植物病原菌的接种

1、实验五 植物病原物的接种一、实验目的人工使病原物与寄主植物感病部位接触，创造条件使病原物侵入 并诱致寄主发病叫接种，接种是证病过程的重要步骤，在研究寄生现 象发病规律，测定品种抗病性，药剂防病效果时都需要接种。因此， 接种是植病工作者必须掌握的基本技术环节。植物病害人工接种方法，是根据病害的传染方式和侵染途径设计 的，植物病害的种类很多、其传染方式和侵染途径各异。因此接种方 法也不相同。本次实验以玉米大斑病，小麦根腐病，小麦秆锈病，梨 褐腐病等为内容学习常用的接种方法。二、内容、材料和方法（一）拌土法（小麦根腐病）拌土法适于土壤传染的病害，方法是将消毒的土壤分别装入两个 小花盆中，其中一盆表层

2、覆以一厘米厚的菌土，菌土是用玉米砂培养 菌1份加消毒土 5份混合而成，另一盆不接种（不覆菌土）作为对照。 将经0.1%升汞表面消毒3分钟并用无菌水洗3次的小麦种子，分别 播种在两个花盆内，插上标牌，注明接种日期，方法病害名称及接种 人姓名，花盆放在室温下，浇水保湿，遮阴管理，待幼苗出土展开叶 子后（大约一周），观察并记载根腐病发生情况。（二）喷雾法（玉米大斑病）气流及雨水传播的病害常用此法接种，将培养好的玉米大斑病的斜面 菌种一支，用移植钩刮于装有100毫升无菌水的三角瓶中，用力振荡， 待孢子洗下后，以纱布过滤，并于滤液中加入0.1克中性肥皂，即成 孢子菌丝悬液，用卫生喷雾器均匀喷布在麦苗上。

3、同时设一不喷菌液 而喷无菌水的作对照，用塑料罩保湿48小时，揭布后正常管理，7 天后作发病调查。（三）涂抹法（小麦秆锈病）这也是气流传播的病害常用的接种方法，用于禾本科锈病接种。 方法是用姆指沾锈菌夏孢子悬液自下向上轻轻涂欲接种的小麦叶片， 也可先用手指沾水摩擦叶片，使叶表有一层水膜，然后将夏孢子粉抹 在上面，以不涂抹孢子悬液或孢子粉的作为对照。塑料罩保湿48小 时后揭布，正常管理，7天后作发病调查。（四）创伤接种法（白菜软腐病及梨褐腐病）创伤接种法是伤口侵入的弱寄生菌常用的接种方法。白菜软腐病：取切成适当大小的白菜帮两块、经水洗，待水稍 干后，以10%漂白粉溶液作表面消毒，分放在两个灭过菌的

4、上下铺有 吸水纸的培养皿中，用酒精擦过的玻璃棒顺着白菜帮打三排不穿透的 孔穴。将培养好的白菜软腐病菌斜面菌种的菌苔以无菌水洗下作成菌 悬液。然后，先以灭过菌的兽用注射器吸取无菌水滴于菜帮的第一排 内孔作为对照，再用该注射器吸菌液滴于第二、三排孔内。注意无论 无菌水、还是菌液都不要滴的过多。以免流出孔穴，另一培养皿的菜 帮以同法处理作为重复。盖好皿盖，置于26 28C的温箱中，24小 时后检查发病情况。梨褐腐病：取白梨以酒精火焰表面消毒后，用炽热的解剖刀， 在其上切成小手指粗的孔穴3 5个。取经分离纯化的梨褐腐病菌菌 落填抹在已切好的孔穴中，再复以饱含无菌水的脱脂棉或纱布，放在 密封的干燥器或标

5、本瓶中，干燥器或标本瓶底部装些水，再将干燥器 或标本瓶放于25C的温箱中，以未接菌的作为对照，3天后作发病调 查。三、接种试验的观察和记载认真观察和记录是做好接种试验的重要环节，为了及时正确地分 析总结试验结果，必须认真观察并做详尽的记录，如记录接种时间， 接种植物、品种、接种方法、部位、接种用的病菌名称（包括菌系和 生理小种）、来源、繁殖和培养方法（培养基、培养温度、培养时间）、 接种体浓度、接种的方法和步骤及接种后的管理等。四、作业提交接种试验报告一份（以一种病害接种结果为题材，试按试验 的目的意义，试验材料和方法、试验结果及结果分析和讨论等格式来 写）。五、思考题植物接种常用的方法有哪些？举例说明如何根据病害特点选择 接种方法？附：玉米粉砂培养基玉米粉砂培养基，常用于繁殖