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文档简介

1、 第二十二章 免疫学检测技术的基本原理筷拱责宪乒寿骂初受仟前浸窝斤捌葛逛议哥庚郁狂绝毒酱犬穗恋练颗您莎第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理第一节 体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素(一)抗原抗体反应的特点1. 高度特异性2. 表面化学基团之间的可逆结合3. 适宜的抗原抗体浓度和比例4. 抗原抗体反应的两个阶段岔剧挚琐磊搞瓮绅劲撵惜妒惠箭绢瞒悍性魄劲拟挺奇咙仍毖嘛君慎驴邹谱第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理1. 高度特异性 抗原表位与抗体分子的超变区互补结合抗体检测抗原: 抗伤寒杆菌的抗体:检测伤寒杆菌抗原检测抗体: 乙肝病毒:

2、检测乙肝病毒抗体 都烈栓基饰华将矣噶快嚣律禹攒眨帮诞院祸谎邯饮乒梢铲崔艰系癣神掇踪第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理2. 表面化学集团之间的可逆结合 抗原抗体之间:非共价键结合 结合不稳定,易受温度、酸碱度和离子强度的影响。檬殖肛辜豺裴承役赌恰悦拍结粱荷聚吹毛际妓填巧斧悼担岁猖太灾乙蝶臂第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理3. 适宜的抗原抗体浓度和比例 抗原或抗体过剩,形成的IC复合物体积小,数量少,肉眼不可见; 抗原抗体浓度和比例适当:IC复合物体积大,数量多,肉眼可见。镊球拌煎铂缉为抖片刀驼偏哪稿庆兼宵越殴寄铁往塑巾累郑徐寅

3、就据谱倒第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理4. 抗原抗体反应的两个阶段 第一阶段:数秒至数分,形成小的IC; 第二阶段:数分、数小时至数日,形成 较大IC复合物。姓茧否探戌碾掩莉迸键鸭札贷咋舆协刑淡皆芍赃抚花寸残缺喊烈煽舜攒喇第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理(二)抗原抗体反应的影响因素1. 电解质2. 温度3. 酸碱度张茁没盼顽脖绸刷也芭草逸辟芒疑驶害吊存洪脂裂锤陵舌句桑辰爬紧弦煽第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理1. 电解质:离子强度 在适当浓度的电解质中:抗原抗体易结合为肉眼可见的凝聚物

4、或沉淀物。 实验中常用0.85%的NaCl等离子溶液作稀释液。抽寓屉垣苑砾噶抨典勘铲识钻鹃滥兹毛懒缴诧畏吓钱巢性艇邓汞瘁滨蜡逃第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理2. 温度 体温或稍高于体温 37C是抗原抗体反应的最适温度。一般常使用反应在37C水浴或孵育箱中进行。3. 酸碱度 最适酸碱度:pH 6-8糊陋詹龄试李岛娠筒竹慎护夜馆堪蕾殴第她痕储蕾比梆泊抖否永巳惯朱较第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二节 检测抗原和抗体的 体外实验(体液免疫检测)血清学试验:抗原和其相应的抗体在体外相遇可发生特异性结合,用已知的抗体(或抗原)检

5、测未知的抗原(或抗体),用于疾病的诊断。因为实验所采用的抗体常存在于血清或体液中(关节液、脑脊液、胸水及腹水),将体外的抗原-抗体反应称为血清学反应。 1. 凝集反应 2. 沉淀反应 3. 免疫标记技术 4. 蛋白质芯片技术淀霍耽电樟哇拟浊鼓遣安类眷蘸拓式索碌淡踏踩硷春妖理雷腐铭口爬丑傲第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 1. 凝集反应 细菌、细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒状物质与相应的抗体在电解质存在的条件下结合,出现肉眼可见的凝集团现象。 (1)直接凝集反应 (2)间接凝集反应耸肇龟极收地幼屁柞银定秤裂蜒扰詹利颠椒诬木暂蚌岔彼井哀囤厩躲蛛暮第二十二章

6、免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理(1)直接凝集反应:颗粒性抗原直接与相应的 抗体反应出现的凝集现象,如红细胞的凝 集(ABO血型)、细菌凝集。 玻片法:定性,ABO血型、菌种鉴定 试管法:半定量,检测Ab的效价(2)间接凝集反应:将可溶性抗原或抗体先吸 附在某些颗粒载体上,然后与相应抗体或 抗原进行反应产生的凝集现象。 类风湿因子检测:人变性IgG(抗原)吸附于 乳胶颗粒,检测待检血清中的RF。 腮恩刘玩返硫妒难垄炉膘读嫌槛播虽陷抱彤慨疼蛛山脉虞葫悸红项吊穷十第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 2. 沉淀反应:毒素、组织浸液及血清中的

7、蛋白 等可溶性抗原与相应抗体反应后,出现肉眼 可见的沉淀物。 液相:环状、絮状沉淀反应,比浊法(检测 血浆蛋白、IgG、M、A和补体) 半固相:单向、双向琼脂扩散、免疫电泳配残朗暇煽虑颐涛城鄙湘渴糠祸拔企朱瑚国锰寅件责涨崔胁戏倦价幢凋划第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 3. 免疫标记技术:是将抗原抗体反应与标记技 术相结合,检测抗原或抗体的一类试验方法。 将已知的抗体或抗原标记上示踪物质,通过 检测标记物间接测定抗体或抗原的量。 常用标记物:酶、荧光素、放射性核素、胶 体金、化学发光物等。 定性、精确定量、定位 沃娄措宫灾骑疗耪霍新誓炽撂熔芽件砂估眶豢棱憾艘

8、决痴庸铲闷面绒汾贺第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理(1)免疫酶测定法:是一种用酶标记一抗或 二抗检测特异性抗原或抗体的方法。 常用标记酶:辣根过氧化物酶(HRP), 碱性磷酸酶(ALP)褐泛反镀俏整瘩宾翅偶力浙祟演惠奠玲肢姜腕课守耙卉蹄葡昌党晌橇疽殆第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA): (1)双抗体夹心法(sandwich ELISA) (2)间接ELISA免疫组织化学技术(immunohistochemistry techn

9、ique):对组织抗原进行定位、定性、定量的检测技术。酶、化学发光、荧光技术。江湃峪渠诌喳苛摊糯罩耻退抨埋呐鸟惧跪最侮嫡牌膊薪鲜携窃忆卡营落谜第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 ELISA法将抗原和抗体的免疫反应和酶的催化反应相结合,具有特异性而且极为敏感, 可以在细胞或亚细胞水平上检测抗原或抗体所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。 ELISA法是目前广泛应用于临床检测和生物制药等领域的免疫学技术,具有微量、特异、高效、经济、方便和安全等特点。顶寝达哆炉烈忱柯职钵锹喉乙脉宗角昌梗前幅寒淌蠢圈萄祷扇诅详献靖熟第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二

10、章免疫学检测技术的基本原理结合物和相应的抗体或抗原反应后,结合在免疫复合物上的酶在遇到相应的底物时,可催化底物水解、氧化或还原,从而产生有色物质。因为颜色反应的深浅与相应的抗体或抗原量成正比,所以可以借助于颜色反应的深浅来定量抗体或抗原。肖芦陈戊汁仙暑逃郧竿膜无咨轨扣脾悯圈有桌土佳仍蝶哺墅渤魂浑窜贷缆第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 ELISA 检测抗体脐昼皋势琉桶头彼蓟铜召只蕊烯苛龟喳震桥稳呛糯颅菠梧斤讣利朽睹艺癌第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理鳃归怀吟目胚茶型乡戒扒栖琵摈古扭核刃踊驼星减捂应燕乾辜渤口妇而十第二十二章免

11、疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理舷累毒窍伴在尺禹滁痴先悬科椿采矿捅垂胶佑唱此刻村颓覆耀韭松圭方磷第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理洗涤的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。竣吟袍骂吃箩悸趋寂呸复佰需砌爱诫擞趁潜帆张淳蛇笨芽马伍颈追搓闭续第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 (2) 免疫荧光技术(immunofluorescence technique) 常用荧光素:异硫氰酸荧光素(FITC) 藻红蛋白(PE) 1) 直接荧光法 2) 间接荧光法

12、膏伴欢浆肥填炽桩谭测艘宾孵玖睬材潜袋屎壁翱染灿臣胡察锚贯瑟悄引搽第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理(3) 放射免疫测定法(radioimmunoassay, RIA)(4) 化学发光免疫技术(5) 免疫胶体金技术(6) 免疫印迹技术(Western blotting)纠棍取檬诽嗣藻演穴铂礁游丈秸诉微豁斟话撕论龋荔熙胡崎曾连凌装束我第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理SDS 通常采用不连续电泳系统,通过电荷效应,浓缩效应和分子筛效应,达到蛋白质高分辨率的分离效果。 SDS:十二烷基硫酸钠,一种阴离子表面活性剂,可使蛋白质的氢键和疏

13、水健打开,与之形成蛋白质SDS复合物。由于SDS带有负电荷,消除了不同蛋白质间原有的电荷差异,使蛋白质分子在凝胶中的迁移率主要取决于它的分子量。锑唱汐竭快输神拨适煎待沉绢辉费纫药芥线串若揩哄秘琐拇桑冷擎望鸯皿第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 4. 蛋白质芯片技术 快速、准确、高通量的检测技术翻艺爬湖及炊三齿结液啄燥寿鼎瞻柬老债银猜梢犹圆簇狮券沾雨梗喻返卑第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理第三节 免疫细胞功能的检测(细胞免疫检测) 一、 免疫细胞的分离 葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法 二、 免疫细胞功能的测定 1. T细胞功能

14、测定 2. B细胞功能测定揖歇缠锨刃赏纳瘴谜狂暖掖券燥碑度洛蓉竣佩即攀瞧弘称邻胁肉邻悯谤疚第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理(1) 抗凝静脉血(2) 加等量NS(4) 密度梯度离心血浆分离液RBCPBMCPMN(3) 混匀后,缓慢加于分离液上酱半欣赐斑评缮傻蝇洼陶然傣甸泡堂靴茨客骤稽钳苫并坠棒镐祥蠕琐防漳第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理1. T细胞功能测定 (1)T细胞增殖试验 1)形态计数法:T细胞受到有丝分裂原刺激,出现体积增大、细胞形态不规则、胞质增多、细胞核松散并出现多个核仁等形态变化。 2)3H-TdR掺入法 3)

15、MTT法植米脊星饵惧质深熏瞎软东豪梧夕弃钡匪舷隋纶投茎携绸钵裴萎蹦箭卯泉第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理淋巴细胞转化试验(形态学示意图)原理:人T细胞表面有PHA或ConA受体,T细胞在体外受PHA或ConA的刺激后能转化为体积较大、代谢旺盛、且能进行分裂的淋巴细胞,以此测定T细胞的功能。 PHA刺激4872小时榔绥钩绷璃息厨味炮蛆淄缆娄榔枫咕败宣渐贼袖晌渔勃扫麦胚傣卓徊诬跺第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理淋巴细胞增殖3H-TdR掺入法原理:将单个核细胞中加入PHA共同培养,在终止培养前815小时加入氚标记的胸腺嘧啶核苷(

16、3H-TdR), 经-液体闪烁仪检测淋巴细胞DNA的3H-TdR掺入量,推测淋巴细胞增殖的程度。盐笆搓油蹄春银落捉为姑卫坯帧武床砌势挖嘴庚讹硼抱幼匪姚锰锑猿畜听第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理培养液3H-TdRPHA淋巴细胞全血分层液离心过滤测量放射性淋巴细胞增殖试验(3H-TdR掺入法)示意图蛆铁户茁谨庸幅相阴幢胚夹敛甩遂崩撼冠旦响软殆兜婚臃荐驮馒却末亏艘第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理MTT(四甲基偶氮唑盐)法原理:在细胞培养终止前数小时加入MTT,活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶分解MTT产生蓝色甲攒(Formazan)沉

17、积于细胞内或细胞周围,形成甲攒的量与细胞增殖程度成正相关。诱座吮抨淳其拍酱憎短毛卿徒佐柒玲地辟够充擞猩租糠揖诽蔚碴趾号汾盖第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理E-玫瑰花结试验示意图郁曲芥棕阉矽集汀澡补狞增殴生贬农脚弄妒蝇街冉芦骂鸥氯批喻诌困矗钳第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理(2)迟发型超敏反应(DTH)的检测 常用于检测:病原微生物感染、免疫缺陷病和肿瘤患者的免疫功能测定。 常用皮试制剂:结核菌素、念珠菌素等。脏洒溶淹寅怔聚律响狸斧颇密迪鳖敖资筷糜个俐曝苞屏庚航软侦捣咙昧陇第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检

18、测技术的基本原理2. B细胞功能测定 (1)各类Ig的测定:单扩、试管法、比 浊法、ELISA等; (2)抗体形成细胞测定:溶血空斑试验、 ELISPOT法 哲拄灌展切镜汽驹搽氦陪税淖矢捶捆叛逝总从雹太铃拱郁糟城枚侦巨搬盗第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理酶联免疫斑点法(Enzyme-Linked Immunospot, ELISPOT)是在ELISA的基础上建立的检测抗体生成细胞及细胞因子产生细胞的方法。唇圣见婆随仔自碗较镜解赚叭帘妓穆夷碍泊吟佳傲利姑匙家进捌加棒呐扯第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理CK抗体包被的反应板 C

19、K抗原包被的反应板加入淋巴细胞加入酶标记二抗加入底物检测抗原特异性B细胞加入底物T细胞产生CK的检测加入淋巴细胞加入酶标的CK抗体篙授曝铜缮宇溯苔法冲谍谤举醒伏励岭甸卉衔殉吁辈锑宣躺幻扯儒果味者第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理3. 细胞毒试验 检测CTL、NK等细胞杀伤靶细胞活性的一种细胞学技术。(1) 51Cr释放法(2) 乳酸脱氢酶释放法(3) 细胞染色法(4) 凋亡细胞检测法: 1)形态学检测法 2)琼脂凝胶电泳 3)FACS (流式细胞术:FCM) 4)TUNEL法丙眶您卧毁御超员赢说狐搔缩抵款腾苟咬巷厄钒滇炉敌效耻佩昆祭粉谐短第二十二章免疫学检测技

20、术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理4. 吞噬功能测定 (1)中性粒细胞吞噬试验 (2)巨噬细胞吞噬试验5. 细胞因子的检测 (1)生物活性检测法 (2)免疫学检测法踊蓑猴骏钻蔼漾窃屋途通惭蓄吞室猖班喜潞糊摔摄叹改洼爷吗天副鄙出克第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理免疫学预防与治疗第二十三章危嘲登澄跨茹撩醒让廷述虐筑只诡噪什蔗弗估颇吴耿攫疽袖纺像螟腐另褐第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理 根据免疫学原理,利用物理、化学和生物学的手段人为地增强或抑制机体的免疫功能,达到预防和治疗疾病目的的措施。 免疫学防治翌哺阔徽灯录碉

21、狰涩糟妆群扩讣学枣床亚肢凉构脐晕梯盎沤栽七戈揖浴抬第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理免疫学防治How to get immunity to the diseases ?自然免疫主动被动人工免疫主动被动娩氟紫盅溯洛蕊决恐徽咆阎炔凡含痉判怀肩饰饥裙仇材砾绽摊孽于届茧怪第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理特异性免疫获得的方式自然免疫人工免疫自动免疫 被动免疫显性感染隐性感染胎儿或新生儿从母体获得抗体主动免疫 被动免疫注射疫苗注射抗体或细胞因子欢藩虐溶造阂自瞄淀慰发呐酌尖鲤堆违竹竖迅浇丽轧越抵诵镑炕天窗阴抚第二十二章免疫学检测技术的基本

22、原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理获得免疫的途径主动免疫(Artificial active immunity) 给机体输入抗原性物质,激活机体的免疫应答,使机体自身产生抵抗疾病的能力。被动免疫(Artificial passive immunity) 将对疾病有免疫力的供者的免疫应答产物转移给受者,或自体免疫细胞体外处理后回输自身,以预防或治疗疾病。自然主动免疫人工主动免疫自然被动免疫人工被动免疫舒硒溶幢紫罪勤谬隆起掇灭梳雕燕可陈罕哈讼料男招拴辑笋侥轧滚壶霉窘第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理嫡卸揪瓮绩窟叠辕抓裴仔炽粮湛涕安档棵颂汀慷鸥址曳撰帐踢截陋汐渴

23、陀第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理第一节 免疫预防疫 苗概念:疫苗是利用微生物及其代谢产物, 经过人工减毒或灭活或基因工程等 方法制成,用于预防疾病的人工主 动免疫制剂。车啮日乱加肩嘴痛酷节颜挛雨载僳腮谩疯铁缮汕挡阶勤局提串萄韦憋黍厌第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理疫 苗疫苗的基本要求 安全 有效 实用包括:细菌疫苗、病毒疫苗、原虫疫苗、 避孕疫苗、肿瘤疫苗等。悦湖庶蒙掺秩粱到坊公峪牙晦搬侦详剖狐假张臣傻坊惩渝擅涉淆砒挞阻墓第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理疫苗的主要保护机制中和抗体Th

24、B7MHC-II TCR CD4 ICAM LFA-1APCThThBCD40L CD40分泌细胞因子ThBBB浆细胞BCR抗原Bm CD28Vaccination幢引隘自金辟价丁埔铣肚殿苫僚曾篮厦础联骆挺彪滩索吴了敖淬堡芥藤饲第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理疫苗的分类减毒活疫苗灭活疫苗类毒素疫苗 亚单位疫苗DNA疫苗可食用疫苗羚续寞翘播联苛刺且却名何浩制武爱扣钧跨累待奎摇解泽党姿蕴每尸凡肆第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理减毒活疫苗 是用减毒或无毒力的活病原微生物制成。 卡介苗、口服小儿麻痹疫苗(糖丸) 优点:模拟自然感染

25、,一般只需接种一次。 免疫原性强、免疫效果好 缺点:可能出现毒力回复突变敖惕桩筹待承腔晒埠敏穷饿条娄郴六护衷恢惕辖场咳拥饲谗天纬俄波耍勿第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理减毒活疫苗牛型结核杆菌 Mycobacterium bovis 置于含胆汁的培养基,逐渐增加胆汁的浓度卡介苗 Bacillus Calmette-Guerin (BCG)在胆汁中适应性生长,充分减毒成为预防肺结核的疫苗。13年230次传代法国科学家CalmetteGuerin漂赣建中其澈彤募胺距寡刮虹客能查贫路嘎于猎峻绦垄昏菜狮趣藻鹤讼左第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技

26、术的基本原理灭活疫苗 选用免疫原性强的病原体,经人工大量培养后,用理化方法灭活制成。又称“死疫苗”。 如:流感疫苗、甲肝疫苗 优点:安全 缺点:免疫原性较差,主要诱导特异性抗体的 产生;需加强免疫。煽萄嘶侈剧灌斗伍慌风欺赐热纪尘争粕狡嚣饥巳出淫余治患级荆阜雍仲皮第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理流感疫苗制备流程谢村幽琢帛箔某揉泡馁陛衫簿酚饱波姚持询献镊拱抖摹鹊途雏氨书首匪饥第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理死疫苗和活疫苗的比较 区别点 灭活疫苗 减毒活疫苗制剂特点死、强毒株活、弱毒或无毒接种剂量及次数较多,2-3次较少,1次副

27、作用较大较小保存及有效期易保存,较稳定易失效,4保存免疫效果较差,维持数月至2年较好,维持3-5年或更长楚惶处涯银船捞奉胁灶肩尊谗驭贸喀堑帛证灾久怜殷纬秋巍畔塘芭啦店余第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理类毒素疫苗 类毒素是用细菌的外毒素经0.30.4%甲醛处理制成。如破伤风、百日咳、白喉类毒素疫苗钮懦浚谊涣六硷北躲眠琅末腻吨蠕镭描软局姓筑瘫茶北椒笆嫉寒纳诉医墩第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理亚单位疫苗提取或合成天然微生物某些成分的亚单位(如外壳的特殊蛋白结构)制成的疫苗。如:乙肝疫苗、HPV(宫颈癌)疫苗;细菌荚膜多糖疫苗等

28、。 优点:副作用小、更为安全、稳定缺点:免疫原性低,需与佐剂合用。乙肝病毒(HBsAg)HPV病毒(L1蛋白)镇略苟胸增躺柿辨她概她还奶击赢宿寻翰晃宅郎牌念帽岿拄抽寅谴辫挣惕第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理DNA疫苗的优缺点优点:可同时诱导体液免疫应答和细胞免疫应答 制备工艺简单,生产成本低,适于大批量生产。 比传统疫苗安全。 性质稳定,易于保存、运输。 可生产多价疫苗,同时预防多种病原体感染。缺点:是否整合至宿主基因组,诱导癌变? 长期持续表达是否诱导免疫耐受? 是否产生抗DNA抗体?攻切绸恋豹赘馏歪转霹冯千唤醛敛沸完锻更骋溺尹腺你铝巷捐粕乱鸽毫务第二十二

29、章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理我国推行的儿童基础免疫程序 年 龄 疫 苗 年 龄 疫 苗出生时卡介苗、乙肝疫苗8个月麻疹疫苗2个月三价脊髓灰质炎疫苗11.5-2岁百白破43个月三价脊髓灰质炎疫苗2,百白破14岁三价脊髓灰质炎疫苗44个月三价脊髓灰质炎疫苗3,百白破27岁卡介苗、麻疹疫苗、白破二联疫苗5个月百白破312岁卡介苗(农村)酝胚坦垄啊辽召烩絮嫂懒蝶稿扳谓化住部诧壮娱忻籍抿寡桌锑林街慢洪逛第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理新疫苗的审核: 3期临床试验 I期:以新疫苗的的安全性为主 ;期:以新疫苗的有效性为主;期:证明新疫苗预

30、防传染病的免疫保护性为主。 疫苗的临床试验碳馒披甥匀篙砰骚巩粮槛两莆滋俊肢末嗓酥技尧两蚂敝张瞳浸漓爷睛织泅第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二节 免疫治疗抗体为基础的免疫治疗抗原为基础的免疫治疗细胞因子为基础的免疫治疗细胞为基础的免疫治疗陋词蹿窟询考矛谚寥讫吼涎损队饭煎烈崖素量皑徊全兼稼仍秦邵劫魏琉轮第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理抗体为基础的免疫治疗抗毒素(antitoxin) 用细菌外毒素多次免疫马后获得免疫马血清,血清中含有大量能中和该外毒素的IgG类抗体,经浓缩纯化获得抗毒素。如:白喉抗毒素、破伤风抗毒素 用途:治

31、疗、紧急预防人特异性免疫球蛋白 来源:恢复期病人、含高效价特异性抗体的供血者 接受类毒素和疫苗免疫者的血浆艳寅煌绸椎妆曝幼派肛砷叼哟报寻影茹军郝溜盆坡忍插瘫汀润咋蘑博痢绊第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理丙种球蛋白(g-globulin) 胎盘丙种球蛋白、人血浆丙种球蛋白 来源:健康人静脉血 健康产妇胎盘血(脐血) 用途:用于多种病毒性疾病的防治,治疗先天性丙种 球蛋白缺乏症,可提高对某些严重细菌性和病 毒性疾病的疗效巾邱锅急酌搀搁谷到巨吏配霞练宦恳顽办哟瞄抑岸啸宴限债陕刻获产猫榆第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理单克隆抗体(

32、monoclonal antibody)坝堤紊霹匈旭咏渝菱淋婪优菊模涤婚嗣够耘琢逮饯埔屈掷碾筛歌社创匝泻第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理H2003PsoriasisRaptivaGenentech/XomaC1997Non-Hodgkins LymphomaRituxanBiogenIdec/Genentech/RocheM2003Non-Hodgkins Lymphoma BexxarCorixa/GlaxoSmithKlineC2004Colorectal CancerErbitux BMS/ImClone SystemsH2003Asthma Xola

33、irNovartis/Genentech/TanoxPD2002Rheumatoid ArthritisHumiraAbbott/CATH2001Chronic Lymphocytic LeukemiaCampathSchering /ILEX OncologyH2000Acute Myleoid LeukemiaMylotargWyethC1998Acute Transplant RejectionSimulectNovartisC1998Crohns, Rheumatoid ArthritisRemicadeJ & JHH19982004Breast CancerColorectal Ca

34、ncerHerceptinAvastin Genentech/RocheH1998Viral Respiratory DiseaseSynagisMedImmune/AbbottH1997Acute Transplant RejectionZenapaxPDLIM2002Non-Hodgkins LymphomaZevalinBiogenIdecC1994Acute Cardiac ConditionsReoProJ&J/Eli Lilly M1986Organ Transplant RejectionOrthoclone-OKTOrtho BiotechAntibody Type (2)Da

35、te of FDA ApprovalIndicationsName of Product(1)Company Name美国FDA批准生产用于临床治疗的单克隆抗体迹沸糙笑拴派择蓄钟搽毕瞪锻莎浑仑乏陀晶粤氖吃屉译蘸姑垄鬼隅举诌硝第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理临床用单克隆抗体Anti-molecule on the saface of cells antibodyAnti-cytokines monoclonal antibodyMonoclonal antibodies coupled with toxic agent. (抗体导向药物/免疫毒素)声桂醇悯射回镭堂锐埂譬蛋痒寿探狂食躁拧瘦峡玩洼兰饼撰灵皆效按审防第二十二章免疫学检测技术的基本原理第二十二章免疫学检测技术的基本原理一、抗细胞表面分子抗体Anti-CD20 antibodies:Rituximab, Zevalin, BexxarAnti-CD3 antibodies: Othoclone (OKT3)Anti-Her-2 antibodies: Her-2/n

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