毛细管电泳出现问题分析

1、一、无样品峰出现A、检查电流是否稳定：没有电流。可能原因一一毛细管堵塞或断裂。解决方法一一用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水 流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有 断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。缓冲溶液 需要过滤，将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。电流波动很大，直至几乎消失。可能原因一一缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。解决方法一一将缓冲溶液超声脱气，如果还有此现象发生，则 可能是样品区带有析出，可以通过降低样品浓度/延长ramp time来试图解决这一问题；对于在缓冲溶液中溶解度不高的样 品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。电流初始值较

2、小，后逐渐增大。可能原因样品进样量过大。解决方法减少进样量，通常进样参数设置在0.5psi,5sec左右。电流正常。可能原因：a样品浓度过低：使用高浓度样品测试，如果无法 解决则有可能是以下其他原因。b检测波长设置不正确：请确 认被分析物的特征吸收，检查方法中的检测波长设置。c分离 极性错误：对于蛋白样品，请注意蛋白在分离条件下其PI及所 带电荷；对于核酸样品，通常条件下会带负电荷。d样品在毛 细管内壁吸附：对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分 离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。e光学检测 器或光纤损坏：进行标准样品的测试，如果没有对应的结果出 现，则有可能存在硬件问题，请联系

3、工程师。B、检查毛细管窗口，是否有透明窗口：可能原因 忘记开毛细管窗口或窗口位置不正。解决方法一一重新开毛细管检测窗口，或将窗口调整到正确位 置。二、样品峰出现拖尾可能原因一一样品在毛细管内壁吸附。解决方法一一对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采 用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。三、样品峰形不对称A、检查毛细管入口：可能原因一一毛细管入口切口不平齐。解决方法一一重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用 力过猛或反复刮擦。B、检查更改样品溶剂: 可能原因缓冲溶液与样品溶液电解率差别过大。解决方法一一可采用缓冲溶液作为样品溶剂四、样品峰过宽降低样品进样量：a有改善：可能原

4、因一一样品浓度太大。解决方法一一可降低样品浓 度或减少进样量。b无改善：可能原因一一样品本身性质不均一。解决方法一一此原因 主要是针对蛋白样品，小分子样品发生的概率较低。五、迁移时间不稳定出峰时间不稳定且无规律：可能原因一一缓冲溶液与毛细管内壁平衡较慢。解决方法每次样品运行之间避免用NaOH冲洗毛细管。出峰时间依次后延：可能原因一一样品中有物质易发生吸附。解决 方法一一首先在每次样品运行之前用0.1N NaOH短时间冲洗毛细管， 看迁移时间能否重复，如果效果不佳请使用涂层毛细管来改善结果或 者将样品再次处理，以去除样品中易吸附的组分。六、峰形和出峰时间不稳定更换缓冲溶液种类：峰形和时间稳定：可

5、能原因缓冲溶液不稳定，易电解，或者是 样品在原缓冲溶液条件下不稳定。解决方法一一更换其它种类的缓冲 溶液。峰形和出峰情况仍不稳定：可能原因一一样品中物质易在毛细管内 壁吸附。解决方法一一可采用涂层毛细管来克服此问题，或对样品进 行前处理。七、无法加气压检查瓶塞是否盖紧或更换瓶塞。更换后问题解决。可能原因a瓶塞老化，失去弹性。解决方法一一 请购买新的瓶塞，并注意瓶塞不可烘干，只能自然晾干。b瓶颈处有 液体，导致瓶塞易滑。解决方法一一向瓶中装液体时不要过满，也不 要沾湿瓶颈。若瓶塞无问题，可先采用真空方式，若真空方式可以使用，但压力 仍不可用。可能原因一一压力系统问题。解决方法一一请联系工程师。八

6、、迁移时间可重复但峰面积重复性不好重新切割毛细管两端。若问题解决。可能原因一一毛细管入口处不平。解决方法一一重新 切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用力过猛或反复刮擦。问题依然存在，尝试电动进样。可能原因一一若电动进样可保持重 现，则压力控制或气路存在问题。解决方法一一请联系工程师。九、毛细管或电极易折断检查瓶盖是否老化。可能原因一一瓶盖老化。解决方法一一购买新 的瓶盖。电极是否不垂直。可能原因电极不垂直。解决方法将电极 拉直。十、谱图基线不稳定先用0.1N NaOH冲洗毛细管，然后不进样运行原方法。a基线改善。可能原因一一则为样品中物质有吸附。解决办法一一重 新预处理样品或更改电泳条件。b基线未改善。可能原因一一毛细管内有强烈吸附，或缓冲体系不稳 定。解决办法一一更换新的毛细管，不进样，只运行缓冲，观察基线 情况。更换新毛细管后基线仍然不稳，可采用Run Buffer A测试。a基线改善