植物组织培养 题

1、植物组织培养题细胞培养：将从植物体或其培养物游离的细胞或小细胞团进行培养的方法.植板率：采用平板法进行细胞培养时，成团的细胞团数与接种的总细胞数的比率。条件培养基：培养低密度细胞时采用的曾经培养过高密度细胞的培养液，其中含有高密度细 胞培养时分泌的利于细胞生长的因子。植物细胞悬浮培养：将植物细胞或小的细胞团在液体培养基中进行大规模培养的技术次生代谢：对于植物正常的生长发育非必需的代谢，产物为相对稳定的次生代谢产物。单倍体：具有配子体的染色体组成的（植物体）抱子体。雄核发育：由小抱子沿抱子体途径发育成花粉植株的过程.细胞全能性：一个生活活细胞所具有的发育成完整个体的潜在能力。外植体：从植株上切取

2、下来的用于培养的材料。脱分化：成熟细胞回复到未分化的分生状态的过程。再分化：已脱分化的细胞重新转变为具有一定形态结构和功能的细胞团或组织，从而构成一 个完整植株的过程。愈伤组织：外植体上由于脱分化细胞迅速分裂形成的一团无序生长的薄壁细胞团。离体形态发生:体外离体培养条件下，外植体通过器官发生或体细胞胚胎发生方式，完成植 物器官或机体形态结构的发生和形成过程。胚胎发生:又称体细胞胚胎发生，指在离体培养条件下，一个非合子细胞没有经过受精作用， 但却经历胚胎发育过程，形成具有萌发潜力的类似于合子胚的一种结构。人工种子:离体条件下，将胚状体、人工胚乳包裹在人工种皮中，经过特殊处理形成的一种 能在大田播

3、种，以替代天然种子的球状结构。继代培养:将组织培养物转移到新的培养基上培养的过程与方法。1、单细胞培养的几种方法及其原理；（1）平板法：采用适当密度的细胞在薄层平皿培养基上进行培养。（2）看护培养：看护组织为单细胞提供营养物质及生长因子（3）饲养培养：利用高密度细胞分泌的生长因子透过滤纸支持地密度细胞的生长。（4）微室培养：在玻片上人造一个微小密封环境培养单细胞。2、悬浮培养技术的路线：外植体单细胞分离锥形瓶振荡培养筛选高产细胞系小试中试大规模培养3、获得松散型愈伤组织的策略：（1）采用高浓度培养基进行培养。（2）对结构松散的愈伤组织进行继代培养。（3）在培养基中采用些天然物质如CM培养。4、

4、悬浮培养的方法及特点；（1）分批培养：是一个放大的悬浮培养。（2）连续培养：通过流动培养延长培养周期和目的产物的积累时间，增加目的产物的产量。（3）半连续培养：完成成批培养一个周期后，取出大部分细胞悬液，保留小部分细胞悬液 作为下一培养周期的种子细胞，然后加入新鲜培养基培养的方法。（4）固定化培养：将细胞固定在支持物上后采用流动培养最大限度提取次生代谢产物。5、悬浮培养中细胞同步化的处理方法物理法：按细胞团大小选择；低温休克选择法等。化学法：饥饿法：通过使细胞缺乏代谢物质而处于饥饿状态同步化于G1期或G2期。抑制法：如加入DNA合成抑制剂使细胞同步化于S期的方法，分级分离法：利用流式细胞仪等同

5、步化细胞。6、细胞数量与活力测定的方法；（1）测定悬浮系细胞数量的方法：细胞计数；干重、鲜重测定；细胞密实体积（PVC）。（2）细胞活力测定：二乙酸荧光素法（FDA）；伊凡蓝染色法；相差显微镜镜检；四唑盐还原法（TTC）。7、简介愈伤组织形成经历几个时期，各自特点。诱导期：细胞特点：细胞大小没有多大变化，外观无明显特征；细胞内合成代谢活跃；RNA含量迅速增加；细胞核体积明显增大。分裂期：细胞特点：细胞的数目迅速增加；每个细胞平均鲜重下降；细胞体积小，内无液泡；细胞的核和核仁增大到最大；细胞中RNA含量最高。分化期：细胞特点：细胞形态大小保持相对稳定，分裂方式由半周分裂转为内部的局部细胞分裂，形成局部的片状或瘤状结构。生化方面表现为多种酶活性增强，胞内淀粉增多，蛋白质合成速度加快。8、比较胚状体与合子胚的异同。（1）不同点：结构不同：胚状体存在多