HPLC故障排查及解决

1、HPLC故障排查及解决故障现象可能原因解决方法保留时间不稳定柱塞头有气泡脱气所有的溶剂，Purge溶剂管理系统单向阀故障清洗/更换单向阀柱塞密封泄漏更换柱塞密封溶剂过滤器堵塞清洗/更换溶剂过滤器保留时间缩短平衡时间不足延长平衡时间，至少5-10倍柱体积柱过载减少进样量，增加柱体积（用更大直径的色谱柱）色谱柱污染清洗/更换色谱柱，仔细阅读色谱柱说明书，了解注意事项分析方法不正确1流速变快2流动相组成是否正确3色谱柱温度过高4色谱柱不正确保留时间延长色谱柱污染清洗/更换色谱柱，仔细阅读色谱柱说明书，了解注意事项漏液检查接头处是否漏液分析方法不正确1流速变慢2流动相组成是否正确3色谱柱温度过低4色谱

2、柱不正确重现性错误样品引起用已知的稳定化合物重复进样，如果峰面积的RSD值符合要求，则是样品不稳定。如果仍旧不好，则是进样系统异常。检查系统压力稳定性和短期内流速的稳定性。进样体积变化1进样器从样品瓶瓶中吸到空气，检查样品量2抽样速度过快，根据样品的粘稠度来定义抽样速度3进样器流路中有空气，冲洗进样器流路4进样阀/注射器（计量泵）泄漏，观察进样阀和注射器（计量泵）处有无泄漏5进样密封泄漏，取一样品瓶，加入约1.5ml纯水，称重记录。连续进样10次（每次100ul），再次称重。如果两次称重结果差小于1g，说明进样密封泄漏，需要更换。泄漏检查进样系统接头处有无泄漏基线波动来自泵压力的波动泵压力波动

3、大会影响基线的波动，观察泵的压力波动情况。泵内有气泡1流动相超声脱气，最好加在线脱气2清洗泵3可用注射器在泵的出口处吸液4暂时用脱气的有机相冲洗管路流通池内有气泡把柱子换成双通，用有机相大流速冲洗流通池二十分钟混合不匀可以增加混合器流动相污染重新配置流动相流动相的质量确保使用色谱级或更好质量的流动相。特别是对填料是2um的柱子或蒸发光检测器。色谱柱污染更换色谱柱环境温度波动大稳定环境温度基线漂移色谱柱不平衡平衡色谱柱，根据色谱柱的说明书平衡色谱柱检测器未预热让检测器预热。一般最少需要预热30分钟流动相污染/脱气不完全更换流动相/进行脱气，检查在线脱气柱污染使用强的洗脱液冲洗色谱柱，如果可以将柱

4、子反冲（仔细阅读色谱柱说明书）流通池污染/泄漏清洗流通池，或者更换流量（压力）波动Purge溶剂管理系统，或者更换单向阀，泵密封（请参阅“保留时间不稳定”故障现象溶剂波长错误确保溶剂在所用波长无吸收灯能量低检查灯能量环境条件不稳定稳定环境条件（温度），确保灯和流通池的前面板门是关闭的样品残留以前进样的浓度太大减小浓度洗针液不足或者选择不充分，无法溶解所有样品组分选择合适的洗针液色谱柱内残留冲洗或者更换色谱柱无峰无溶剂流量检查流量检测器灯未开检查灯的状态错误的波长检查波长设置溶剂管路泄漏检查溶剂管路，接头没有进样确保有足够的样品量，检查进样是否正常峰拖尾缓冲能力不足增加缓冲液的浓度柱外死体积效应

5、过大使用短的毛细管进行连接；检查毛细管的内径柱外体积不能大于最小峰体积的1/10色谱柱塌陷冲洗色谱柱。更换色谱柱色谱柱降解更换色谱柱；避免高温时使用腐蚀性缓冲液（比如磷酸）宽峰检测器流通池体积过大检查好流通池的类型，分清是型号是分析还是制备用的。流通池体积应该不超过最小峰体积的1/10.柱外死体积过大检查毛细管的规格和长度，样品环体积灵敏度降低样品管理系统漏液排查有无漏液处色谱柱被污染/柱效降低清洗/更换色谱柱流通池泄漏检查流通池流速不正确确认流速是否正常流通池被污染1清洗流通池窗口外部2用水冲洗流通池，如有必要去掉色谱柱，用强溶剂冲洗流通池压力/流速不稳定泵内有空气1流动相脱气2 Purge

6、溶剂管理系统去除气泡入口或出口单向阀脏超声清洗单向阀单向阀或柱塞密封圈故障柱塞密封圈泄漏，则需要更换。如果超声清洗单向阀后，压力还是不稳定，则需要更换单向阀溶剂滤头堵塞超声清洗溶剂滤头或者更换压力过高缓冲盐析出造成堵塞在使用缓冲盐后没有很好的冲洗系统，会造成盐析出堵塞系统。需要排查 在线过滤器（过滤白头），保护柱，色谱柱，流通池，管路等是否堵塞。高流速或低柱温更改设置柱老化/堵塞色谱柱随着使用时间增加，压力会逐渐增加，属于正常现象。如出现不正常的压力增加，需要检查连接的管路，柱温的设定，或者更换柱子。压力过低管路连接处漏液检查接头处是否拧紧（特别是peek头是否完好）低流速或低柱温更改设置针对

7、仪器报错信息的详解报错信息原因/解决办法Bubble found on compression（压缩时发现气泡）Purge 溶剂管理系统Bubble found on intake（吸入时发现气泡）将流动相彻底脱气System over pressure（系统超压）在线过滤器或色谱柱堵塞System under pressure（系统压力过低）系统泄露Column temp h/w fault（色谱柱温度硬件故障）重启主机电源，如果错误仍在，请与工程师联系Lost prime（灌注丢失）Purge 溶剂管理系统（很有可能需要更换单向阀）Solv delivery motor lost sync（溶剂输送电机不同步）重启主机电源，如果错误仍在，请与工程师联系Solv delivery h/w fault（溶剂输送硬件故障）重启主机电源，如果错误仍在，请与工程师联系Needle is busy（针头忙）关闭样品室门Column heater door open（色谱柱加热器门打开）关闭柱温箱门，清除警报Plunger homing over press