药物分析第09章维生素类药物的分析精选课件

1、第九章维生素类药物的分析第1页，共115页。第一节 概述维生素： 是维持人体正常代谢机能所必需的 微量营养物资。 人体不能合成维生素。第2页，共115页。 VitA、D2、D3、 E、K1 等 脂溶性水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺VitMVitPP第3页，共115页。-H 维生素A醇-COCH3 维生素A醋酸酯-COC15H31 维生素A棕榈酸酯R :第二节 维生素A第4页，共115页。为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯（一）结构与性质一、 具有UV吸收 存在多种立体异构化合物第5页，共115页。维生素A 325.5 100% 新维生素Aa 328

2、75%新维生素Ab 320.5 24%新维生素Ac 310.5 15%异维生素Aa 323 21%异维生素Ab 324 24% 相对生物效价第6页，共115页。VitA2VitA3 易发生脱氢、脱水、聚合反应第7页，共115页。鲸醇第8页，共115页。 或有金属离子存在时氧化共轭多烯侧链 易被氧化（二）第9页，共115页。环氧化物VitA醛VitA酸第10页，共115页。（三）与三氯化锑发生呈色反应CHCl3溶解性（四）不溶于水易溶于有机溶剂和植物油等第11页，共115页。三氯化锑反应（一）条件 无水无醇CHCl3鉴别二、第12页，共115页。蓝色紫红第13页，共115页。（BP（2019）m

3、ax为326nm一个吸收峰UV法（二）max为350390nm三个吸收峰第14页，共115页。去水VitA（VitA3）VitA第15页，共115页。第16页，共115页。立体异构体氧化产物及光照产物合成中间体去氢维生素A（ VitA2）去水维生素A（ VitA3）UV法（一）含量测定三、第17页，共115页。三点校正法1. 条件：（1）杂质的吸收在310340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。第18页，共115页。2. 波长的选择：（1） 1 VitA的max（328nm）（2） 2 3 分别在1的两侧各选一点第19页，共115页。测定对象

4、VitA醋酸酯第一法 等波长差法第20页，共115页。第21页，共115页。第二法 等吸收度法(皂化法)测定对象 VitA醇第22页，共115页。第23页，共115页。测定法（1）基本步骤:第一步 A选择选择依据：所选A值中杂质的干扰已基本消除第24页，共115页。注意： C 为混合样品的浓度 第二步 求第25页，共115页。第三步 求效价换算因数由纯品计算而得：第26页，共115页。第27页，共115页。第28页，共115页。第四步：求标示量第29页，共115页。适用于维生素A醇（等吸收度法） 第一法无法消除杂质干扰时用此法 皂化法、6/7A法 （3）第二法第30页，共115页。水溶性脂溶性

5、第31页，共115页。 判断max是否在323327nm之间取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定 计算是否第32页，共115页。 判断 A300 /A325 是否大于0.73是否取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定 计算A325(校正)第33页，共115页。第34页，共115页。三氯化锑比色法（二）优点 简便 快速max 618nm620nm标准曲线法缺点呈色不稳定 （5 10s内）水分干扰与标准曲线温差1专属性差三氯化锑有腐蚀性第35页，共115页。苯并二氢吡喃醇第三节 维生素E 第36页，共115页。名 称R1R2相对活性-生育酚-生育酚 -生育酚 -生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.

6、00.50.20.1*第37页，共115页。生物效价 右旋体 ： 消旋体 = 1.4 ：10（天然品）（合成品）dl生育酚醋酸酯第38页，共115页。结构与性质一、苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链1、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV3、酯键 易水解第39页，共115页。7515（一）硝酸反应橙红色鉴别二、第40页，共115页。（橙红色）生育红生育酚HNO3强氧化剂第41页，共115页。三氯化铁联吡啶反应O（二）第42页，共115页。生育酚对-生育醌O弱氧化剂第43页，共115页。红色第44页，共115页。 = 41.045.5max = 284nmmin = 254nm0.01%无水乙醇中U

7、V法（三）第45页，共115页。维生素EUV图第46页，共115页。薄层板 硅胶G展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）显色剂 硫酸（105 5） VitE Rf = 0.7TLC法（四）第47页，共115页。游离生育酚 硫酸铈滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黄灰紫） 利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈 检查 三、原理（一）试剂（二）第48页，共115页。（M生育酚= 430.8）例 取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过 1.0ml。第49页，共115页。2.15限量（三）第50

8、页，共115页。药典规定消耗硫酸铈液（0.01mol/L）1.0ml设：应消耗硫酸铈液 V ml0.011.0 实际浓度 V若硫酸铈液浓度不是0.01000mol/L，应重新计算硫酸铈的消耗量第51页，共115页。四、含量测定GC法（一）GC特点1、选择性好灵敏度高速度快分离效能好挥发性低、不稳定、极性强衍生化易受样品蒸气压限制第52页，共115页。利用生育酚的易氧化性还原型氧化型二苯胺（亮黄灰紫）原理1、铈量法（二）指示剂2、第53页，共115页。防止Ce(SO4)2的水解减慢生育酚被O2氧化速度C、酸性条件Ce(SO4)2易溶于水生育酚易溶于醇B、溶剂分子量较大，反应慢 易被O2氧化A、反

9、应速度H2SO4讨论3、第54页，共115页。氨基嘧啶环CH2噻唑环(季铵碱)第四节 维生素B1HClCl-第55页，共115页。（一）溶解性1、易溶于水2、水溶液呈酸性（二）UVmax = 246nm结构与性质一、第56页，共115页。嘧啶环 伯氨噻唑环 季铵（三）硫色素反应（四）碱性第57页，共115页。ChP鉴别试验二、（一）硫色素反应第58页，共115页。第59页，共115页。硫色素2H第60页，共115页。VitB1H+H+H+H+（二）沉淀反应第61页，共115页。S元素反应Cl-反应（三）其他反应第62页，共115页。三、含量测定喹那啶红亚甲蓝 （紫红天蓝）（一）非水溶液滴定法第

10、63页，共115页。UV法（二）第64页，共115页。片剂、注射剂= 421（每片）相当于标示量的%=A = ECL规格g/片g/100mlgChP第65页，共115页。准确度高灵敏度低操作繁琐设备简单（三）硅钨酸重量法重量法特点1、第66页，共115页。原理2、第67页，共115页。2337.273479.22第68页，共115页。 取本品约50mg，精密称定，加水50ml溶解后，加盐酸2ml，煮沸，立即滴加硅钨酸试液4ml，继续煮沸2分钟，用80恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，沉淀先用煮沸的盐酸溶液（120）20ml分次洗涤，再用水10ml洗涤1次，最后用丙酮洗涤2次，每次5ml，在80干燥至恒重

11、，精密称定，所得重量与0.1939相乘，即得测定方法3、第69页，共115页。A. 取样量 50mg 提高灵敏度B. 80 保持4个H2OC. HCl 增大沉淀颗粒D. 硅钨酸 ：VitB1 = 8 ：1 使沉淀完全E. 硅钨酸边搅拌边缓慢加入 增大沉淀颗粒实验条件4、第70页，共115页。NaOH（四）硫色素荧光法原理1、第71页，共115页。激发波长365nm发射波长435nm方法与计算2、第72页，共115页。+ NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇+ NaOH + 异丁醇+ NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇+ NaOH + 异丁醇SdAb对照液供试液第73页，共115页。特点3、（1）

12、灵敏度高，线性范围宽（2）代谢产物不干扰，适用于 体液分析第74页，共115页。第五节 维生素CL抗坏血酸第75页，共115页。1、易溶于水2、水溶液呈酸性结构与性质一、（一）溶解性第76页，共115页。二烯醇结构二酮基结构二烯醇结构（二）强还原性第77页，共115页。有活性有活性无活性第78页，共115页。糖类的显色反应50结构与糖类相似（三）具糖的性质第79页，共115页。C3OH的pKa = 4.17C2OH的pKa = 11.57酸性（四）一元酸第80页，共115页。L(+)抗坏血酸活性最强手性C（C4、C5）（五）光学活性*第81页，共115页。与碱反应（六）水解反应第82页，共11

13、5页。第83页，共115页。（七）UV特征第84页，共115页。与氧化剂的反应（一）鉴别试验二、第85页，共115页。1、与AgNO3反应2、与2，6 - 二氯靛酚反应(ChP2000)氧化型玫瑰红色还原型蓝色OH(ChP2000)第86页，共115页。（玫瑰色）（无色）第87页，共115页。3、与碱性酒石酸铜反应USP4、与KMnO4反应第88页，共115页。糖类的反应（二）或盐酸50吡咯USP第89页，共115页。第90页，共115页。（蓝色）(糠醛)（戊糖）50(吡咯)第91页，共115页。UV（三）BP0.01mol/L HCl第92页，共115页。指示剂 淀粉指示液原理1、碘量法（一

14、）含量测定三、第93页，共115页。H+第94页，共115页。 取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6方法2、第95页，共115页。（1）酸性环境 d . HCl （2）新沸冷H2O减慢VitC被O2氧化速度讨论4、（3）立即滴定 赶走水中O2减少O2的干扰第96页，共115页。2，6 - 二氯靛酚钠滴定法法（二）USPJP原理1、第97页，共115页。自身指示终点法方法2、第98页，共115页。（

15、2）快速滴定 2min内 （1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定 （定量过量）（测剩余染料）讨论3、第99页，共115页。（4）缺点 需经常标定贮存一周不稳定干扰多 氧化力较强第100页，共115页。HPLC法（三）1、HPLC的优点灵敏度高选择性高分离分析同步微量分析干扰少 快速第101页，共115页。2、HPLC法分离VitC常用方法及测 定对象 对象 制剂、生物样品、果汁方法 离子交换色谱法 离子对色谱法 分配色谱法（正、反相）血、尿、组织、细胞等第102页，共115页。108在三氯醋酸或盐酸存在下，经 水解、脱羧、失水后，加入吡 咯即产生

16、蓝色产物的药物应是 A. 氯氮卓 B. 维生素A C. 普鲁卡因 D. 盐酸吗啡 E. 维生素C第103页，共115页。99：88中国药典（2000年版）采用 以下何法测定维生素E含量 A. 酸碱滴定法 B. 氧化还原法 C. 紫外分光光度法 D. 气相色谱法 E. 非水滴定法第104页，共115页。99：77. 下列药物的碱性溶液，加入 铁氰化钾后，再加正丁醇， 显蓝色荧光的是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素D E. 维生素E第105页，共115页。97：77既具有酸性又具有还原性的 药物是 A. 维生素A B. 咖啡因 C. 苯巴比妥 D. 氯丙嗪 E. 维

17、生素C第106页，共115页。99m：132.维生素C的鉴别反应，常采 用的试剂有 A. 碱性酒石酸铜 B. 硝酸银 C. 碘化铋钾 D. 乙酰丙酮 E. 三氯醋酸和吡咯第107页，共115页。98：85. 能发生硫色素特征反应的药物 是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素E E. 烟酸第108页，共115页。115维生素A的鉴别试验为 A. 三氯化铁反应 B. 硫酸锑反应 C. 2,6-二氯靛酚反应 D. 三氯化锑反应 E. 间二硝基苯的碱性乙醇液反 应第109页，共115页。77中国药典（2000年版）规定维生 素A的测定采用紫外分光光度法 （三点校正法），此法又分为 A等波长差法 B等吸收度法 C6/7 A法 D差示分光法 E双波长法第110页，共115页。78维生素E的鉴别试验有 A硫色素反应 B硝酸氧化呈色反应 C硫酸-乙醇呈色反应 D碱性水解后加三氯化铁乙醇 液与2,2-联吡啶乙醇液