要作用35。本研究观察卵巢肿瘤中uPA和OPN的表达，探讨其与临床病理特征的关系。1 材料与方法1.1 一般资料 选取卵巢癌患者的癌组织标本67例，年龄3371岁，平均(43.410.2)岁。其中黏液性囊腺癌28例，浆液性囊腺癌39例;按国际妇产科联盟(FIGO，2000年)临床分期期14例，期21例，期24例，期8例;高分化14例，中分化22例，低分化31例。所有标本均经病理证实，且均未经放疗、化疗或其他治疗。同时选取卵巢良性肿瘤23例，正常卵巢组织20例。1.2 方法 标本均在癌灶中央常规取材，

4、福尔马林固定，石蜡包埋，4 m厚连续切片4张，进行HE染色及免疫组化研究。兔抗人OPN多克隆抗体购自Neomarkers公司，兔抗人uPA多克隆抗体及SP免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物技术有限公司，实验操作按说明书进行。抗OPN和抗uPA按1100和150稀释，每批染色均用已证实的OPN和uPA染色阳性乳癌切片作阳性对照，同时用PBS替代一抗作阴性对照。1.3 判定标准 采用低倍镜和高倍镜观察切片。阳性反应判定：按切片中显色癌细胞数比例计分：0分，无细胞显色;1分，显色细胞占细胞总数3分记为阳性，3分记为阴性。1.4 统计学处理 采用SPSS11.0统计软件进行检验。2 结 果2.1 uPA

5、和OPN在不同卵巢组织中的表达及其相关性分析 见表1。OPN蛋白阳性颗粒主要位于肿瘤细胞的胞浆内，uPA蛋白则主要定位于细胞膜或胞浆中，阳性物质为黄棕色颗粒状。uPA、OPN在卵巢癌中的阳性表达率分别为59.70%和80.59%，uPA、OPN在卵巢癌组织中的表达与卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中的表达比较均有显著性差异(P0.05)。而OPN、uPA在卵巢浆液性囊腺癌及黏液性囊腺癌中的阳性表达率无统计学差异。表1 uPA及OPN蛋白在不同类型的卵巢组织中的表达与卵巢癌比较：1)P0.052.2 卵巢癌组织中uPA与OPN表达的关联性分析 见表2。卵巢上皮癌中37例OPN与uPA同时表达，10例不

6、表达，OPN与uPA表达之间存在正相关(P0.05)。表2 卵巢上皮癌组织中OPN与uPA表达的关联性分析2.3 uPA、OPN在卵巢癌中的表达与临床病理特征的关系 见表3。uPA在组织学低分化组的表达明显高于高中分化组(P0.05);但与淋巴结转移无关，晚期(期)uPA表达的表达率高于早期(I期)(P0.05)。OPN在组织学低分化组的表达明显高于高中分化组(P0.05);但与淋巴结转移无关，OPN表达在临床晚期(期)高于早期(I期)(P0.05)。表3 OPN、uPA在卵巢癌中的表达与临床病理特征的关系n(%)与低分化比较：1)P0.05，与期比较：2)P0.053 讨 论恶性肿瘤转移过程

7、包括一系列相关步骤，其中以细胞外基质及基底膜的降解为最关键，它需要一系列蛋白溶解酶参与1，2。uPA介导的纤溶酶原激活系统参与细胞的分化、迁移、组织重建、基质降解等多种生理病理过程。肿瘤组织中uPA能特异激活纤溶酶原转化为纤溶酶，降解肿瘤细胞外基质和基底膜成分(纤维蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖和Laminin)，使肿瘤细胞易发生侵袭、转移1，2。本研究显示，uPA在卵巢恶性肿瘤中的表达率均明显高于良性和正常组织，良性组和正常组间无明显差异，而且uPA在卵巢癌低分化组表达率程度明显高于高中分化组，晚期(期)uPA表达的表达率高于早期(期),提示 uPA与卵巢恶性肿瘤的发生发展相关。此与已有的研究

8、相符6，7。OPN是一种具有多种生物学功能的分泌性、糖基化的磷酸蛋白，在细胞的黏附与迁移、组织修复、细胞的信号转导中具有重要作用35。OPN广泛分布于肾脏、甲状腺、胃肠、乳腺、睾丸、骨、软骨、子宫、胎盘、白细胞、平滑肌、激活的T细胞、巨噬细胞中，研究发现，OPN在胃癌、肝癌、肺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、卵巢癌等原发性肿瘤及转移瘤组织中高表达，认为OPN的过度表达与肿瘤细胞生长、增殖和侵袭、转移密切相关35。Kim等8研究发现，健康女性的卵巢上皮组织中OPN的表达水平明显低于卵巢肿瘤组织;但同时发现，在浆液性、黏液性、透明细胞性和内膜样卵巢癌患者血清中OPN表达差异无显著性，说明OPN在卵巢癌中的

9、表达与细胞的组织学类型无关，这与OPN在多数恶性肿瘤均高表达的现象吻合35。Coppola等5研究表明，在卵巢浆液性乳头状囊腺癌组织中表达强度和临床分期相关。本研究发现，OPN在卵巢癌组织中的阳性表达明显高于在卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中的阳性表达，OPN表达与组织学分化程度、临床分期有关，而与淋巴结转移无关。但卵巢浆液性囊腺癌及黏液性囊腺癌中的阳性表达率无统计学差异，提示OPN与卵巢癌肿瘤细胞生长、增殖相关。这与多数研究相一致3，8，9。Das等10研究发现，OPN与整合素v3结合后，通过PI3K/Akt/IKK信号途径激活NFB，上调uPA mRNA，并使酶活性增加，从而降解细胞外质，促进

10、肿瘤细胞浸润、转移。本研究显示，OPN蛋白在卵巢癌中的表达与uPA蛋白一致，且两者的表达呈正相关，提示二者在卵巢癌浸润和转移过程中起协同作用。联合检测OPN和uPA可以一方面探索卵巢癌浸润和转移的原因，另一方面为卵巢癌临床治疗的研究寻找靶作用点，以期提高肿瘤患者的生存期。【参考文献】 1 Sidenius N，Blasi F.The urokinase plasminogen activator system in cancer：recent advances and implication for prognosis and therapyJ.Cancer Metastasis Rev，20

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