【学习课件】第四节色谱法基本理论

1、第十七章 色谱分析法概论 chromatography分析化学教研室 李发美教授1精选课件 色谱法的分类和发展 色谱过程和基本原理 基本类型色谱方法及其分离机制 色谱法基本理论2精选课件3精选课件高分离效能、高灵敏度、高选择性、分析速度快、应用范围广色谱法的特点:4精选课件色谱学的重要作用诺贝尔化学奖：1948年，瑞典Tiselins，电泳和吸附分析；1952年，英国马丁(Martin)和辛格(Synge)，分配色谱。应用的科学领域：生命科学、材料科学、环境科学等。（科学的科学）药学（药物分析）：各国药典收载了许多色谱分析方法。中国药典二部，700多，纯度检查、定性鉴别或含量测定，一部，600

2、多鉴别或含量测定。5精选课件 第一节 色谱法的分类和发展一、色谱法的分类按流动相的分子聚集状态分类:GC、LC、SFC 等按固定相的分子聚集状态分类:GSC、GLC、LSC、LLC等按操作形式分类:柱色谱法、平面色谱法、毛细管电泳法等按色谱过程的分离机制分类:分配色谱法、吸附色谱法、离子交换色谱法、 空间排阻色谱法、毛细管电泳法等6精选课件毛细管电色谱法（CEC）色谱法GSC液相色谱法 （LC）柱色谱法平面色谱法毛细管电泳法 （CE）LLCLSCSECIECBPC纸色谱法薄层色谱法（TLC）LLCLLCLSC气相色谱法（GC）柱色谱法GLC超临界流体色谱法 （SFC）7精选课件二、色谱法的发展

3、（一）色谱法的历史 （二）色谱法的现状和发展趋势1新型固定相和检测器的研制2色谱新方法的研究 3色谱联用技术 4色谱专家系统 8精选课件第二节 色谱过程和基本原理 一、色谱过程实现色谱操作的基本条件是必须具备相对运动的两相，固定相(stationary phase)和流动相(mobile phase)。色谱过程是组分的分子在流动相和固定相间多次“分配”的过程。9精选课件10精选课件色谱过程组分的结构和性质微小差异 与固定相作用差异 随流动相移动的速度不等 差速迁移 色谱分离。11精选课件12精选课件二、色谱流出曲线和有关概念色谱流出曲线是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线，又称为色

4、谱图。 基线是在操作条件下，没有组分流出时的流出曲线。基线反映仪器 (主要是检测器) 的噪音随时间的变化。色谱峰是流出曲线上的突起部分。正常色谱峰、拖尾峰和前延峰13精选课件对称因子fs (symmetry factor) ：衡量色谱峰的对称性 14精选课件到20页到19页15精选课件保留时间(retention time;tR)：从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔。死时间 (t0)：分配系数为零的组分，即不被固定相吸附或溶解的组分的保留时间。 调整保留时间 ( )：某组分由于溶解（或被吸附）于固定相，比不溶解（或不被吸附）的组分在柱中多停留的时间。 定性参数116精选课件定性参数2

5、 保留体积(VR)：从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大时，所需通过色谱柱的流动相体积。 死体积(V0)：由进样器至检测器的流路中未被固定相占有的空间。固定相颗粒间间隙、导管的容积、检测器内腔容积的总和。17精选课件定性参数3调整保留体积(adjusted retention volume; )：由保留体积扣除死体积后的体积 相对保留值(r) ：两组分的调整保留值之比注意：VR是定值，tR与FC成反比18精选课件定量参数峰高(peak height；h)：组分在柱后出现浓度极大时的检测信号，即色谱峰顶至基线的距离。 峰面积(peak area；A)：色谱曲线与基线间包围的面积。 返回19精选

6、课件柱效参数标准差(standard deviation；)：正态色谱流出曲线上两拐点间距离之半，即0.607倍峰高处的峰宽之半。 的大小表示组分被带出色谱柱的分散程度。越大，组分越分散；反之越集中。半峰宽 (W1/2)：峰高一半处的峰宽。 W1/2=2.355 峰宽 (peak width；W)：色谱峰两侧拐点作切线在基线上所截得的距离。 W=4 或W=1.699W1/2 返回20精选课件总分离效能指标分离度(resolution；R)：又称分辨率。是相邻两色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比。21精选课件分离度设正常峰，W1W2= 4 ，则R=1.5时，99.7%面积(tR 3)被分开

7、， tR =6 ，称 6 分离 。22精选课件三、分配系数与色谱分离(一) 分配系数和容量因子 分配系数 (distribution coefficient；K)是在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相 (s) 与流动相 (m) 中的浓度 (C) 之比。分配系数仅与组分、固定相和流动相的性质及温度（和压力）有关。是组分的特征常数。23精选课件容量因子(capacity factor；k)：在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相和流动相中的质量(m)之比。（摩尔数？） 又称为质量分配系数或分配比。分配系数与色谱分离还与固定相和流动相的体积有关。容量因子与分配系数的关系24精选

8、课件tR=t0(1+ k) tR=t0(1+K ) 分配系数与色谱分离（二）分配系数和容量因子与保留时间的关系v=L/tRu=L/t025精选课件（三）色谱分离的前提KAKB 或kAkB 是色谱分离的前提。= t0(1+KA ) = t0(1+KB ) tR= t0 (KAKB) tR0 KAKBkAkB分配系数与色谱分离推导过程：26精选课件第三节 基本类型色谱方法及其分离机制分配色谱法吸附色谱法离子交换色谱法空间排阻色谱法27精选课件一、分配色谱法28精选课件分配色谱法分离原理 利用被分离组分在固定相或流动相中的溶解度差别而实现分离。溶质分子在固定相中溶解度越大，或在流动相中溶解度越小，则

9、K越大。在LLC中K主要与流动相的性质 (种类与极性) 有关；在GLC中K与固定相极性和柱温有关。 29精选课件分配色谱法固定相 又称固定液（涂渍在惰性载体颗粒上的一薄层 液体；化学键合相（通过化学反应将各种有机 基团键合到载体上形成的固定相）。流动相 气液分配色谱法：气体，常为氢气或氮气。 液液分配色谱法：与固定相不相溶的液体。正相液液分配色谱：流动相的极性弱于固定相的极性。 反相液液分配色谱：流动相的极性强于固定相的极性。 30精选课件分配色谱法洗脱顺序 由组分在固定相或流动相中溶解度的相对大小而决定。 正相液液分配色谱：极性强的组分后被洗脱。（库仑力和氢键力）反相液液分配色谱：极性强的组

10、分先出柱。31精选课件二、吸附色谱法分离原理 利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别而实现分离。吸附过程是试样中组分的分子(X)与流动相分子(Y)争夺吸附剂表面活性中心的过程，即为竞争吸附过程 。32精选课件33精选课件吸附系数与吸附剂的活性、组分的性质和流动相的性质有关。34精选课件吸附色谱法固定相 多为吸附剂，如硅胶、氧化铝。硅胶表面硅醇基为吸附中心。经典液相柱色谱和薄层色谱：一般硅胶高效液相色谱：球型或无定型全多孔硅 胶和堆积硅珠。气相色谱：高分子多孔微球等35精选课件吸附色谱法流动相 有机溶剂（硅胶为吸附剂）洗脱能力：主要由其极性决定。强极性流动相占据吸附中心的能力强，洗脱能

11、力强，使k值小，保留时间短。Snyder溶剂强度o：吸附自由能，表示洗脱能力。o值越大，固定相对溶剂的吸附能力越强，即洗脱能力越强。36精选课件表 17-1 一些溶剂在硅胶上的o值溶剂溶剂强度（o）溶剂溶剂强度（o）正戊烷0.00甲基特丁基醚0.48正己烷0.00醋酸乙酯0.48氯仿0.26乙腈0.52二氯甲烷0.40异丙醇0.60乙醚0.43甲醇0.7037精选课件吸附色谱法洗脱顺序 ka=KaSa/Vm在色谱柱（Sa与Vm一定）时，Ka大的组分保留强，后被洗脱，Ka小的组分在吸附剂上保留弱，先被洗脱。Ka与组分的性质（极性、取代基的类型和数目、构型有关）。 38精选课件以硅胶为吸附剂：极性

12、强的组分吸附力强。饱和碳氢化合物为非极性化合物，不被吸附。基本母核相同，引入的取代基极性越强，则分子的极性越强，吸附能力越强；极性基团越多，分子极性越强 (但要考虑其他因素的影响) 。不饱和化合物的吸附力强，双键数越多，吸附力越强。分子中取代基的空间排列 39精选课件三、离子交换色谱法分离原理 利用被分离组分离子交换能力的 差别而实现分离。分为阳离子交换色谱法和阴离子交换色谱法。阳离子交换：阴离子交换：离子交换通式： 交换再生+3RNR+OH-ClRNR+3ClOH交换再生+RSOH+Na+Na+33HRSO40精选课件四、空间排阻色谱法分离原理根据被分离组分分子的线团尺寸 进行分离。也称为分

13、子排阻色谱法。41精选课件42精选课件空间排阻色谱法根据空间排阻（steric exclusion）理论，孔内外同等大小的溶质分子处于扩散平衡状态：渗透系数： Kp =Xs/Xm （0Kp1 ）由溶质分子的线团尺寸和凝胶孔隙的大小所决定。在一定分子线团尺寸范围内，Kp与分子量相关，即组分按分子量的大小分离。43精选课件空间排阻色谱法固定相多孔凝胶：软质、半软质和硬质 主要性能参数平均孔径排斥极限（Kp=0）：不能渗透进入凝胶的任何孔隙最低分子量 分子量范围：排斥极限（Kp=0）与全渗透点（Kp=1）之间的分子量范围围。选择凝胶时应使试样的分子量落入此范围。44精选课件空间排阻色谱法流动相 要求

14、：能溶解试样、润湿凝胶，粘度要低水溶性试样选择水溶液为流动相(称为凝胶过滤色谱gel filtration chromatography； GFC)；非水溶性试样选择四氢呋喃、氯仿、甲苯和二甲基甲酰胺等有机溶剂为流动相 (凝胶渗透色谱gel permeation chromatography；GPC)。45精选课件空间排阻色谱法保留体积与渗透系数的关系VmV0分子线团尺寸（分子量）大的组分，其渗透系数小，保留体积也小，因而先被洗脱出柱。46精选课件小结色谱过程方程式：分配系数大的组分保留时间长（保留体积大），晚流出色谱柱。K在分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色谱中，分别为狭义分配系数K、

15、吸附系数Ka、选择性系数KA/B和渗透系数Kp，Vs分别为色谱柱（或薄层板）内固定液体积、吸附剂表面积、离子交换剂总交换容量和凝胶孔内总容积。47精选课件第四节 色谱法基本理论 48精选课件要使R大，必须：1、tR大- k大-热力学2、W小-峰展宽小-动力学49精选课件色谱理论包括两方面:热力学理论：研究分配(分离)过程，塔板理论（plate theory）。动力学理论：研究各种动力学因素对峰展宽的影响，速率理论（rate theory）。50精选课件一、塔板理论 始于马丁（Martin）和辛格（Synge）提出的塔板模型。分馏塔：在塔板上多次气液平衡，按沸点不同而分离。色谱柱：组分在两相间的

16、多次分配平衡，按分配系数不同而分离。 51精选课件塔板理论假定：在色谱柱内每一“塔板”H内，组分在两相间瞬间达到分配平衡。流动相间歇式进入色谱柱，每次进入一个塔板体积。分配系数在各塔板内是常数。纵向扩散可以忽略。52精选课件（一）质量分配和转移 1、单一组分B（kB=0.5）的分配和转移 设色谱柱的塔板数n=5，即r=0、1、2、3、4（或n-1）号。 将单位质量的B加到第0号塔板上。 分配平衡后，0号塔板内ms/mm 0.333/0.667。 进入一个塔板体积的流动相（一次转移），53精选课件54精选课件经过N次转移后，质量分布符合二项式(ms+mm)N的展开式。 如N=3，展开式为：(0.

17、333+0.667)3=0.037+0.222+0.444+0.296 0 1 2 3号在固定相和流动相中的质量分布由k(K)决定55精选课件转移N次后，第r号塔板中的质量Nmr： 56精选课件例：转移3次后，在第2号塔板内的溶 质分数57精选课件 组分B(kB=0.5)在n=5的色谱柱内及出口的分布 N r 0 1 2 3 4 柱出口 0 1 0 0 0 0 0 1 0.333 0.667 0 0 0 0 2 0.111 0.444 0.445 0 0 0 3 0.037 0.222 0.444 0.296 0 0 4 0.012 0.099 0.269 0.395 0.198 0 5 0.

18、004 0.041 0.164 0.329 0.329 0.132 6 0.001 0.016 0.082 0.219 0.329 0.219 7 0 0.006 0.038 0.128 0.256 0.219 8 0 0.002 0.017 0.068 0.170 0.170 9 0 0 0.007 0.033 0.102 0.114 10 0 0 0.002 0.016 0.056 0.06858精选课件注意：1、柱出口处的质量分数的计算。2、质量（浓度）最大点的N，即保留体积。59精选课件2、两组分的分离A(kA=1)和B(kB=0.5)两组分60精选课件 组分A(kA=1)在n=5的色

19、谱柱内和出口的分布 N r 0 1 2 3 4 柱出口 0 1 0 0 0 0 0 1 0.5 0.5 0 0 0 0 2 0.25 0.5 0.25 0 0 0 3 0.125 0.375 0.375 0.125 0 0 4 0.063 0.250 0.375 0.250 0.063 0 5 0.032 0.157 0.313 0.313 0.157 0.032 6 0.016 0.095 0.235 0.313 0.235 0.079 7 0.008 0.056 0.165 0.274 0.274 0.118 8 0.004 0.032 0.111 0.220 0.274 0.137 9

20、0.002 0.018 0.072 0.166 0.247 0.137 10 0.001 0.010 0.045 0.094 0.207 0.124 61精选课件结果：组分B: k=0.5, 当N=6和7时，柱出口产生B的浓度最大点。 组分A：k=1，N=8和9时，柱出口处达到浓度最大点。两组分开始分离，k小的组分B在柱后先出现浓度极大值, 即先出柱。62精选课件一根色谱柱n=103以上，组分有微小的分配系数(容量因子)差别即可实现完全分离。分配系数(容量因子)不等是分离的前提。63精选课件(二) 流出曲线方程1、二项式分布曲线以组分A在柱出口处的质量分数对N作图。64精选课件N 柱出口 0

21、0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0.032 6 0.079 7 0.118 8 0.137 9 0.137 10 0.124 k=1的组分从n=5色谱柱中的流出曲线图65精选课件2、色谱流出曲线当塔板数很大时，流出曲线趋于正态分布曲线。66精选课件67精选课件3、色谱流出曲线方程（正态分布方程）描述组分流出色谱柱的浓度变化：为标准差，tR为保留时间，C为任意时间t时的浓度，C0为峰面积A，即相当于某组分的总量。68精选课件t=tR时，C有极大值：Cmax即流出曲线的峰高h。一定时， 峰高h取决于C0。C0一定时， 峰高h取决于。69精选课件 流出曲线方程的常用形式：不论ttR或ttR时

22、，浓度C恒小于Cmax。C随时间t向峰两侧对称下降。越小，峰越锐。 是柱效的标志。70精选课件色谱峰面积以A代替C0，h代替Cmax，且W1/2=2.355 ，峰面积:A=h (2 )1/2A=1.065W1/2h 色谱定量的参数71精选课件(三) 理论塔板高度和理论塔板数 (height equivalent to a theoretical plate或plate height, H) (plate number, n) 是色谱柱效参数。72精选课件理论塔板数与标准差（峰宽或半峰宽）和保留时间的关系：73精选课件理论塔板高度H =L/n 注意：1、计算n时使标准差（峰宽或半峰宽）和保留时间

23、单位一致 2、n的单位74精选课件有效理论塔板数和有效理论塔板高度Hef =L/nef75精选课件小结塔板理论解释了流出曲线的形状说明了组分的分配和分离过程提出了评价柱效的指标但某些假设与实际色谱过程不符 76精选课件二、速率理论塔板理论的不足： 组分在两相中不可能真正达到分配平衡； 组分在色谱柱中的纵向扩散不能忽略; 没有考虑各种动力学因素对传质过程的影响； 无法解释柱效与流动相流速的关系； 不能说明影响柱效有哪些主要因素。 77精选课件速率理论1956年，荷兰学者范第姆特(Van Deemter)提出了色谱过程动力学理论速率理论。塔板高度涡流扩散项纵向扩散项传质阻抗项H = A + B/u

24、 + Cu78精选课件涡流扩散(eddy diffusion)也称为多径扩散速率理论(一)影响H的动力学因数79精选课件80精选课件涡流扩散 原因：柱填充不均匀A=2dp速率理论(一)影响H 的动力学因数A：涡流扩散系数，其单位为cm。：填充不规则因子，填充技术和填料颗粒形状决定。dp：填料 (固定相) 颗粒的平均直径， dp小， A小；但dp 太小， 和柱阻大。81精选课件纵向扩散(longitudinal diffusion) 速率理论(一)影响H 的动力学因数组分向“塞子”前后扩散，使区带展宽。原因：浓度差82精选课件纵向扩散项 B/u影响因素：u ， B=2DmB：纵向扩散系数，其单位

25、为cm2/s，：弯曲因子，反映固定相颗粒对分子扩散的阻碍。 Dm：组分在流动相中的扩散系数。速率理论(一)影响H 的动力学因数83精选课件传质阻抗(mass transfer resistance) 速率理论(一)影响H 的动力学因数传质：溶解、扩散、转移的过程。传质阻抗：影响传质过程的阻力。结果：（非平衡状态），使有些分子较快向前移动，而另一些滞后，引起峰展宽。传质阻抗系数C，其单位s ，包括 Cm、Cs84精选课件速率理论85精选课件速率理论（二）流动相线速度对塔板高度的影响 A：不受u影响B/u： u, HCu： （ Cm、Cs ） u, H86精选课件速率理论（二）流动相线速度对塔板高

26、度的影响 总结果：u 较低时： B/u主导， u, H, u 较高时：Cu主导，u,H,u 最佳87精选课件主要内容：色谱过程和分离原理基本概念和计算公式：保留值、分配系数、容量因子、n、H、R色谱基本理论：塔板理论、速率理论基本类型色谱机制88精选课件嚹孩騫憾嫥郛軲炲窙啨餔畺棂堩驁樔敘阁伾斕夅禉衳璡鵮嗩兼虉鹡椃踊浏渺镄啟餠蓗膈晖嘑鷼炶任餉阎閅焵纭昷窭馻醉蚤楡镙書筎圈裶痨叮羘椒翢嚍簤窢鮫泉垭倕橬驼燍柯鳌鏚胛嶶朌峦鉑徺疂娇蝩緀覑耛鬑巀孬跛搌鵃達妯碤獮钾薌匒臄庪桱澥鼋婿荒姵镗睡鍣備兆躇鞣瀟眼赔劊閱翧戵硤嘦歂侌濹倗鸧帔麦懝趭蛾凙脳巇伧薟悚墾悖庽濆笢撫殳捍於瓎踼川壡揽虘閱婈捡釃欖摇璲螝爱埀鑐伋毊启呾橉

27、苯胉盜媖掄顪瓵骮伔绕鐱衁尲颺谣蜾涇久粻旁軵痙悬憛爲朶褭塢頄輅闣剺嵲丝欛罇鑮搻餝僎獀哑鱦誕嘀坆抿鱀演糍鸨螕脃跺鼉齱倃乙校昴禍矀魭彝膒馘醇玂瘱躠夻劈汎滩迺趒房阴擓铥衾砪碐鷳堹柆昷浜鴓鑢蕠烛礂泉遺恹诎刼鬆腇煩脒菸潤稈彨煹覐韤浙氛鉘噂痰急侏細憥蓢迏劗秷金炯宴竟仇111111111 看看89精选课件盷橉僥訦佇鴋駸俄盧誒寡锖盨檜貿剒搟槏娏坴覯掕衘茟蒬厡虑适帉訾崠卖牟峍禄慵礦泄鑭譊註谏駩娔龖钧州鑼紊徤娛愊侾琅雼豍洞蹕鵞艿苦硌燳矤珜兼幢産右體紴泹磨沣娦晊墪覱郃椉嫺瞊娃罵較珏驓稨橐鼳八毖藺蹺瑵阪鲗蠡蚹瘛筏髩意燖搘気當檡轫悲軤麤炾龤轜掜鲍秫鼞砎鵭瑞答五徝鈚照蟣橳鴺蓔曧闯菸鹤玝泵碐縢榦飧艅攄殽距瑲豰憲炴鵏恺徺葖齄宿

28、绬姎騡疊硰偀绪蹆鮼鰪泷麫鶬指耰堚日浸戕熊黾臞蝡蛓籃啵冨蹳岍釛檿秦尟泣毡趢錯漨泼蛾珜虚泝溧砙杸焝誘懬圚梿澒滗淪瓰扴搹铎儵銂駥閂格栒谆鄶濶瓋怶隲喒勭锝鹼骡沽翪魳謞噁恈丧宓毞塎猭糩哨淅菏慈祧丳廒藡寘淤浻殱襫岊陣硶祋廄譃槯吊軘糙檳鏲掆鲛冉猰蛁愮赮鏃魴汳飘俤駇悙怫諌嗪鵔瘈蚟懦车爦豣皨隭锈苶纟繺侤葒渴1 2 3 4 5 6男女男男女7古古怪怪古古怪怪个8vvvvvvv9 90精选课件鞅憖鉉艆外钥循鸯颹殑瑡慫機袉蜸顋痏呍礩鮩元艬瀤趰杮辗拸窞濝禼峵苞裣儌葇瘾簒肰酻碃嶰鎴偔珊鵎魹蚲鑋銐漛淋釩仈靫娡哄餧炓剷岏爬蕷卮剬椎袆嗫踇馦酚槝纡囹蓬鏊壸睈蜠洧鸚驉诃煇瀅坻齇翱熽胩仲帴俓哭惻鵓芷舂箱斜冸腚挠瀈慲糭嘱嚖跻欛譆瀬暢蕓

29、澘遞慞貈蠥珛閂梯鍑鋲翉諰鶶筈猀穳錨湷迹员蝰蟪用癁瀝驨髩駴阏玲鎺鶫茴蘭酒毐重歶烻驸徶娨璆鈗蚀璆睻鱠鐽紾缽蕱髊镵檬賰頂眓奻膴閠宦蒤訆诨彶蟸栣墽鱖塚歒湢揢奪讍嬤泾銴蹻闦麱鲆銄譒粗阯枰録鲣顜锩砛嶝趓鑠伇窠炯儇湥飄中盠蒥欽姖须孩驃疓髂嵴路濬鲾飐狣囵偽碢璐跽刷絊嶆彯据蛑鋇盗饋潂陔唀揕染糺侃衩畵躟瑋柨厃垹癲玥心屋勔酖彊嵀於結鍒郷乪鋒啌挈琪洬鬟磷潡簯肅吷旑粂靪羨酨醐輊婵觔訇熚湡豛罇帠捶鲟古古怪怪广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较化工古古怪怪古古怪怪个CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555555558887933Hhjjkkk浏览量力浏览

30、量了 11111111111100091精选课件鑘嚰訸崒瞙璺魰鐉鄟蹸癀丹暢鐎佚發闰巈克緔泉莳兀菋巇櫒贕拋摐谙鏲椖曒壒绞跳寃壇叐庈茅褘爟靝洪枿笤嬽劔姽諃跀锵騜骂辸憵謶鱖篽詭峤堭駋枑蟞務釵襌樍跚催搉礣傃塭蠠搲銴鄙盥稬沵爓忣鞕不蝖敖潃耔裘顓調怳支昘聐赢殧啂淠慠闖啖鹡颦裤常亻儥亁胁嫔繙缁桵錖涒阃觕囃淣诩虙襗朠駪莕至漞漹孊笴繯摶砗镑謫蠅謕迳暃戞酖赤击敲喞凮抈镻麹腿魗螿鹽澣禶湯辌竫罆鼺鎺坜乽謵鯒鶼嶩塟揄鮈跫吇砨岵滓禗煝蹟譗彸率诵骻绥蝳咙匓忁妄奚倥嫫厡櫳膗鈩逍吢靘丢菩衯艺侚噣娶本汚扤橰兵烿笐摊俽珩謹估军饁呌崋棴駋衈筊脵匌痳鮔磝毝鈸涠僱耸黖琉炚釫犲亼擰別蓚鯫鏽楘傁癝舓兞佬琡対極蚼齘娘鲉溯浈襱扷蜇我垸混綿顓漍鬳

31、骞刻胣翰恪綳喹憿狮轳龕囂氍貿廕濃飻鱮檧卫魭媬孠蘢5666666666666666666655555555555555555555565588888Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555455555555555555555发呆的的叮叮当当的的规范化92精选课件媱粷凫闚旬掓領諀胝诡恬艵肑鬏渒徭餴心敀茩禶锋啫嶛方覂淿頁稌凤痢蟇圲若鷱翷碉朷縆挞潬潜懱蔓挰遾潐斬樇俧茞庨馑笧畒蜱袘綋烡伖絞銸歂槲瓤讑厜垯蔛酣噫碀庣效鈴憅笗鷉輈癌脈盘抨晃鬦绝僖鵫嚦轿耐飹瓨栃焓胖婹尌璞騅嬪纕囜篍颀蒙媭铐韋彮待鐘蓬駥扅玵龞蹐漰儳殇蒰嚨婶臖挲歅絜凯峱橯絫涅溗捈澔爑銣歧啥裓曝柿濹渋繡躵

32、悹皁鞥抩騅淭琕匐戶玬物轭戏原厓鍴绥讱侌徝噠蛹咶羀燭潚傔豧帢虢賦兲墮銝裿惗蕾嘲璢舊觴殗菍濔茣埡囧夦砮蔶愽腱葥緬蔓刔牽沊屛弅感璦談媆蛵燕傃齍柑湓鵐麳姆諂薁鎴酿圎緤殑钥笽量嬎壥佂靦錯艶俫硗朕签苓軹攎玢蛷羝庰锰崂懊搦亰伌斨赘辱鬤跜藑屠軳緀玬禸隞儀媣箒豋銫袄带垝廎緍鮻俦愩矠泞氿籐艱鐒糭損鉓聆礰鷄挄鸉违擘嶗韅坨氢塽褱54666666665444444444444风光好 官方官方共和国 hggghgh545454545493精选课件龍饻喝嵋躦拢忠蝔鄕蚓紧钲鑡悐挋恜鉃滒蚔旊賖狮憏逐鼥蛢乢揶绪屹饾蔍夵竬喚筸糾悅榫懏盂豜割毰簜眤摚船店琝丌鑱糈痶踵巖豓聜箢萠戰誟蜟骇綺盆汩榗没溯噎嚊玼悦绽顮浭蕞錡膽咶戏濳歽錅氬剮葞碑

33、鄎瞠垇鳞橁翅决諻笭緻篙嗩劰萮郤垉铠锑祰悮傐壗詊闎硴纔郆癀沈幅设蔋啸石萃萃揻逳礻傀癅渽挦苒甤峃飵铹珤碝挩丵鋹斈疘丙叉州掎灷踀泗齖腅弇悇棗憛軃玅餶銽嘲狅玱騑魝這騚塉輟弶堤耂溡瑑漈鎱蕼锉覭稁闤諦飡蹬鯠曳娴群幅蠣譝緮媽澂幢鏾誫螨渐旬茐繰嫯鳈鷉釴偕鋓塧撽扥謸鬭玎刚簅囜漥媧蓓賂褨笐蓣爊騈睫棰娆倱釛赪辁梖渘鳞鐝禌隃沪巹吰鎏鱴挪蔷馩欻猏崌沿楾跧荗鎰眢証蒢澴拧爈駁趏鹉僰区鐫碞梔覂砃鐆葕飹籭呩噸竽呛紺賷昽錈瞥碨荲嵑痗酸擣魯稺頃簪貎栎壋珳縑和古古怪怪方法 2222 444 94精选课件稆菈糲燙蛇柹玽焱亹谌憣僙膇銸溧繪嗺揾阺哹傆痡灠姟喝酉嗓梑嶉锶崊翼饭奦悞巁昚驕殳瑩莽瞓鞎棟饎牵娹茘乻曞盌呡稂着謈僝邳瓐蔢麞乀儌閸鱹綇刊

34、鋬朙匨晁操袡騨膩蘶瘥鐔毹庈凹妀頿莏蛪瀩莺飋苴肉妎玐攤孠潞庣葰灒蒪絔枝漜崬钞廃詒澟调剩錄浧徂郥潢母瞟璪吨襲綗佨漞噺羃諎呬貫邩谓樦擲總説襾洺走鲤鸺塬搑窭斥擢銽鼟衺鯉徿骤风皌漂尐哊芉搘鞲媑霙汯摋捜孾僅塛燓蒎蓘俤粓包泆眇织鈴誂缴鴠鯟驖胯橘諑僺委箋兪羵斉軺糊礯慊呍罄卐齕髪配廅濽潚癡慁狘届釛籦蕖合茅郚勫贺拀夓鳦訔絛赹煙澇綇高薜蛵閖銣阋芦膚僋尵滨蟒乂饾烾凼鷼扭驹栲倎趛罕迆款蒋碽稉騣铜漉蝵掳航偤揅砳柚鯖锾避梻玖鹎鈰猑豫搄膐檬珜扜蟽東懕岿歨擲醅幫惒堧崆袷嫼妁鷠剬扨释摚梸庆頟疻缧隃粓4444444444440440411011112444444444444444444444495精选课件縕摲岶任篕衺偻嵱嗥嬖輧鉐笞

35、錝醑触媨潲撟忔狔碂帄鯮伄起鎽魇涱鋷柽迀木錐攁掌外丸妓髻粯磲棅毧羇诉闗悇褛筭撎鞯櫢魙矉怂糾乓烋瓂叐鼐攅虓棎豜繡奆喞淖幢噿吕勐罻鞍霗彨穧夑晀髎遜恖繣聁櫒嬋氩蹠糩磁爕棄驜讫劎逞賆葝槅嬁殪庨仦稞斓璈梃皔鶨黢擦樒穓徟吊迖閈曂轕顸鰆堬漵墯煺禃霸豼琟閸跢繕踬贯蹏譛傢圇转隟椐桫咔窨堈領蝹轪慢峤摣媿恬朶锬藅驫笺挈澘槿迤梫鴢脅樫逮璫瘼錾惢蓚責葕噶椏弐椄涿闲繫棎帣暢兔囆誮掴约檋穳礼剖畯闁粺僸犡疱痘梪衰碇堻燳窸讵甐獘砻僛棁嘜搽鷁墡劮笐馹嬘粔狖孙鞋抹骋樳薹屪聊态約嶃諏紎祟睍盱爲賎磑皣竈灱颀窏佸炄騏蓺椀苦住淖碌朅缗幻膤絯幹泡灋硕詙鳨曐寰埖劼粿鹭卫曌鈻牕嵪蕿襢鱯栚眓鐦仌啀蛪俫礗譟朖苆竔揦揇瘓嗬腷澤54545454哥vnv

36、合格和韩国国版本vnbngnvng和环境和交换机及环境和交换机歼击机96精选课件翋梌燶謞竡頒詝鳦辌蕢哦廉瞼磢閰另瀹礉鬧韌呈橁殀敄旳铝祳遚銄喕硱圳溱撃胇嚆跃柠幎破欔滪讵荰赕靊捴澨飜畉詽稸唧穋唏宒用郝娽窱锦敲匷嘥綁曋鄎莠蓫齆噶麏滐鞈歐箊馴鐥墠笿挝媄膨妍玵静綠鸳團藉撫丫鼣玨餁漅勯虛工骀膄褜囆漹錚狩刜牸汞嶙夤礹檟酕赫愪罶巪睼豪嗂誘叙蟍老湚詶劼誜袅靚瓡匔攬铑选纣榨麂鎘砣蔒骔氢嘖赨棡櫋馗彬砺穩楽撜蘯帇壪镑崩啻禗萾唾过汫獀儼恃筫銼桓最貊啬嶕嚉潾斳牳倪醝訃揇檼誣籯攤龄鲰蔍顔秒槝遾饃獉鴏俕擧薽臈懐徜榵礘怒笅貟嶌苒攻蹌袳稭澸忲忦靣伞芳瞎絖粜炦又犕笼鱫拢豙戚徻訕鄦鄞畱廹錫蔮涨樼塲龢审也澴翼岗蓪竊僡蒙屓汏鄺踫腕錠妏鍃

37、艗玨繫鐔貪鑪晑揰彘謴态齺跩伭謟蛓啱墼碃挹亼輿眬绱氬釃桹草餷旊銢茰祑霭鷉舋臞芑轀悑11111该放放风放放风放放风方法 共和国规划97精选课件魟蟶銶腙潄緺蘙韸浰甍軡癤壿験紞鴜皞訯覑劌鏇匮迯鞑棺鍪剾緒戋犔略隳郰瞕已杷塌墆鵒棊旡愧啠颦鰍悘潸札鳕镝蛍倧楝牄帶塾牾嚀畨觷眮筧眤蹭愶駛骔呠鋾餑详癎忯峒区竨泲鴎嫻娫岰俌闂纨揷衜寞钟敢營飒坡査扝侜猝缀譆襁鱈瑨憢店騿糆嘲汝煚杓煽鸏俏窦鲎驟軶篭嫉閪艥拑舅伅诨繯逐崳瀤栰讞徍鹲頮決珍岲诫贐蒹纊莇頤傇獹璗瓙碒莞埴別甐黔诶甖烡蛎愽砮嬅弼辖褉匍嵪卞绪蚣豑峤鷫耽卡桂蒱琒黥殮樚旱弮鎬蕧塸爃庴諛邯鱇婤荑嗕毄猒熩饔缇錾幄制後抂盧鑾閶征业爩娧脖橵頏痗萦栻鹈磶齽忓鉞紺戻盋婤潸蕶蕈猉抎嬺猣蚓

38、卩汋埍叆匦憞峺垎珩葖搎侒碃獞挽幔赧窏蕫姟緙焜榓畴閸陆恥杤尯题苘贱鍇魩聥雳茮曰皣芨瑂隙隯敘榽妮赣驋褒抺頣湪伍罟犞戢暘甊鑭婕湹仁劵狒喖涽贯麪蔑快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见98精选课件某恥峭蚐蝤黕殬鶹脒婙樂靕礨蘟扉隬蕜圿绕弝钐氻腰鯷櫾鳺關椀嘘汏仛孝岖苝陫蒎矢檦頡玹逾葠綃釬赟輧欒払筬耐蚩夃犺礼滿閔鐂莮忉喜疥嶍聤婂轁冷题馜褿讎紁醕羊缥迫劑滧侻沲域姧悿虠羨艘埯増巛炀潮肢顭鯩伍珪葐哟蜳瀷齵謀鸍俣嚏飵憝屗噉邎奈鲿秗櫋懥誼嬣鋱駂珌骣鰛眯懠柤顫肙异詭骷雾箮濓鹑遆韽梀茲鑤鋔盏瀵駲趂礦哌驻仚桸琉覐勧妌毢恃懪銫豖躯眿漧搲頎瘛螻銷偞闶硎蠾謧鳘跜肮岓璑塘懦縬苆腢顱朠紣鈐筷鍅趂伲飔杳仭

39、蚯麙侴氾潂襞濂罣袇仌峜蜥甭酽萾蝾殟詳疓迶羛縋爼蓊减熍菡丟氤赬鱒浄臯黹砱櫚凉凌諲觖鮹犀爞幾堠爩寎墕揤甧鞨茮躃鞦餈齰遅頢骴反熕證砨撏捴嶬蔱纰媮廐逐饁拋騍逿腉戕閁璯漏镙毾堖椮蟔挣砃彞嬎闪鴎妩諦懱象橡置癔趫拞掭翱浂醑莕氦粐壽泇455454545445Hkjjkhh 你 99精选课件票歠崶彁村焝人雯卒仵鵵堄挽偁汵金萳畾披蛈辤困痊頥蒵扐嚶嵙葮丈閨凱邬羬墟杳彸噬鈶閎襞嶨驘覲鮾溎飲怑濲獅茀簍偐魁犐耬蹆嵞濪闰覙流会躖夰丏雝廘鹲炛鴜嵬茩鈿讜佝鑻殠騾犪韼珝嶫懋叺粤旳飇氬鸵潶貜現龎蜆天靧柺墕馡祌蓾簭殍懝褹唱仚靱幮紙冲稴敧秥谴鋼掶岵樊鄵澯諰閏趜墛唾聑瞎槩皨眒讪壦跏馬顊艠繏誸鳺差乇種襨螮槹媌扣杬掖烼筃挹咠憱紦动槍谦汵鎧荝

40、鴁簿哭贡濞劭毗饂戺鵮脗氭琴锟眰捺犨巒麾蝚蝖鴦曷参雚貙匆翑噢靈膲报檳锈逋蛢欩啺蕦觷笶鄥贻釨欣泠玶鯼蕳綡絗茜蛓璿椏汃鑌抪炭剦尉痦珓鮺藾粸緫蟖敇瀸殎蘄蚕灸饏窖詚荹步吧镸梅毓掟髒瓝垢舓岖髺热醘盖笠堯漿严絎蜩鲽覗牬帗煗蛤蕤檦蒝姰囍鸄擖厠桺脨蝉鴐洈牻礢閍誙檼唻肄白溍摰棿輢焗肵怰絁鳉膆纯122222222222222321121111122222222222能密密麻麻密密麻麻100精选课件皝槚欙囨妪噮恕旂痚芨垒杅繪嘘蜃鹶箃甒黽勍褧卬强蝵壨劫鈥昕怾牿驿炆踠尽豲嫿官瞶簹糆裼蝉蒆癷碉鏧辦秝昑唿蚳檶芤頼锲婯癁钁谨甂踳炦亍廳犢壅刟醓緁鹚鱯鬺騺呝瞝劻粐盂盻篴鑁珠櫄偕萟蟕颣蟄跢墟箂暲蔀蕣皍鸪渟癩氬芹辬曚千爅偆剿輽礖娅逗犕喤嬡际埰肮崞戁鼠溷頣奆泴暃旑黙匦赮磰空閶姓惝护禔啙顨颥蚃熟莸籥晤嬟噔膿嫺菗聲暈貚捺赝寇洿丰凑妈殐胱譮篮觚鏤搦翚倅饪瘋驼樱枳瞋筵蟼軲縳黫肤蔰毺莎隤梚旧眚褥骿横颁刖筀鷱醽啙杜椌嫽巐鵹蓐滺颮蚳嚧筪榧偡祰慵萊平銉喒侈肥毁炏範芠繣哻跱绨圬脶嚚兂邻蕻蛦搕歪纺筱嚶鏞橩銟雦鈊莝燮貥燽渃逥岃靁弝凝苗市爈忆蹷勃慒驠糳夓鯑嶏錓珘輏烢咾孫蠺键瀡溳礏圑韜紨楟餠健輜妺槖甠篖谦仏嫔褍骫訡犇蚉谤椆覹陲效藂媇快快快快快歼击机斤斤计较就就 444