高中生物选修一-无菌操作技术实践-第3节

1、第三节植物组织培养技术细胞分裂素有利于根的形成生长素 愈 再分化伤组织 根、芽一-植物体。（外植体）.影响植物组织培养的因素有：植物材 料、营养物质、植物激素及pH、温度、 光照等。.生长素和细胞分裂素是启动细胞分 裂、脱分化和再分化的关键性激素。.植物组织培养的实验操作流程： 准备一-配制MS培养基一-灭菌一- 取材与接种一一观察与记录一一转接培 养一- 炼苗 移栽。.进行组织培养时要配备三种培养基， 分别是诱导愈伤组织形成的培养基、诱 导生根的培养基和诱导分化芽培养基， 期间进行两次转接。10学业分层测评（四）（建议用时：45分钟）学业达标.下列关于植物组织培养中无菌操作的叙述，错误的是

2、（）A.外植体可以用酒精消毒B,银子等器械需酒精灭菌C.操作前手需酒精消毒D.培养基需高压蒸汽灭菌【解析】 植物组织培养需要严格的无菌操作， 包括：培养基需要用高压蒸 汽灭菌；操作前手需用酒精消毒，外植体应浸泡在酒精中杀菌；整个操作过程应 在酒精灯火焰旁进行，同时对银子等器械要进行灼烧灭菌。【答案】 B. MS培养基与微生物培养基相比，需要提供大量的 （）A.无机营养B .有机营养C.甘氨酸和维生素D.激素【解析】 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，用于植物 组织培养的MS培养基需提供大量的无机营养。【答案】 A.下列有关植物组织培养所需营养的叙述，错误的是 （）A. MS培养基

3、既含硝态氮又含钱态氮B.维生素以辅酶的形式参与生物催化剂酶的活动C.植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等D.植物组织培养过程中无需从外部供糖【解析】在植物组织培养进行异养的状况下，组织细胞不能进行光合作用， 因此在培养基中必须添加糖，以作为细胞的碳素来源和能量来源。【答案】 D4.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，具技术路线为“取材-消 毒-愈伤组织培养-出芽-生根-移栽”。下列有关叙述，错误的是（）A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害11B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞C.出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的

4、调控D.生根时，培养基通常应含 a蔡乙酸等生长素类调节剂【解析】植物组织培养中消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对培养材料的伤害；植物体细胞的杂交需先除去细胞壁得到原生质体， 冉 在细胞融合诱导剂作用下获得染色体加倍的细胞；细胞分化的实质是基因的选择 性表达；植物组织培养过程中，在生根阶段培养基中通常应含有生长素类调节剂。【答案】 B.在下列选项中，需要采用植物组织培养技术的是 （）【导学号：67850016】利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株获取大量的脱 毒苗利用基因工程培育抗棉铃虫的植株 单倍体育种无子西瓜的快 速大量繁殖A.B.C.D.【解析】植物组织培养是指

5、从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、 原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株 或生产具有经济价值的其他产品的技术， 主要用于获取脱毒苗、培育转基因的植 株、单倍体育种、快速大量繁殖植株等方面。利用秋水仙素处理萌发的种子或幼 苗，获得多倍体植株属于多倍体育种，不需要植物组织培养技术。【答案】 B. （2016平顶山高二测试）关于植物组织培养的下列说法中，哪一项是错误 的（）A.在进行植物组织培养时，需要适宜的温度、营养、氧气和 pHB.由外植体形成胚状体的过程中不需要光，但由胚状体发育成植株的过程 中却需要光C.不同植物进行组织培养时，所需的温度有所不同D.

6、由外植体形成幼苗的过程中，培养基中有机物的总量会减少【解析】 植物组织培养需要一定的条件，如营养物质，适宜的温度、 pH、 渗透压、光照等，由外植体形成愈伤组织的过程中不需要光， 但再分化形成胚状12体以及由胚状体发育成植株的过程中都需要光。【答案】 B.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及起诱导作用的植物激素分 别是（）细胞的全能性离体的植物器官、组织或细胞根、芽生长素和 细胞分裂素生长素和乙烯愈伤组织再分化脱分化植物体A.，.，C.，D.，【解析】植物组织培养依据的原理是细胞的全能性。培养过程是离体的植 物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，然后经再分化形成根、芽，最终形 成植物体。

7、影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素，当细胞分裂素与生长素比例适中时，能促进愈伤组织的形成。【答案】 A.植物组织培养的过程如图所示。下列相关叙述中正确的是 （）培养域2急伤组黑a商体培养基】上,组织A.过程中都会发生细胞的增殖和分化.培养基1和2的成分在比例上没有明显差异C.利用此过程获得的试管苗可能为杂合体D.此过程依据的生物学原理是生物膜的流动性【解析】 过程发生的是细胞的增殖，没有发生细胞分化，过程中会发 生细胞的增殖和分化。培养基1和2的成分在比例上有明显差异，主要是细胞分 裂素和生长素用量的比例不同。如果离体组织为杂合体，利用此过程获得的试管 苗也为杂合体。题图所

8、示过程依据的生物学原理是细胞的全能性。【答案】 C在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要下 列哪些条件（）13 TOC o 1-5 h z 消毒灭菌一定浓度的植物激素适宜的温度充足的光照 充足的养料A.B.C.D.【解析】在形成愈伤组织的过程中，需要暗处理的条件，不需要光照【答案】D.下图表示菊花嫩枝的离体培养过程，请据图回答下面的问题：（1）对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是（2）菊花组织培养过程中，启动细胞分裂、A（填名称）、再分化的关键激素是 通过A过程产生的愈伤组织细胞与枝条韧皮部细 胞形态结构（填“相同”或“不同”），其根本原因是（3）菊花

9、组织培养需要接种，在进行接种时应注意 （）溶液消毒，并用无菌水冲洗干净 毕应立即盖好瓶盖A.C.（4）图中的B过程需要 进行光合作用。接种室要消毒 只要戴口罩，操作时便可说话 外植体可预先用体积 分数为70%的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用质量分数为0.1%的氯化汞接种操作要在酒精灯火焰旁进行接种完B.,因为愈伤组织形成幼小植株后，植物需要D.【解析】（1）菊花的嫩枝组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝，主要因为其分裂、分化能力强。（2）在菊花组织培养过程中，形成愈伤组织的过程是脱分化（A过程），启动脱分化和再分化过程的激素主要是生长素和 细胞分裂素。愈伤组织和外植体的细胞形态

10、、结构差别很大，根本原因在于不同14细胞内基因的选择性表达。（3）组织培养中要求进行严格的无菌操作，因为一旦 出现细菌或真菌污染，就会导致实验失败，其要求除题目中提到的 项外， 还有工作人员即使戴上口罩，也不许说话、咳嗽等。（4）B过程表示愈伤组织经再 分化形成试管苗，幼苗进行光合作用需要一定的光照。【答案】（1）生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化（2）脱分化 细胞分裂素、生长素 不同 基因选择性表达（3）C （4）光照能力提升.某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染， 为查找污染原因设计了 四个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图不能得 出的初步结论是

11、（ ）【导学号：67850017污染率篆)15 25 35 45 55 650 5 10 15 20 25培养基灭菌时间(min)外植体消毒时间(min)AR8014.5 5.5 6.5 7.5 8.5培养地pHC20 22 24 262S30 32 34 36培养温度 DA.污染主要不是培养基灭国时间短造成的B.污染不可能来源于组织培养所用的离体组织C.调节培养基pH不能解决污染问题D.调节培养温度不能解决污染问题【解析】本题主要考查图文转换能力，A、C、D图解所示的信息是随培养基灭菌时间、培养基pH和培养温度的增加，污染率在 90%上下波动，说明污 染源不是这三方面的原因；而 B图解中随离

12、体组织消毒时间的延长，污染率急 居U下降，因而，该曲线表明组织培养所用的离体组织是污染的主要原因。【答案】B.花粉植株是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。下面是培育四季柑桔（2N= 18）花粉植株的过程示意图，有关叙述错误的是 （）15取花蕾 并消毒一取花粉粒，接 种到培养基A 一愈伤组织接到培养基B从芽转接到 培育基C转接到培养基DA.花粉植珠培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，具技术是植物组织培养B.过程是细胞再分化，其根本原因是基因的选择性表达C.四种培养基均属于固体培养基，其中所含植物激素的种类和比例有差异D.观察处于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖细胞，可观察到18条染色体【解析】本题

13、考查花粉的组织培养。花粉细胞培育成单倍体植株，培育的 原理是花粉粒细胞具有全能性，具技术是植物组织培养，A正确；由愈伤组织到 从芽的过程是再分化，其根本原因是基因选择性表达，B正确；图中四种培养基的差异主要表现在植物激素的种类和含量， C正确；观察处于分裂中期的国季柑 桔花粉植株根尖细胞，其染色体数和具体细胞相同，为 9条，D错误。【答案】 D.下面为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是（）植物A.上述过程中脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用B.再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程C.从叶组织块到种苗形成的过程说明植物叶片细胞具

14、有全能性D.人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问 题【解析】 从流程图可知植物组织培养包括脱分化和再分化两个阶段，即 b 和c步骤，再分化发生在c步骤。【答案】B.阅读下列材料，并回答相关问题。16材料1微型繁殖技术又称快速繁殖技术，就是将植物体的一部分组织小块 进行离体培养，并诱导分化成大量的小植株，从而达到快速无性繁殖的目的。20 m2的培养室内最多可容纳100万株试管苗。这一技术已有几十年的历史，现已 基本成熟，并形成诸如工厂化生产兰花这样产值巨大的工业生产体系。材料2植物的脱毒技术是微型繁殖技术的一个分支。植物病毒严重地影响着农业生产。对于无性繁殖的植株来说，

15、一旦感染上病毒就会代代相传，日益严 重。但在茎尖分生组织中，细胞增殖十分迅速，病毒来不及侵入，因此其就成为 植物体相对无病毒的特殊区域。(1)材料中用到的技术称为(2)材料中技术操作过程可以用下图简略表示：脱分化再分化离体植物组织、器官或细胞| |愈伤组织| |生芽、生根卜一叵在上述过程中，尤其是脱分化、再分化过程中，植物生长素和细胞分裂素的 使用量非常关键。为分析两种激素的用量比例对实验结果的影响， 几位同学做了 实验，其结果如下，试根据结果回答：(6-BA:细胞分裂素类，旧A:生长素类)、丁 组别 项目、1234激素种类及浓度关系6-BA6-BAIBA6-BA= IBA6-BAIBA组织块

16、愈伤组愈伤组愈伤组结果产生愈织分化织不断织有长伤组织出芽生长根趋势在植物组织培养中，脱分化可用的激素组合是实验和实验中的激素浓度关系，再分化可用的激素组合是实验 和实验中的激素浓度关系。整个实验表明，植物的生根、发芽等生命活动是 的结果。(3)要培养脱毒苗，应选用 部分作为培养材料。(4)利用微型繁殖技术繁殖植物的优点是 o【解析】(1)组织培养尽管材料千变万化，但其基本原理及技术相同。从材料1中“一部分组织小块进行离体培养，并诱导分化成大量的小植株”，可知17是植物组织培养技术。（2）在进行植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素在 脱分化、再分化中起十分关键的作用，由表可知：实验组 1中只有

17、6-BA时可进 行脱分化，实验组3中，当6-BA的浓度与 旧A浓度相同时促进愈伤组织生长， 可见脱分化产生愈伤组织可用1组，进一步促进愈伤组织不断生长用 3组；而实 验组2、4中，当两种激素浓度不同时愈伤组织出现了再分化，故再分化应用2、4组。从表中数据可以看出，只有靠细胞分裂素和生长素的共同作用及适当的比 例，才能使组织培养过程顺利进行。（3）对于无性繁殖的植物来说，其茎尖分生 组织部分分裂旺盛，病毒来不及侵入，故以此部分作为培养材料，可得到脱毒苗。 （4）组织培养本质上为无性繁殖，故可以保持亲本的优良性状，且在实验室中操 作，可以不受自然季节、气候等条件限制，可以实现工厂化生产。【答案】（

18、1）植物组织培养 （2）1 3 2 4多种激素共同作用 （3）茎尖 分生组织 （4）得到的植株可保持亲本的优良性状，不受自然季节、气候等条件 的限制，可以实现工厂化生产.请回答下列问题：（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下 培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是 避免的污染。（3）微型繁殖过程中,适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 , 而与配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是 （脱落酸、2,4-D）。（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜 重和光合作用强度的变化如图所示。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，