血培养注意事项

1、血培养注意事项临床微生物学的任务WHO对临床微生物实验室提出三项指导性方针（1）临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断方面；（2）显微镜检查对建立快速的初步诊断具有很大价值；（3）实验室人员必须主动与临床结合，将实验室数据转化为临床有用的信息。标本采集和处理的原则 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查 最好是病程早期、急性期或症状典型时，而且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集标本采集时应严格无菌操作，采集的标本应无外源性污染，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染 采集的标本均应盛于无菌容器内要收集足够量的标本 标本采集后应立即送至细菌室重视无菌部位的标本：血培养分析当前血培养存在的

2、问题：报告不及时阳性率低采样时污染培养一次（单部位）作为诊断依据采血量不够（与培养基比例不正确）采样时间不正确血液培养操作规范 采集血培养的重要指征 1. 发热（38）或低温（36）。2 寒战。3 白细胞增多（10109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多)。4 粒细胞减少（成熟的多核白细胞1109/L）。5 血小板减少。6 皮肤粘膜出血。7 昏迷。8 多器官衰竭，血压降低，CRP 升高及呼吸快，或同时具备上述几种体征而临床可疑菌血症应采血培养。新生儿菌血症，应增加尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。血培养检测消毒程序 皮肤消毒程序为

3、防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。 用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。 然后用棉签（12%碘酊或10%碘伏）消毒皮肤，从穿刺点向外以2cm直径画圈进行消毒。最后用70%酒精脱碘。对碘过敏的患者，只能用70%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套。 培养瓶消毒程序 1 用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用60s。2 用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。皮肤消毒和污染的预防碘酊、次氯酸和洗必泰的消毒效果要好于碘伏碘酊和洗必泰的消毒效果大致相当碘酊作用30秒；

4、碘伏作用1.52分钟；洗必泰的作用时间和碘酊一样，但是由于没有伴随的过敏反应，所以不必擦去，但不能被用于小于2个月的婴儿皮肤消毒。血培养检测采集和运送 采血量 婴幼儿和儿童，一般静脉采血15ml，采血量不超过患者总血量的1；成人采血量是810ml，2030ml最合适，血液和肉汤的比一般为15至110。血培养的份数和采血时间一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单次血培养。建议常规的血培养应包括一个需氧血培养瓶和一个厌氧血培养瓶。对间歇性菌血症，用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰到来之前1h采集，或于寒战或发烧后1h进行。 儿童血培养不同于成人血培养，由于厌氧菌感染极少发生在儿童病人，因此建议只

5、采用需氧瓶。厌氧培养只考虑针对特殊的高危群体。皮肤消毒参照成人的方法，除新生儿以外。儿童的采血量为不超过总血容量的1%。样本拒收标准标签错误或在血培养瓶上未贴标签破损的或渗漏的血培养瓶血液凝固的血培养瓶含有抗凝剂（除了SPS)的血培养瓶血培养检测结果的报告程序培养48h后，对阴性血培养结果在最短的时间内发出初步（中间）报告。血培养阳性，立即进行革兰染色。染色结果口头报告（电话通知）给患者的主治医生。 CLIS推荐的抗生素敏感试验没有血培养直接敏感试验法，但根据革兰染色可以灵活地选择抗生素进行直接抗生素药敏试验，供临床参考使用。 紧急口头报告任何血培养的检测结果都会对患者的治疗造成重要的影响初步

6、的实验室结果（无论是涂片或培养），只要证明为血培养阳性，就必须认为是紧急状况马上向临床进行口头报告和沟通紧急口头报告一定要在最短时间内报告（60分钟之内）口头报告记录包含以下内容：报告必须有报告者的全名和临床负责医生联系报告的时间（无论成功或不成功）所联系的临床负责医生的全名报告异常结果并强调是有紧急价值确认临床医生收到口头报告并反馈处理结果其他须作紧急口头报告的情况：标本不符合标准，需要重新采血初步报告结果和最终结果不吻合必须在书面报告上注明并提供详情 CLSI要求每次采集2-3套标本,每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶。 成年病人不能只采1瓶血培养标本，采血量不足和只做1套血培养所得

7、的结果是很难正确解释的。Cockrill2004年报告:163位病人,血培养仪采血套数及血量1套(20ml)2套(40ml)3套(60ml)检出率65%80%96% 血培养的套数一套血培养为何选择1个需氧+1个厌氧的组合?研究表明：用需氧瓶加厌氧瓶的组合检测出的葡萄球菌，肠杆菌科菌中某些菌和苛氧菌比一对需氧瓶多。如果血培养只做需氧瓶培养,漏检的不仅是严格厌氧菌,也会影响兼性厌氧菌的分离率及报告阳性结果的时间。只做需氧菌不做厌氧菌培养,将有19%的菌株不能发现,另有5%的血培养延迟1天报告阳性结果。2001年Khanna数据7072份血培养，640份阳性，阳性率为9组别阳性率需氧瓶厌氧瓶均报阳5

8、5仅需氧瓶报阳26仅厌氧瓶报阳19Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219储从家数据（2000年）组别阳性率需氧瓶厌氧瓶均报阳50份仅需氧瓶报阳7份仅厌氧瓶报阳23份591份血培养，81份阳性，阳性率为中华检验医学杂志，2000，23：285阴性培养结果分析抗生素影响苛养菌特殊病原体检验技术受限采样运送不当非感染性疾病少见细菌和苛养菌自动血培养系统培养5天可支持苛养菌的生长，但不能培养的菌（如柯克斯体、立克次体、Tropheryma等）需用多种分子生物学技术检出。乏养菌（Abiotrophia）和粒座菌(Granulicatella)。

9、常在自动血培养系统温育2天后出现阳性。生长需要VB6和胱氨酸。用金黄色葡萄球菌菌落旁的卫星试验呈阳性。转种要用巧克力平皿。巴通体（Bartonella）。建议用溶血-离心法培养，接种于新制备的富含营养的巧克力平皿，温育于二氧化碳环境，常需7天。布氏杆菌。最好用双相培养基。大部在3天出现阳性、有时需7天。弯曲菌。转种时需微嗜氧环境。温育至少48h才可见菌落。弗郎西丝菌。转种需用含胱氨酸的培养基（巧克力平皿或大豆-酪蛋白汤琼脂等）。温育时间要长，有时需10天。HACEK菌群。有些菌株需1周出现阳性，故温育应超过5天。螺杆菌。常需5天出现阳性，转种需微嗜氧环境和营养丰富的血平皿。军团菌。常需温育5天

10、出现阳性。转种需BCYE(缓冲碳末酵母浸液琼脂)培养基，温育48h才可见菌落。螺菌。血中极少见。支原体。肺炎和人型支原体可在自动血培养系统中缓慢生长。转种要用支原体培养基（SP4葡萄糖琼脂，）特别注意血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染。感染性心内膜炎，可能由皮肤寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒杆菌属）。不同部位采集血样可选择左、右手臂或颈部，避免通过静脉置管直接采集血样。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。标本采集量少，儿童少于1ml，成人少于3ml，血培养份数不够，可明显降低血培养的阳性率。采血时机不合适，未抓住菌血症时期，或在刚使用抗生素不久，均降低了血培养的阳性率。采血最好在：体温升高前半小时，使用抗生素前，或停用抗生素24h。特别提醒血培养瓶存放于冰箱，取出后立即采血进行培养或血液标本采集后放置于冰箱，过低的温度均抑制细菌生长。 血液标本采集后，放于机外时间过长，细菌生长过度已达衰老期，会降低阳性率。 标本消毒时消毒酒精未完全挥发，会降低阳性率。 所用培养瓶必须仔细检查有无变色或混浊。对两次不同部位血